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固定化木瓜蛋白酶填充床反应器水解丝素的初步应用研究 被引量:1
1
作者 陈芳艳 纪平雄 《广东蚕业》 2005年第2期35-38,共4页
本研究首先用氯化钙乙醇溶液溶解丝素,测定了丝素蛋白的相对分子质量, 然后用尼龙固定化木瓜蛋白酶填充床反应器水解丝素。研究结果表明丝素蛋白的相 对分子质量大于66200Da,酶解后丝素溶液的蛋白质含量降低,L-酪氨酸含量提 高,丝素溶... 本研究首先用氯化钙乙醇溶液溶解丝素,测定了丝素蛋白的相对分子质量, 然后用尼龙固定化木瓜蛋白酶填充床反应器水解丝素。研究结果表明丝素蛋白的相 对分子质量大于66200Da,酶解后丝素溶液的蛋白质含量降低,L-酪氨酸含量提 高,丝素溶液稳定性提高。 展开更多
关键词 丝素 尼龙固定化木瓜蛋白酶 反应器 固定化木瓜蛋白酶 填充床反应器 丝素蛋白 水解 相对分子质量 应用 溶液稳定性
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超声场对固定化木瓜蛋白酶的影响研究 被引量:7
2
作者 吴葛洋 曹雁平 +2 位作者 王蓓 王莹 许楠 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期142-145,共4页
用壳聚糖-海藻酸钠固定化木瓜蛋白酶后,超声处理固定化酶能够提高其活力,但对其最适温度与最适pH没有影响。研究了超声温度、超声时间、超声频率及超声强度对固定化酶活力的影响,单因素实验表明,在水浴温度50℃,135kHz,0.45W/cm2条件下... 用壳聚糖-海藻酸钠固定化木瓜蛋白酶后,超声处理固定化酶能够提高其活力,但对其最适温度与最适pH没有影响。研究了超声温度、超声时间、超声频率及超声强度对固定化酶活力的影响,单因素实验表明,在水浴温度50℃,135kHz,0.45W/cm2条件下超声50min时,酶活力提高最为显著,较未经超声处理的固定化木瓜蛋白酶活力提高了25.85%。研究低频槽式超声处理的固定化酶的动力学,结果显示超声处理使Km值降低,与未经超声处理的固定化木瓜蛋白酶Km值相比下降了31.83%,接近游离酶的Km值,Vmax值升高了8.35%。结果表明,超声场使酶与底物的亲和力增加。 展开更多
关键词 固定化木瓜蛋白酶 超声 酶活力 米氏方程
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固定化木瓜蛋白酶活性的X-射线微区分析 被引量:5
3
作者 丁良 姚子华 +1 位作者 李彤 仇满德 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2003年第2期400-402,共3页
利用X-射线微区分析,对共价法得到的固定化木瓜蛋白酶的活性进行了分析;Na-苯甲酰-L-精氨酰胺盐酸盐作为底物,FeCl_3作为捕捉剂,底物经木瓜蛋白酶催化分解产生L-精氨酸及氨,后者和捕捉剂反应产生沉淀,可以确定固定化木瓜蛋白酶的催化活... 利用X-射线微区分析,对共价法得到的固定化木瓜蛋白酶的活性进行了分析;Na-苯甲酰-L-精氨酰胺盐酸盐作为底物,FeCl_3作为捕捉剂,底物经木瓜蛋白酶催化分解产生L-精氨酸及氨,后者和捕捉剂反应产生沉淀,可以确定固定化木瓜蛋白酶的催化活性部位。结果表明:以大孔结构吸附树脂为固定化酶载体,酶活较高,木瓜蛋白酶分布较均匀。并得到了固定化木瓜蛋白酶的活性定位的最佳条件。并对不同结构载体固定化木瓜蛋白酶的活性进行了研究。 展开更多
关键词 固定化木瓜蛋白酶 酶活性 X-射线微区分析 载体
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超声对包埋-交联法固定化木瓜蛋白酶催化活性的影响 被引量:4
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作者 王超 曹雁平 +3 位作者 王蓓 黄正华 孙佳 陈海清 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第21期264-266,共3页
研究超声对包埋-交联法固定化木瓜蛋白酶催化活性的影响。将醋酸纤维素铺制成膜,包埋木瓜蛋白酶;以戊二醛为交联剂,进行交联反应,制得固定化木瓜蛋白酶。分别研究超声频率、超声功率和超声时间对固定化酶活性的影响,再由均匀试验得到超... 研究超声对包埋-交联法固定化木瓜蛋白酶催化活性的影响。将醋酸纤维素铺制成膜,包埋木瓜蛋白酶;以戊二醛为交联剂,进行交联反应,制得固定化木瓜蛋白酶。分别研究超声频率、超声功率和超声时间对固定化酶活性的影响,再由均匀试验得到超声强化固定化木瓜蛋白酶催化活性的最优条件。经均匀试验确定最优超声条件为135kHz、0.05W/cm2、25min,相对酶活力为197.22%。验证实验证明最优的超声条件下测得固定化木瓜蛋白酶的相对酶活力为182.68%,相对标准偏差为7.37%,没有显著差异。 展开更多
关键词 超声 固定化木瓜蛋白酶 酶活力 均匀试验
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海藻酸钠-壳聚糖固定化木瓜蛋白酶催化内吗啡肽的合成(英文) 被引量:5
5
作者 何平 黄卓烈 +3 位作者 黎春怡 陈维嘉 巫光宏 初志战 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期426-431,共6页
反应体系以乙腈作为有机介质,在微水有机溶剂体系中以Boc-Trp-OH和Phe-NH2为底物,用海藻酸钠-壳聚糖固定化木瓜蛋白酶催化合成Trp-Phe-NH2时,产率为27.8%.在这一合成反应中,对pH值、离子强度、溶液含量、反应温度、酶用量和反应时间进... 反应体系以乙腈作为有机介质,在微水有机溶剂体系中以Boc-Trp-OH和Phe-NH2为底物,用海藻酸钠-壳聚糖固定化木瓜蛋白酶催化合成Trp-Phe-NH2时,产率为27.8%.在这一合成反应中,对pH值、离子强度、溶液含量、反应温度、酶用量和反应时间进行正交试验,证明pH是本合成过程的最重要影响因素.反应体系以乙腈为有机介质,在微水有机溶剂体系中以Boc-Tyr-Pro-OMe和Trp-Phe-NH2为底物,用IPSAC催化合成Tyr-Pro-Trp-Phe-NH2,产率为35.2%. 展开更多
关键词 内吗啡肽 固定化木瓜蛋白酶 有机溶剂
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用木瓜蛋白酶及固定化木瓜蛋白酶拆分DL-苯丙氨酸(英文) 被引量:3
6
作者 何平 黄卓烈 +3 位作者 巫光宏 初志战 史清翠 黄家乐 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期23-29,共7页
为了将手性化合物D-苯丙氨酸和L-苯丙氨酸进行分离,利用木瓜蛋白酶及固定化木瓜蛋白酶催化的方法对其拆分.试验结果表明,用DL-苯丙氨酸合成N-乙酰-DL-苯丙氨酸,得率为88.7%.木瓜蛋白酶、海藻酸钠-壳聚糖固定化木瓜蛋白酶(IPSAC)、尼龙... 为了将手性化合物D-苯丙氨酸和L-苯丙氨酸进行分离,利用木瓜蛋白酶及固定化木瓜蛋白酶催化的方法对其拆分.试验结果表明,用DL-苯丙氨酸合成N-乙酰-DL-苯丙氨酸,得率为88.7%.木瓜蛋白酶、海藻酸钠-壳聚糖固定化木瓜蛋白酶(IPSAC)、尼龙布固定化木瓜蛋白酶(IPN)催化合成N-乙酰-L-苯丙氨酰苯胺时,对催化合成过程影响最大的因素分别是溶液中的离子强度、溶液中的离子强度、反应温度;溶液中的离子强度与pH对合成的影响较大.本试验得出分别用木瓜蛋白酶、IPSAC、IPN催化合成N-乙酰-L-苯丙氨酰苯胺的3个最佳方案;用此3个方案合成时,产率分别为61.2%、54.7%、36.3%.N-乙酰-L-苯丙氨酰苯胺水解生成L-苯丙氨酸,产率59.2%,光学纯度为96.6%.N-乙酰-D-苯丙氨酸水解生成D-苯丙氨酸,产率61.7%,光学纯度为95.7%. 展开更多
关键词 固定化木瓜蛋白酶 DL-苯丙氨酸 拆分 光学纯度
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超声对改性明胶固定化木瓜蛋白酶活力的影响 被引量:4
7
作者 白鸽 郑德娟 +2 位作者 张杰 陈雪 曹雁平 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期118-122,共5页
本文探讨了超声处理对戊二醛改性明胶包埋的木瓜蛋白酶酶解反应条件以及酶学特性的影响。采用均匀实验的方法优化超声处理固定化木瓜蛋白酶的反应条件。利用偏最小二乘回归法分析均匀实验结果,得到最优条件为:135 k Hz、0.05 W/cm2、20 ... 本文探讨了超声处理对戊二醛改性明胶包埋的木瓜蛋白酶酶解反应条件以及酶学特性的影响。采用均匀实验的方法优化超声处理固定化木瓜蛋白酶的反应条件。利用偏最小二乘回归法分析均匀实验结果,得到最优条件为:135 k Hz、0.05 W/cm2、20 min、40℃,此条件下实测相对酶活为221.25%,与理论值相对误差为3.58%。超声并没有改变固定化酶的最适p H和最适温度,即超声并不改变固定化酶的酶学特性。 展开更多
关键词 超声 固定化木瓜蛋白酶 酶活力
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丝素固定化木瓜蛋白酶的特性研究 被引量:4
8
作者 陈芳艳 纪平雄 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期81-83,共3页
以活化丝素为载体,采用共价交联法固定木瓜蛋白酶,研究了丝素固定化木瓜蛋白酶的酶学性质. 结果表明:固定化酶的表观米氏常数Kappm[酪蛋白]为0.092%,是溶液酶的米氏常数Km的0.46倍;最适pH为 7.5;pH 稳定性在6.5~8.0;在4~55 ℃范围内... 以活化丝素为载体,采用共价交联法固定木瓜蛋白酶,研究了丝素固定化木瓜蛋白酶的酶学性质. 结果表明:固定化酶的表观米氏常数Kappm[酪蛋白]为0.092%,是溶液酶的米氏常数Km的0.46倍;最适pH为 7.5;pH 稳定性在6.5~8.0;在4~55 ℃范围内酶活力稳定;溶液酶的操作半衰期为38 d,固定化酶为54 d. 固定化酶的操作半衰期较溶液酶长. 展开更多
关键词 丝素 固定化木瓜蛋白酶 酶学特性
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壳聚糖微球固定化木瓜蛋白酶填充床反应器的试制研究 被引量:2
9
作者 李红 王炜军 徐凤彩 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期60-62,共3页
在研究了壳聚糖微球固定化木瓜蛋白酶的酶学性质的基础上 ,试制壳聚糖微球固定化木瓜蛋白酶的填充床反应器以降解酪蛋白 ,研究了该反应器的实验条件、操作参数及对酪蛋白的降解能力 .结果表明 :在一定的实验条件下 ,该填充床反应器的生... 在研究了壳聚糖微球固定化木瓜蛋白酶的酶学性质的基础上 ,试制壳聚糖微球固定化木瓜蛋白酶的填充床反应器以降解酪蛋白 ,研究了该反应器的实验条件、操作参数及对酪蛋白的降解能力 .结果表明 :在一定的实验条件下 ,该填充床反应器的生产强度最高可达到 0 0 96g/ (L·h) ;产品转化率在第 1~ 4d均达 98.5 6 %~ 99.71 % ; 展开更多
关键词 固定化木瓜蛋白酶 填充床反应器 壳聚糖微球
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超声对固定化木瓜蛋白酶化学动力学的影响 被引量:1
10
作者 丁琳 王真 +2 位作者 郑德娟 程磊 曹雁平 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期47-51,共5页
以固定化木瓜蛋白酶的表观酶活力为指标,探讨超声频率及功率对固定化木瓜蛋白酶化学反应动力学的影响。发现:固定化木瓜蛋白酶的酶解反应符合一级反应动力学特征,超声处理能明显降低此反应的表观活化能。超声功率为0.05 W/cm^2,超声频率... 以固定化木瓜蛋白酶的表观酶活力为指标,探讨超声频率及功率对固定化木瓜蛋白酶化学反应动力学的影响。发现:固定化木瓜蛋白酶的酶解反应符合一级反应动力学特征,超声处理能明显降低此反应的表观活化能。超声功率为0.05 W/cm^2,超声频率为28、40、50、135 kHz时,表观活化能逐渐降低,在135 kHz,0.05W/cm^2时最低为38.23±0.53 kJ/mol;超声频率为135 kHz,超声功率从0.05 W/cm^2到0.45 W/cm^2时,表观活化能在135 kHz 0.25 W/cm^2的超声条件下最低为32.81±0.09 kJ/mol,比非超声条件下的表观活化能降低52.48%。 展开更多
关键词 超声 固定化木瓜蛋白酶 化学动力学 表观活化能
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丝素固定化木瓜蛋白酶填充床反应器及其应用研究 被引量:2
11
作者 陈芳艳 纪平雄 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期286-289,共4页
在研究丝素固定化木瓜蛋白酶的固定条件和酶学性质的基础上,研制了丝素固定化木瓜蛋白酶填充床反应器,用以降解酪蛋白,并研究了该反应器的实验条件、操作参数及对酪蛋白的降解能力.结果表明:在恒温30℃,恒定流速5.5 mL/h,酪蛋白质量分数... 在研究丝素固定化木瓜蛋白酶的固定条件和酶学性质的基础上,研制了丝素固定化木瓜蛋白酶填充床反应器,用以降解酪蛋白,并研究了该反应器的实验条件、操作参数及对酪蛋白的降解能力.结果表明:在恒温30℃,恒定流速5.5 mL/h,酪蛋白质量分数为0.5%的条件下,该填充床反应器的生产强度最高达1.42g/(L·h);产品转化率在2~13 d内均能达到87.4%~99.9%;对酪蛋白的降解能力良好. 展开更多
关键词 丝素固定化木瓜蛋白酶 填充床反应器 蛋白
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明胶-壳聚糖-海藻酸钠凝胶包埋木瓜蛋白酶的研究 被引量:9
12
作者 刘佳炜 王真 +1 位作者 江雪雪 曹雁平 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期1-5,10,共6页
本文采用明胶和改性明胶,分别制备明胶-壳聚糖-海藻酸钠凝胶,采用其包埋木瓜蛋白酶。以硬度和酶活为指标,通过单因素实验研究明胶-壳聚糖-海藻酸钠质量浓度、Ca Cl_2浓度和p H因素的影响,并采用均匀实验优化工艺条件。通过单因素及均匀... 本文采用明胶和改性明胶,分别制备明胶-壳聚糖-海藻酸钠凝胶,采用其包埋木瓜蛋白酶。以硬度和酶活为指标,通过单因素实验研究明胶-壳聚糖-海藻酸钠质量浓度、Ca Cl_2浓度和p H因素的影响,并采用均匀实验优化工艺条件。通过单因素及均匀优化实验,获得固定化酶制备最佳条件:使用明胶优化结果:明胶浓度0.45%、壳聚糖浓度0.42%、海藻酸钠浓度2.55%、Ca Cl_2浓度0.8 mol/L、缓冲液p H7.5;使用改性明胶优化结果:改性明胶浓度0.45%、壳聚糖浓度0.15%、海藻酸钠浓度2.55%、Ca Cl_2浓度0.8 mol/L、p H6.5。均匀实验优化结果表明,与使用明胶相比使用改性明胶的酶活提高37%,硬度减少35%。使用改性明胶可提高固定化酶的酶活力,为提高固定化酶活力的研究提供一定的理论基础。 展开更多
关键词 明胶 改性 壳聚糖 海藻酸钠 固定化木瓜蛋白酶
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应用双固定化酶制备大豆肽的研究 被引量:11
13
作者 曹玉华 杨慧萍 +1 位作者 杨卫民 王肇慈 《中国粮油学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2003年第5期40-43,共4页
采用固定化胰蛋白酶和固定化木瓜蛋白酶分步对大豆分离蛋白进行水解 ,水解后酶解液中大豆肽含量为 1.6 2 8~ 1.70 2mg/mL ,水解度为 5 4.4 %~ 5 7.8%。多肽分子量在 180以下水解度为 11.1%~ 13.5 % ,181~ 2 0 0 0为 11.5 %~ 14 .5 ... 采用固定化胰蛋白酶和固定化木瓜蛋白酶分步对大豆分离蛋白进行水解 ,水解后酶解液中大豆肽含量为 1.6 2 8~ 1.70 2mg/mL ,水解度为 5 4.4 %~ 5 7.8%。多肽分子量在 180以下水解度为 11.1%~ 13.5 % ,181~ 2 0 0 0为 11.5 %~ 14 .5 % ,2 0 0 0~ 5 70 0为 2 7.1%~ 2 7.2 % ,5 70 0~ 10 0 0 0为 4 4.7%~ 4 9.6 %。结果表明 :双固定化酶对大豆分离蛋白的水解作用效率高 ,并能有效地将大豆分离蛋白降解为分子量更小的大豆肽。 展开更多
关键词 固定化蛋白酶 固定化木瓜蛋白酶 大豆分离蛋白 大豆肽 水解
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超声强化固定化酶催化活性条件的优化
14
作者 程磊 刘佳炜 +2 位作者 郑德娟 丁琳 曹雁平 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2018年第13期227-229,274,共4页
本文主要是在海藻酸钠-改性明胶包埋木瓜蛋白酶的基础上,优化超声对固定化木瓜蛋白酶催化活性的条件。采用单因素实验从超声功率、超声频率、超声温度、超声时间四个方面研究超声对固定化酶催化活性的影响,最后利用DPS软件设计均匀实验... 本文主要是在海藻酸钠-改性明胶包埋木瓜蛋白酶的基础上,优化超声对固定化木瓜蛋白酶催化活性的条件。采用单因素实验从超声功率、超声频率、超声温度、超声时间四个方面研究超声对固定化酶催化活性的影响,最后利用DPS软件设计均匀实验得到最优超声条件。结果显示最优超声条件:超声功率为0.35 W/cm^2、超声频率40 k Hz、超声温度60℃、超声时间40 min,相对酶活力为273.23%。验证实验测得相对酶活力为260.37%±12.23%,验证值与预测值相对标准偏差为2.41%,可信度高。通过本研究证明适宜的超声处理能提高固定化酶活力。 展开更多
关键词 超声 固定化木瓜蛋白酶 相对酶活力 偏最小二乘回归分析法
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