MTT法检测雷公藤内酯醇对晶状体上皮细胞增殖的影晌 被引量：1

1

作者 马兰 黄秀榕 +3 位作者 祁明信 胡艳红 吴正正 龙儒桃 《海南医学院学报》 CAS 2003年第6期327-330,共4页

目的:研究雷公藤内酯醇对体外培养的牛晶状体上皮细胞增殖的抑制作用。方法:取第4代对数生长期的牛晶状体上皮细胞培养24h后,加入重组人表皮生长因子(终浓度50μg/L)和不同浓度的雷公藤内酯醇(40,20,10μg/L),分别作用6,12,24,48,72h后... 目的:研究雷公藤内酯醇对体外培养的牛晶状体上皮细胞增殖的抑制作用。方法:取第4代对数生长期的牛晶状体上皮细胞培养24h后,加入重组人表皮生长因子(终浓度50μg/L)和不同浓度的雷公藤内酯醇(40,20,10μg/L),分别作用6,12,24,48,72h后,采用MTT法观察雷公藤内酯醇对牛晶状体上皮细胞增殖的影响。结果:不同浓度的雷公藤内酯醇,于不同时间作用在处于增殖状态的LECs,其增殖抑制率升高呈现明显的时间及剂量依赖性。结论:雷公藤内酯醇对晶状体上皮细胞增殖有明显的抑制作用在防止后囊混浊方面有广阔的前景。 展开更多

关键词 雷公藤内酯醇 晶体 上皮样细胞 四甲基偶氮唑盐法

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MTT、MTS、WST-1在细胞增殖检测中最佳实验条件的研究 被引量：35

2

作者 李红艳 夏启胜 +4 位作者 徐梅 房青 徐波 陈志华 向青 《中国康复医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第11期824-826,共3页

目的:探讨MTT、MTS、WST-1三种四唑盐在细胞增殖检测中的最佳实验条件。方法:取对数生长期的小鼠黑色素瘤B16细胞,用10%胎牛血清DMEM培养液制成不同浓度的细胞悬液加入96孔培养板中培养24h,分别加入三种试剂后在450nm、492nm和630nm波... 目的:探讨MTT、MTS、WST-1三种四唑盐在细胞增殖检测中的最佳实验条件。方法:取对数生长期的小鼠黑色素瘤B16细胞,用10%胎牛血清DMEM培养液制成不同浓度的细胞悬液加入96孔培养板中培养24h,分别加入三种试剂后在450nm、492nm和630nm波长处测定OD值,根据不同波长所测OD值的大小确定三种试剂的最佳实验波长。根据细胞浓度与OD值关系曲线确定三种试剂各自的最适细胞浓度。取最适浓度的B16细胞分别加入三种试剂在0.5h、1h、2h和4h四个不同时间点测定吸收值,根据OD值确定最佳的检测时间。结果:MTT、MTS法的最佳波长为492nm,WST-1法为450nm。MTT的最适细胞接种浓度为1.6×103—2.56×104/mL,MTS的最适细胞接种浓度为5×10—6.4×103/mL,WST-1的最适细胞接种浓度为2.5×10—1.6×103/mL。三种方法的最佳测定时间均为4h。结论:MTT、MTS、WST-1分别适用于不同条件下检测细胞的存活与增殖,可为抗病毒及抗癌药物的筛选提供实验依据。 展开更多

关键词 四甲基偶氮唑盐法 内盐法 四唑单钠盐法 细胞增殖

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荧光素二乙酸酯荧光微孔板法在细胞活力测定中的应用 被引量：3

3

作者 陈熙 杨秀颖 +1 位作者 方莲花 杜冠华 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期710-714,共5页

目的评估荧光素二乙酸酯（FDA）微孔板检测法在细胞活力测定中的应用。方法培养板接种细胞,加入FDA孵育一定时间,多功能微板分析仪测定荧光值。评价FDA孵育时间、浓度及其他影响因素对检测精确度的影响,并与四甲基偶氮唑盐（MTT）方法在... 目的评估荧光素二乙酸酯（FDA）微孔板检测法在细胞活力测定中的应用。方法培养板接种细胞,加入FDA孵育一定时间,多功能微板分析仪测定荧光值。评价FDA孵育时间、浓度及其他影响因素对检测精确度的影响,并与四甲基偶氮唑盐（MTT）方法在H2O2损伤及细胞数量的检测方面进行比较。结果随着孵育时间的延长,荧光值与细胞数的相关系数随之增加,27-30 min时可达到0.99。FDA终浓度在10-30μg/ml时,荧光值与细胞数的相关系数较高。在H2O2损伤模型检测中,与四甲基偶氮唑盐相比,FDA在H2O2高浓度时相关性更强。结论 FDA法检测细胞活力稳定可靠,适用于多种条件下的细胞活力检测及药理学研究。 展开更多

关键词 荧光素二乙酸酯 荧光 微孔板检测 细胞活力 四甲基偶氮唑盐 细胞毒

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2-甲氧基-4-羟基-5-乙酰基偶氮苯-4′-胂酸的合成及生物活性初探 被引量：3

4

作者 曹阳 祁俊生 +1 位作者 王远亮 张文 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2004年第5期426-430,共5页

本文通过丹皮酚与对氨基苯胂酸 (阿散酸 )进行偶联反应 ,合成了丹皮酚的偶氮化合物 ,即 2 甲氧基 4 羟基 5 乙酰基偶氮苯 4′ 胂酸 (化合物 4 )。同时 ,对该化合物进行了结构表征 ,以及采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定不同浓度... 本文通过丹皮酚与对氨基苯胂酸 (阿散酸 )进行偶联反应 ,合成了丹皮酚的偶氮化合物 ,即 2 甲氧基 4 羟基 5 乙酰基偶氮苯 4′ 胂酸 (化合物 4 )。同时 ,对该化合物进行了结构表征 ,以及采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定不同浓度化合物 4作用下不同时间对人肝癌细胞株HepG2细胞生长的抑制作用。初步研究显示化合物 4能明显抑制人肝癌细胞株HepG2的生长 ,其作用呈剂量及时间依赖性 ,且明显强于丹皮酚和阿散酸的单独作用 ,表明其有潜在抗肿瘤活性。 展开更多

关键词 丹皮酚 人肝癌细胞株 四甲基偶氮唑蓝 不同时间 HepG2细胞 甲氧基 mtt 偶氮苯 酰基 化合物

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西加毒素细胞毒性检测方法的建立 被引量：4

5

作者 郑露 朱海 +7 位作者 郭爱珍 范放 李金峰 赵芳 杨小夏 洪小柳 马淑棉 司徒翠华 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期502-506,共5页

小鼠神经母细胞瘤细胞经体外培养后,加入不同剂量的太平洋西加毒素(Pacific ciguatoxin-1,P-CTX-1)、箭毒苷和藜芦定,在不同时间点终止培养,以四甲基偶氮唑蓝(MTT)标定活细胞量,分析西加毒素剂量与细胞活性之间的线性关系。结果发现,细... 小鼠神经母细胞瘤细胞经体外培养后,加入不同剂量的太平洋西加毒素(Pacific ciguatoxin-1,P-CTX-1)、箭毒苷和藜芦定,在不同时间点终止培养,以四甲基偶氮唑蓝(MTT)标定活细胞量,分析西加毒素剂量与细胞活性之间的线性关系。结果发现,细胞与毒素作用不同时间,西加毒素剂量(x)与光密度值(y)之间的线性关系呈现差异。在10 h、15 h及20 h等不同时间,其线性方程分别为y=-0.082 6x+0.923 0(R2=0.978 9)、y=-0.044 3x+0.601 5(R2=0.962 1)、y=-0.020 4x+0.323 7(R2=0.928 1)。以10 h的检测效率最高及检测结果最准确,因此将其定为最佳检测时间。细胞病变观察也证实了以上结果。 展开更多

关键词 西加毒素(P-CTX-1) 细胞毒性试验 四甲基偶氮唑蓝(mtt)

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新生牛血清促细胞生长活性检测方法的建立与应用 被引量：5

6

作者 庄金秋 梅建国 +2 位作者 管宇 苗立中 沈志强 《中国奶牛》 2011年第6期31-37,共7页

牛血清是医药生物技术产品中重要的原辅材料之一,做好牛血清的质量控制是提高生物制品质量的重要环节。本研究通过应用PK15、BHK21和ST三种兽用生物制品研制中常用的细胞作为载体,选用国内同等价位5个不同厂家生产的新生牛血清作为比较... 牛血清是医药生物技术产品中重要的原辅材料之一,做好牛血清的质量控制是提高生物制品质量的重要环节。本研究通过应用PK15、BHK21和ST三种兽用生物制品研制中常用的细胞作为载体,选用国内同等价位5个不同厂家生产的新生牛血清作为比较对象,采用细胞倍增时间测定法、细胞克隆形成率测定法、细胞三次连续传代培养法、MTT比色法和微量终点稀释法五种血清质量鉴定的方法进行比较,检测新生牛血清的促细胞生长活性,最终确定了MTT比色法作为便捷高效快速筛选新生牛血清的检测方法。 展开更多

关键词 新生牛血清 细胞倍增时间 四甲基偶氮唑盐比色法(mtt) 检测方法

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黑灵芝多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖及诱生细胞因子的影响 被引量：47

7

作者 朱科学 聂少平 +3 位作者 李文娟 余强 张莘莘 谢明勇 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第19期351-354,共4页

目的:研究黑灵芝多糖(PSG-1)对小鼠脾淋巴细胞增殖及诱生细胞因子的影响。方法:采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测PSG-1在不同质量浓度、不同时间对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响,检测不同质量浓度PSG-1单独作用及其与丝裂原共同作用对小鼠T、... 目的:研究黑灵芝多糖(PSG-1)对小鼠脾淋巴细胞增殖及诱生细胞因子的影响。方法:采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测PSG-1在不同质量浓度、不同时间对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响,检测不同质量浓度PSG-1单独作用及其与丝裂原共同作用对小鼠T、B淋巴细胞增殖作用的影响;用酶联免疫吸附实验(ELISA)法测定白介素-2(IL-2)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量。结果:PSG-1在20～160μg/mL质量浓度范围能显著促进脾细胞的增殖,且48h效果最佳;PSG-1能显著增强刀豆蛋白A(ConA)诱导的T淋巴细胞和脂多糖(LPS)诱导的B淋巴细胞的增殖作用;并且能显著诱导脾淋巴细胞分泌IL-2和TNF-α。结论:PSG-1能有效的促进脾淋巴细胞的增殖,并与ConA、LPS对T、B淋巴细胞的增殖有协同刺激作用,还可以通过IL-2和TNF-α发挥免疫增强作用。 展开更多

关键词 黑灵芝多糖 脾淋巴细胞 四甲基偶氮唑盐(mtt)法 酶联免疫吸附实验(ELISA) 白介素-2(IL-2) 肿瘤坏死因子-α(TNF-α)

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蜂毒素体外抑瘤作用的实验研究 被引量：36

8

作者 凌昌全 黄雪强 刘岭 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第7期612-614,共3页

目的 :研究蜂毒素对建系肿瘤细胞体外生长的抑制作用。 方法 :通过凝胶色谱法从蜜蜂毒中纯化得高纯度蜂毒素 ,分别选取 SMMC- 772 1、BEL - 740 2和 Hep- 3B三种肿瘤细胞系 ,以四甲基偶氮唑盐 (MTT)比色法观察蜂毒素对 3种肿瘤细胞系的... 目的 :研究蜂毒素对建系肿瘤细胞体外生长的抑制作用。 方法 :通过凝胶色谱法从蜜蜂毒中纯化得高纯度蜂毒素 ,分别选取 SMMC- 772 1、BEL - 740 2和 Hep- 3B三种肿瘤细胞系 ,以四甲基偶氮唑盐 (MTT)比色法观察蜂毒素对 3种肿瘤细胞系的生长抑制作用 ,以丝裂霉素、长春新碱、华蟾素为对照 ;并考察了蜂毒素对 SMMC- 772 1细胞系的生长抑制作用的时效关系。结果 :蜂毒素的抑瘤作用与剂量呈正相关 ,抑制率优于对照组药物 ,蜂毒素对 SMMC- 772 1细胞系各时间点的抑瘤率无显著性差异。 结论 :蜂毒素的体外抑瘤作用明显 ,而且作用发生迅速。 展开更多

关键词 蜂毒素 肿瘤 药物疗法 四甲基偶氮唑盐比色法 mtt

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几种瑶药的体外抗病毒活性初步研究 被引量：13

9

作者 江海燕 吴思超 +4 位作者 朱家杰 张美英 李药兰 许少玉 岑颖洲 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期500-504,共5页

对瑶药中蕨类植物药翠云草、半边旗、白毛蛇、海金沙草的提取物的体外抗病毒活性进行初步的筛选.采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT assay)和细胞病变抑制法(CPE reduction assay),对这4种植物药的水提物、醇提物及醇提物的各萃取部位进行... 对瑶药中蕨类植物药翠云草、半边旗、白毛蛇、海金沙草的提取物的体外抗病毒活性进行初步的筛选.采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT assay)和细胞病变抑制法(CPE reduction assay),对这4种植物药的水提物、醇提物及醇提物的各萃取部位进行体外抗单纯疱疹病毒(HSV-1)、柯萨奇B组3型病毒(Cox B3)的活性测定.结果:这4种植物药对HSV-1或Cox B3都有一定的体外抑制作用,其中翠云草醇提物的乙酸乙酯萃取部位具有较好的体外抗HSV-1和Cox B3活性,半数抑制质量浓度(IC50)分别为12.5和6.25μg/mL,选择性指数(SI)分别为8.3和20;半边旗醇提物的石油醚部位具有较好的体外抗HSV-1活性,IC50为6.25μg/mL,SI为61.通过对翠云草、半边旗、白毛蛇、海金沙草的抗病毒筛选,发现翠云草的乙酸乙酯部位和半边旗的石油醚部位具有较好的抗病毒活性. 展开更多

关键词 翠云草 半边旗 白毛蛇 海金沙草 单纯疱疹病毒 柯萨奇B组3型病毒 细胞病变抑制法 四甲基偶氮唑盐比色法

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生物可降解材料PHBV的细胞毒性评价的研究 被引量：11

10

作者 费强 尚龙安 +1 位作者 范代娣 王德伟 《安全与环境学报》 CAS CSCD 2005年第6期47-51,共5页

通过体外细胞毒性试验,对新型材料β-羟基丁酸与β-羟基戊酸共聚物(PHBV)的细胞生物相容性进行了研究。主要依据ISO10993及GB/T 16886—1997的标准,应用四甲基偶氮唑盐(MTT assay)比色法对PHBV的细胞毒性进行评价。选用不同体积分数、... 通过体外细胞毒性试验,对新型材料β-羟基丁酸与β-羟基戊酸共聚物(PHBV)的细胞生物相容性进行了研究。主要依据ISO10993及GB/T 16886—1997的标准,应用四甲基偶氮唑盐(MTT assay)比色法对PHBV的细胞毒性进行评价。选用不同体积分数、不同温度下的PHBV材料浸提液为培养液,以及与PHBV材料直接接触培养来检测1d、3 d、5 d小鼠成纤维细胞BHK-21的相对增值率,确定PHBV材料的毒性程度。实验结果表明,PHBV材料即使在高温下其物理化学性质也很稳定;它的细胞毒性程度为0级,有着良好的细胞生物相容性。 展开更多

关键词 生物化工 PHBV 生物降解材料 四甲基偶氮唑盐比色法 细胞相容性

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杨树芽提取物体外抗肿瘤活性的研究 被引量：7

11

作者 郑光耀 康宏兴 +2 位作者 薄采颖 宋强 周维纯 《林产化学与工业》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第6期38-42,共5页

采用四甲基偶氮唑盐比色(MTT)法观察杨树芽提取物对MCF-7、SMMC-7721和A549 3种肿瘤细胞的体外生长抑制作用,并与市售蜂胶和杨树胶的抗肿瘤活性进行对比。结果表明:杨树芽提取物对3种肿瘤细胞作用48 h的抑制率分别为97.1%、88.7%和60.5%... 采用四甲基偶氮唑盐比色(MTT)法观察杨树芽提取物对MCF-7、SMMC-7721和A549 3种肿瘤细胞的体外生长抑制作用,并与市售蜂胶和杨树胶的抗肿瘤活性进行对比。结果表明:杨树芽提取物对3种肿瘤细胞作用48 h的抑制率分别为97.1%、88.7%和60.5%,半数抑制质量浓度(IC50)分别为58.4、83.9和196.3 mg/L,均高于蜂胶和杨树胶。杨树芽提取物对体外培养的肿瘤细胞生长有明显的抑制作用,提示杨树芽提取物具有良好的抗肿瘤活性。 展开更多

关键词 杨树芽提取物 四甲基偶氮唑盐比色法 抗肿瘤活性

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人参皂苷Rg_1对培养猪骨髓基质细胞增殖的影响 被引量：4

12

作者 卢新政 张晓文 +2 位作者 黄峻 马根山 侯麦花 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期353-354,共2页

关键词 人参皂苷RG1 骨髓基质细胞 细胞增殖 集落形成 [^3H]TdR 四甲基偶氮唑盐法

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石斛散对体外培养人视网膜细胞的作用 被引量：5

13

作者 杨永升 庄曾渊 +1 位作者 王津津 徐艳玲 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2009年第6期405-408,共4页

目的观察中药方剂石斛散及单味药对人视网膜细胞的增生以及谷氨酸损伤的保护作用,探讨其在视网膜细胞损伤或变性类疾病方面的作用及机理,为临床治疗同类疾病提供依据。方法体外培养人视网膜细胞,通过四甲基偶氮唑盐实验观察石斛散复方... 目的观察中药方剂石斛散及单味药对人视网膜细胞的增生以及谷氨酸损伤的保护作用,探讨其在视网膜细胞损伤或变性类疾病方面的作用及机理,为临床治疗同类疾病提供依据。方法体外培养人视网膜细胞,通过四甲基偶氮唑盐实验观察石斛散复方以及各单味药对视网膜细胞增生的影响。另用Rhodamine123标记培养的视网膜细胞,通过激光共聚焦扫描显微镜动态观察和记录不同药物作用下细胞的线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)变化。结果体外培养人视网膜细胞贴壁、伸展以及生长良好。四甲基偶氮唑盐实验:石斛散组1.58g·L-1和0.50g·L-1以及石斛组5.00g·L-1对人视网膜细胞活性分别增加21.8%、14.2%和13.4%。MMP实验:石斛散轻度升高MMP,增加约13.5%,同时它可以抵抗谷氨酸损伤细胞后引起的MMP下降,由降低46.4%减少为16.2%。结论石斛散能够影响人视网膜细胞线粒体功能、促进细胞活性、抵抗谷氨酸对人视网膜细胞损伤作用。可作为临床治疗视网膜变性类疾病的一种选择。 展开更多

关键词 视网膜细胞 石斛散 线粒体膜电位 四甲基偶氮唑盐

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全反式维甲酸对宫颈癌细胞的生物学作用 被引量：3

14

作者 胡海燕 杨尚武 徐瑾 《海南医学院学报》 CAS 2008年第1期12-15,共4页

目的:探讨全反式维甲酸(all-trans-retinoic acid,ATRA)宫颈癌HeLa细胞增殖与分化的影响及其作用途径。方法:用MTT法检测ATRA作用下HeLa细胞增殖,电镜下观察细胞超微结构,集落形成实验观察集落形成能力,流式细胞术检测细胞周期,半定量RT... 目的:探讨全反式维甲酸(all-trans-retinoic acid,ATRA)宫颈癌HeLa细胞增殖与分化的影响及其作用途径。方法:用MTT法检测ATRA作用下HeLa细胞增殖,电镜下观察细胞超微结构,集落形成实验观察集落形成能力,流式细胞术检测细胞周期,半定量RT-PCR检测c-myc mRNA水平变化。结果:ATRA能抑制HeLa细胞增殖,诱导分化,降低c-myc mRNA的水平。结论:ATRA对宫颈癌HeLa细胞的生物学作用是多方面的。 展开更多

关键词 宫颈肿瘤 HELA细胞 细胞分化 维甲酸 流式细胞术 四甲基偶氮唑盐比色法

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离体肺组织切片的制备和孵育 被引量：1

15

作者 赵延华 王祥瑞 +3 位作者 郑拥军 苏殿三 薛庆生 陈红专 《上海第二医科大学学报》 CSCD 2004年第11期913-915,918,共4页

目的建立一种简便有效的离体肺组织切片孵育方法。方法利用肺组织精细切片技术制备肺组织切片 ,以 0 .5mLKrebs Henseleit(K H)缓冲液作为孵育液 ,在 37℃培养箱内分别孵育 1、2、3、4h ,测定肺片的四甲基偶氮唑盐 (MTT)比色、乳酸脱氢... 目的建立一种简便有效的离体肺组织切片孵育方法。方法利用肺组织精细切片技术制备肺组织切片 ,以 0 .5mLKrebs Henseleit(K H)缓冲液作为孵育液 ,在 37℃培养箱内分别孵育 1、2、3、4h ,测定肺片的四甲基偶氮唑盐 (MTT)比色、乳酸脱氢酶 (LDH)释放率和三磷酸腺苷 (ATP)含量 ,以反映肺组织活性。结果肺片在 37℃培养箱内孵育 1、2、3、4h后MTT比色、LDH释放率和ATP含量均无统计学差异 (P >0 .0 5 )。结论应用 0 .5mLKrebs Henseleit(K H)缓冲液作为孵育液、在 37℃培养箱对肺片进行孵育时组织活性没有明显变化 。 展开更多

关键词 离体肺组织切片 制备 9呼育 乳酸脱氢酶 四甲基偶氮唑盐

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维甲酸对宫颈癌细胞耐药株增殖及药物敏感性的影响 被引量：1

16

作者 胡海燕 徐瑾 杨尚武 《海南医学院学报》 CAS 2008年第2期119-121,共3页

目的:探讨全反式维甲酸(ATRA)对宫颈癌耐药株HeLa/MMC的增殖及药物敏感性的影响及其作用的分子机制。方法:观察ATRA作用下HeLa/MMC细胞的增殖,MTT法观察ATRA对HeLa/MMC药物敏感性的影响,半定量RT-PCR检测mdr1基因的表达情况。结果:①ATR... 目的:探讨全反式维甲酸(ATRA)对宫颈癌耐药株HeLa/MMC的增殖及药物敏感性的影响及其作用的分子机制。方法:观察ATRA作用下HeLa/MMC细胞的增殖,MTT法观察ATRA对HeLa/MMC药物敏感性的影响,半定量RT-PCR检测mdr1基因的表达情况。结果:①ATRA对HeLa/MMC细胞的增殖有抑制作用,这一作用为非细胞毒抑制作用。②ATRA能提高MMC对HeLa/MMC细胞的杀伤作用,并呈剂量依赖性。③半定量RT-PCR结果显示,ATRA上调了HeLa/MMC细胞mdr1基因的表达。结论:表明ATRA能抑制HeLa/MMC的增殖,提高HeLa/MMC对MMC的敏感性,但这种作用与mdr1基因表达无关。 展开更多

关键词 宫颈肿瘤 维甲酸 丝裂霉素 四甲基偶氮唑盐比色法 聚合酶链反应

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Earle's液与MEM培养基对神经元活性的影响 被引量：1

17

作者 韩明 董丽萍 袁芳 《中国康复理论与实践》 CSCD 2005年第2期125-126,共2页

目的 观察Earle's液、新配最小必需培养基(MEM)及原 MEM对神经元活性的影响。方法 神经元培养 10 d后,分别换为Earle's液、新配MEM及原MEM,12 h和 24 h后用乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒测定细胞的 LDH漏出量,四甲基偶氮唑盐(MTT)微量... 目的 观察Earle's液、新配最小必需培养基(MEM)及原 MEM对神经元活性的影响。方法 神经元培养 10 d后,分别换为Earle's液、新配MEM及原MEM,12 h和 24 h后用乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒测定细胞的 LDH漏出量,四甲基偶氮唑盐(MTT)微量酶反应比色法测定MTT代谢率。结果 神经元在不同培养介质中孵育 12 h和 24 h后,细胞 LDH的漏出量及 MTT代谢率有非常显著性差异( P <0.01)。结论 不同孵育液对神经元的活性有影响。 展开更多

关键词 神经元 Earlés液 最小必需培养基(MEM) 乳酸脱氢酶 四甲基偶氮唑盐(mtt)

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RASSF1A基因转染对人肺腺癌细胞株A549增殖的抑制作用 被引量：1

18

作者 邓征浩 周建华 +2 位作者 曹慧秋 沈明 文继舫 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期193-196,共4页

目的:观察外源性RASSF1A基因对人肺腺癌细胞A549增殖及NF κB亚单位P65表达的影响。方法:利用脂质体转染技术将真核表达重组体pcDNA3. 0 RASSF1A质粒和空载体pcDNA3. 0质粒分别导入A549细胞,经G418筛选后获得稳定转染细胞克隆,Westernbl... 目的:观察外源性RASSF1A基因对人肺腺癌细胞A549增殖及NF κB亚单位P65表达的影响。方法:利用脂质体转染技术将真核表达重组体pcDNA3. 0 RASSF1A质粒和空载体pcDNA3. 0质粒分别导入A549细胞,经G418筛选后获得稳定转染细胞克隆,Westernblotting检测RASSF1A基因表达。采用MTT(四甲基偶氮唑盐)法、流式细胞仪分析转染细胞的生物学行为。RT PCR和Westernblotting检测基因转染对P65表达的影响。结果:经脂质体转染和筛选,建立了稳定表达RASSF1A基因的A549细胞系。与未转染组和转染空白载体组比较,转染RASSF1A基因的细胞生长速度明显减慢(P<0. 05),细胞周期中G1 /G0期比例明显增加(P<0. 05),而S期比例减少;转染组细胞核内P65蛋白表达明显降低(P<0. 05),而全细胞P65蛋白及mRNA表达未见明显变化。结论:RASSF1A基因可能通过抑制P65活性而抑制人肺腺癌细胞A549的生长。 展开更多

关键词 基因转染 细胞株A549 RASSF1A基因 抑制作用 人肺腺癌 肺腺癌细胞A549 增殖 blotting Western pcDNA3 真核表达重组体 脂质体转染技术 四甲基偶氮唑盐 流式细胞仪分析 A549细胞系 RT-PCR mRNA表达 P65 生物学行为 B亚单位

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凋亡素融合蛋白的基因克隆、表达与体外活性分析

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作者 赵健 高鹏 +2 位作者 李素霞 袁勤生 刘建文 《华东理工大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期202-206,共5页

来源于HIV-1病毒（47-57位氨基酸）的TAT小肽具有跨膜功能,可以将外源蛋白进行跨膜转运。通过聚合酶链反应（PCR）的方法扩增了TAT-凋亡蛋白序列,与载体pET-28b连接后在大肠杆菌BL21（DE3）中获得了高表达,以包涵体形式表达的TAT-凋亡... 来源于HIV-1病毒（47-57位氨基酸）的TAT小肽具有跨膜功能,可以将外源蛋白进行跨膜转运。通过聚合酶链反应（PCR）的方法扩增了TAT-凋亡蛋白序列,与载体pET-28b连接后在大肠杆菌BL21（DE3）中获得了高表达,以包涵体形式表达的TAT-凋亡蛋白在变性条件下进行了Ni-NTA纯化,纯化的蛋白经MTT法证明具有诱导HeLa细胞凋亡的能力。 展开更多

关键词 TAT-凋亡蛋白 高表达 纯化 mtt(四甲基偶氧唑盐)

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拓扑替康胞内浓度降低——卵巢癌细胞耐药的一种新机制

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作者 贾平 吴少波 +4 位作者 李芳 奚玲 廖国宁 卢运萍 马丁 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期737-741,共5页

目的　探讨卵巢癌拓扑替康 (TPT)耐药细胞株中TPT胞内浓度的变化。方法　建立卵巢癌TPT耐药细胞株 ,四甲基偶氮唑蓝 (MTT)比色法检测该细胞株对多种化疗药物的耐药指数 ,流式细胞仪检测 2株细胞在不同条件下的TPT胞内浓度。结果　该细... 目的　探讨卵巢癌拓扑替康 (TPT)耐药细胞株中TPT胞内浓度的变化。方法　建立卵巢癌TPT耐药细胞株 ,四甲基偶氮唑蓝 (MTT)比色法检测该细胞株对多种化疗药物的耐药指数 ,流式细胞仪检测 2株细胞在不同条件下的TPT胞内浓度。结果　该细胞株对TPT及米托蒽醌 (MX)耐药。耐药细胞的TPT泵出速率明显快于亲本细胞的泵出速率 ,胞内TPT浓度约为亲本细胞的 1/ 6 (P <0 0 5 ) ;低温时 2株细胞的TPT泵出均受抑制 ;能量不足时 ,耐药细胞的TPT泵出减少 ,胞内浓度由 13 78增加到 2 0 13(P <0 0 5 )。结论　能量依赖性的拓扑替康胞内浓度降低是卵巢癌细胞耐药的一种机制。 展开更多

关键词 TPT 耐药细胞株 拓扑替康 卵巢癌细胞 四甲基偶氮唑蓝 流式细胞仪检测 米托蒽醌 mtt 低温 依赖性

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