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固定化金属离子亲和发光二氧化硅纳米粒子的制备及其用于磷酸化蛋白免疫印迹标记被引量：1: 1; 作者毛雨晓郑蒙蒙 +2 位作者刘桂真安保礼康经武《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期384-390,共7页; 发展了一种能够识别磷酸化蛋白的固定化金属离子亲和发光二氧化硅纳米粒子用于免疫印迹(Western Blot)磷酸化蛋白的标记。首先通过反相微乳液Stöber方法合成了掺杂异硫氰酸荧光素硅烷化衍生物的发光二氧化硅(FITC@SiO_(2))球形纳... 展开更多; 关键词免疫印迹固定化金属离子亲和发光二氧化硅纳米粒子磷酸化蛋白标记; 在线阅读下载PDF 职称材料

基于天冬氨酸的固定化金属离子亲和色谱材料用于磷酸化肽选择性富集被引量：3: 2; 作者申惠莲卡哈尔.阿里木《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期334-338,共5页; 采用点击化学的方法将自然界中的天冬氨酸(aspartic acid)键合到硅球上(命名为Click Asp),并将Fe3+配位到Click Asp上,合成固定金属离子亲和色谱(IMAC)材料(Fe3+-Click Asp);采用红外光谱、X射线电子能谱和扫描电镜等表征证明Fe3+-Click... 展开更多; 关键词天冬氨酸固相萃取固定化金属离子亲和色谱磷酸化肽富集; 在线阅读下载PDF 职称材料

基于亲和色谱的肺癌细胞磷酸化蛋白质组研究及其应用被引量：5: 3; 作者张宝会王晨桐 +1 位作者郭淼肖华《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期77-86,共10页; 磷酸化是蛋白质翻译后修饰的重要形式之一,其异常往往会导致细胞内信号通路的紊乱和疾病的发生。固定化金属离子亲和色谱(IMAC)是磷酸化肽段的高效富集技术,在磷酸化蛋白质组研究方面应用广泛。该研究以金属钛离子(Ti^4+)螯合IMAC材料(T... 展开更多; 关键词固定化金属离子亲和色谱磷酸化蛋白质组癌症转移肺癌细胞; 在线阅读下载PDF 职称材料

蛋白折叠液相色谱法复性和纯化大肠杆菌表达的重组人粒细胞集落刺激因子被引量：9: 4; 作者王超展王骊丽耿信笃《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期514-517,共4页; 用蛋白折叠液相色谱法(PFLC)对大肠杆菌表达的包涵体形式的重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)进行了复性并同时纯化。用Cu2+-亚氨基二乙酸(IDA)Sepharose作为固定化金属离子亲和色谱的固定相。在低浓度脲存在下,以咪唑为洗脱剂,采用线... 展开更多; 关键词固定化金属离子亲和色谱蛋白折叠纯化重组人粒细胞集落刺激因子大肠杆菌; 在线阅读下载PDF 职称材料

蛋白质组衍生肽段文库用于鉴定酪蛋白激酶2的底物模体被引量：2: 5; 作者张曼玉王春丽 +4 位作者边阳阳程凯卫晓鸾叶明亮邹汉法《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期706-711,共6页; 模体是蛋白质二级结构上的一种特征序列,激酶底物通常具有一类特征性的模体,识别底物模体对鉴定激酶底物具有重要意义。为了快速鉴定激酶底物模体,将全细胞蛋白质酶解液作为肽段文库的来源,采用碱性磷酸酶去除肽段的固有磷酸化后构建了... 展开更多; 关键词固定化金属离子亲和色谱反相液相色谱-串联质谱模体激酶肽段文库蛋白质组学; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名固定化金属离子亲和发光二氧化硅纳米粒子的制备及其用于磷酸化蛋白免疫印迹标记被引量：1: 1; 作者毛雨晓郑蒙蒙刘桂真安保礼康经武; 机构上海大学理学院化学系中国科学院上海有机化学研究所; 出处《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期384-390,共7页; 基金国家自然科学基金(21775158,92053101,21375140)。; 文摘发展了一种能够识别磷酸化蛋白的固定化金属离子亲和发光二氧化硅纳米粒子用于免疫印迹(Western Blot)磷酸化蛋白的标记。首先通过反相微乳液Stöber方法合成了掺杂异硫氰酸荧光素硅烷化衍生物的发光二氧化硅(FITC@SiO_(2))球形纳米粒子,粒子平均粒径为60 nm。然后通过共聚反应在FITC@SiO_(2)纳米粒子表面生成一层聚合物用于保护纳米粒子,并引入N,N-(双羧甲基)-L-赖氨酸功能基团用于螯合金属离子,从而实现固定化金属离子亲和作用。以α-酪蛋白作为实验模型,用高效液相色谱-质谱研究了螯合不同金属离子的发光纳米粒子对磷酸化蛋白的识别作用。结果表明,螯合了Ti^(4+)金属离子的发光二氧化硅FITC@SiO_(2)纳米粒子对α-酪蛋白酶解液中的磷酸化肽段的富集作用最强。利用这种发光二氧化硅FITC@SiO_(2)纳米粒子对磷酸化肽段的特异性识别性能,可用于Western Blot实验中标记磷酸化蛋白的条带。结果显示,α-酪蛋白的电泳条带可以被亲和发光二氧化硅FITC@SiO_(2)纳米粒子标记,而作为对照的牛血清白蛋白则没有被标记。; 关键词免疫印迹固定化金属离子亲和发光二氧化硅纳米粒子磷酸化蛋白标记; Keywords Western Blot immobilized metal ion affinity luminescent silica nanoparticles phosphorylated protein labelling; 分类号 O658 [理学—分析化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名基于天冬氨酸的固定化金属离子亲和色谱材料用于磷酸化肽选择性富集被引量：3: 2; 作者申惠莲卡哈尔.阿里木; 机构辽宁民族师范高等专科学校新疆农业职业技术学院; 出处《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期334-338,共5页; 文摘采用点击化学的方法将自然界中的天冬氨酸(aspartic acid)键合到硅球上(命名为Click Asp),并将Fe3+配位到Click Asp上,合成固定金属离子亲和色谱(IMAC)材料(Fe3+-Click Asp);采用红外光谱、X射线电子能谱和扫描电镜等表征证明Fe3+-Click Asp成功合成。将此IMAC材料用于蛋白质酶解液和牛奶中的磷酸化肽的富集,实现了磷酸化肽的高选择性富集。本研究为磷酸化蛋白质组学提供了新材料和新方法。; 关键词天冬氨酸固相萃取固定化金属离子亲和色谱磷酸化肽富集; Keywords aspartic acid solid phase extraction(SPE) immobilized metal ion affinity chromatography(IMAC) phosphopeptide enrichment; 分类号 O658 [理学—分析化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名基于亲和色谱的肺癌细胞磷酸化蛋白质组研究及其应用被引量：5: 3; 作者张宝会王晨桐郭淼肖华; 机构微生物代谢国家重点实验室; 出处《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期77-86,共10页; 基金国家重点研发计划(2017YFC1200204) 国家自然科学基金(21675110).; 文摘磷酸化是蛋白质翻译后修饰的重要形式之一,其异常往往会导致细胞内信号通路的紊乱和疾病的发生。固定化金属离子亲和色谱(IMAC)是磷酸化肽段的高效富集技术,在磷酸化蛋白质组研究方面应用广泛。该研究以金属钛离子(Ti^4+)螯合IMAC材料(Ti^4+-IMAC)为载体,进行磷酸化肽段富集。比较了10μm Ti^4+-IMAC通过振荡法和固相萃取法(SPE)富集磷酸肽的效果,发现振荡法可以富集到更多的磷酸肽;对比了两种尺寸(10μm和30μm)Ti^4+-IMAC在磷酸化肽段富集中的差异,发现小尺寸材料富集效果更佳。进一步采用优化的策略比较了不同转移能力肺癌细胞的磷酸化蛋白质组,免标记定量蛋白质组学结果表明,优化的Ti^4+-IMAC方法可以从正常的肺成纤维细胞MRC5、低转移肺癌细胞95C和高转移肺癌细胞95D中分别鉴定到510、863和1108种磷酸化蛋白质,其中317种为3组所共有。该研究共鉴定到1268种磷酸化蛋白质上的7560个磷酸化位点,其中1130个为差异磷酸化位点,文献报道显示部分异常表达的激酶与癌症转移密切相关。通过生信对比分析发现,异常表达的磷酸化蛋白质主要与细胞侵袭、迁移和死亡等细胞迁移方面的功能有关。通过优化磷酸化肽富集策略,初步阐明了磷酸化蛋白质网络的异常与肺癌转移之间的相关性,该方法有望用于肺癌进展相关的磷酸化位点、磷酸化蛋白质及其信号通路研究。; 关键词固定化金属离子亲和色谱磷酸化蛋白质组癌症转移肺癌细胞; Keywords immobilized metal affinity chromatography(IMAC) phosphorylation proteome cancer metastasis lung cancer cell; 分类号 O658 [理学—分析化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名蛋白折叠液相色谱法复性和纯化大肠杆菌表达的重组人粒细胞集落刺激因子被引量：9: 4; 作者王超展王骊丽耿信笃; 机构西北大学化学系现代分离科学研究所现代分离科学陕西省重点实验室; 出处《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期514-517,共4页; 基金国家自然科学基金资助项目(No.20475042) 陕西省重点实验室重点科研计划项目(No.05JS61); 文摘用蛋白折叠液相色谱法(PFLC)对大肠杆菌表达的包涵体形式的重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)进行了复性并同时纯化。用Cu2+-亚氨基二乙酸(IDA)Sepharose作为固定化金属离子亲和色谱的固定相。在低浓度脲存在下,以咪唑为洗脱剂,采用线性梯度洗脱rhG-CSF。该法仅通过一步PFLC分离,减少了复性过程中rhG-CSF的聚集,复性后的rhG-CSF的比活性为1.8×108IU/mg,纯度为97%,质量回收率为32%。; 关键词固定化金属离子亲和色谱蛋白折叠纯化重组人粒细胞集落刺激因子大肠杆菌; Keywords immobilized metal ion affinity chromatography （IMAC） protein refolding purification recombinant human granulocyte colony-stimulating factor （rhG-CSF） Escherichia coli; 分类号 O658 [理学—分析化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名蛋白质组衍生肽段文库用于鉴定酪蛋白激酶2的底物模体被引量：2: 5; 作者张曼玉王春丽边阳阳程凯卫晓鸾叶明亮邹汉法; 机构中国科学院大连化学物理研究所; 出处《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期706-711,共6页; 基金国家自然科学基金创新研究群体科学基金项目(No.21021004); 文摘模体是蛋白质二级结构上的一种特征序列,激酶底物通常具有一类特征性的模体,识别底物模体对鉴定激酶底物具有重要意义。为了快速鉴定激酶底物模体,将全细胞蛋白质酶解液作为肽段文库的来源,采用碱性磷酸酶去除肽段的固有磷酸化后构建了用于筛选激酶底物模体的肽段文库。该肽段文库是大量非磷酸化肽段的混合物,将此混合肽段与酪蛋白激酶2和三磷酸腺苷作用30min后,通过固定化金属离子亲和色谱法富集磷酸化肽段,采用反相液相色谱-串联质谱分析,成功地鉴定到472条非冗余底物肽段,包含451个非冗余磷酸化位点,并由此得到底物模体S/T-D/E-x-D/E。该法能够快速准确地筛选出激酶底物模体,对研究激酶-底物识别以及信号转导过程具有重要意义。; 关键词固定化金属离子亲和色谱反相液相色谱-串联质谱模体激酶肽段文库蛋白质组学; Keywords immobilized metal affinity chromatography（IMAC） reversed-phase liquid chromatography-tandem mass spectrometry（RPLC-MS/MS） motif kinase peptide library proteomics; 分类号 O658 [理学—分析化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	固定化金属离子亲和发光二氧化硅纳米粒子的制备及其用于磷酸化蛋白免疫印迹标记	毛雨晓郑蒙蒙刘桂真安保礼康经武	《色谱》 CAS CSCD 北大核心	2021	1	在线阅读下载PDF 职称材料
2	基于天冬氨酸的固定化金属离子亲和色谱材料用于磷酸化肽选择性富集	申惠莲卡哈尔.阿里木	《色谱》 CAS CSCD 北大核心	2018	3	在线阅读下载PDF 职称材料
3	基于亲和色谱的肺癌细胞磷酸化蛋白质组研究及其应用	张宝会王晨桐郭淼肖华	《色谱》 CAS CSCD 北大核心	2021	5	在线阅读下载PDF 职称材料
4	蛋白折叠液相色谱法复性和纯化大肠杆菌表达的重组人粒细胞集落刺激因子	王超展王骊丽耿信笃	《色谱》 CAS CSCD 北大核心	2007	9	在线阅读下载PDF 职称材料
5	蛋白质组衍生肽段文库用于鉴定酪蛋白激酶2的底物模体	张曼玉王春丽边阳阳程凯卫晓鸾叶明亮邹汉法	《色谱》 CAS CSCD 北大核心	2011	2	在线阅读下载PDF 职称材料