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小鼠H1foo基因四环素诱导表达系统的构建与表达被引量：1: 1; 作者李建宁静 +2 位作者陈西锐宋成艳雷安民《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期757-762,共6页; 卵母细胞特异性连接组蛋白H1foo(Linker histone H1foo)是连接组蛋白H1(Histone 1)在卵母细胞中特异性表达的1个亚型,H1foo在卵母细胞减数分裂和成熟发育过程中起着不可替代的作用,而且H1foo也参与了重编程过程。为了在体细胞中进一步研... 展开更多; 关键词小鼠 H1foo基因四环素诱导表达系统; 在线阅读下载PDF 职称材料

四环素诱导的猪黑素皮质激素受体-4基因真核表达载体的构建被引量：3: 2; 作者解宇汪亮 +2 位作者张冬杰刘娣孙亚蒙《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第1期13-16,共4页; 猪黑素皮质激素受体-4(melanocortin-4receptor,MC4R)基因是影响猪生长肥育的主效基因之一,为了进一步研究MC4R基因的生物学功能,制备高成活率转基因猪,通过采用条件性诱导表达载体系统,PCR方法扩增了猪MC4R基因完整编码区,四环素诱导... 展开更多; 关键词猪 MC4R基因四环素诱导表达系统; 在线阅读下载PDF 职称材料

四环素诱导的YAP1敲减系统的建立及其对胃癌细胞功能的影响被引量：1: 3; 作者王贺刘俊 +5 位作者黄硕丁晓琛乔一桓姜勋亮闫静川李纪鹏《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期690-695,共6页; 目的建立一种四环素(tetracycline,DOX)诱导的基因敲减系统,并利用此系统研究YAP1对胃癌细胞功能的影响。方法构建pLKO.1-tetON-YAP1敲减的慢病毒载体,酶切和测序方法检测载体构建成功与否;慢病毒感染胃癌细胞系SGC-7901和MKN-28,建立DO... 展开更多; 关键词四环素诱导表达系统 SHRNA 胃癌 YAP1基因增殖迁移; 在线阅读下载PDF 职称材料

诱导型eIF3g人工microRNA表达载体的构建及应用被引量：4: 4; 作者褚丽莎韩娜 +1 位作者宋向阳曹江《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期135-138,共4页; 目的:构建可用四环素调控的针对人eIF3g的人工microRNA表达载体,用于抑制肿瘤细胞中eIF3g的表达。方法:利用网络资源设计针对人eIF3g的人工microRNA,以PCR方法克隆,经DNA测序验证后亚克隆至四环素调控表达系统的pRevTRE2载体上,得到pRev... 展开更多; 关键词 eIF3g MICRORNA 四环素诱导表达系统; 在线阅读下载PDF 职称材料

稳定整合pTet-on载体小鼠胚胎干细胞株的建立被引量：2: 5; 作者张梅英李华 +8 位作者董婉维杨葳秦英汪瑛周生来于洋王惟王太一王禄增《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2006年第3期161-166,F0011,共7页; 目的建立稳定整合Tet-on基因的ES-D3细胞系,用于人胰岛素基因(pTRE2-human-Ins)在ES-D3细胞中诱导表达调控的研究。方法通过电穿孔转染的方法,将pTet-on质粒导入ES-D3细胞中,利用G418的药物选择特性,对转染的ES-D3细胞进行压力筛选,用PC... 展开更多; 关键词四环素诱导表达系统电穿孔 ES-D3 细胞; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名小鼠H1foo基因四环素诱导表达系统的构建与表达被引量：1: 1; 作者李建宁静陈西锐宋成艳雷安民; 机构西北农林科技大学动物医学院陕西省干细胞工程技术研究中心陕西省农业分子生物学重点实验室; 出处《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期757-762,共6页; 基金国家自然科学基金项目(31172280); 文摘卵母细胞特异性连接组蛋白H1foo(Linker histone H1foo)是连接组蛋白H1(Histone 1)在卵母细胞中特异性表达的1个亚型,H1foo在卵母细胞减数分裂和成熟发育过程中起着不可替代的作用,而且H1foo也参与了重编程过程。为了在体细胞中进一步研究H1foo的功能,本试验通过采用四环素诱导表达载体系统,用PCR的方法扩增了小鼠的H1foo基因和四环素诱导表达系统(Tet-on)的启动子区。用双酶切和连接等方法将上述元件连接到真核表达载体pVenus上,构建了重组质粒pVenus-tet-CMV-H1foo。双酶切和测序结果显示,片段连接正确,且全长测序正确。本试验所构建的四环素诱导的小鼠H1foo真核表达系统有助于人们在体细胞中更好地探讨H1foo在特定时间的作用和功能。; 关键词小鼠 H1foo基因四环素诱导表达系统; Keywords mouse H1foo gene tetracycline-inducible expression system; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名四环素诱导的猪黑素皮质激素受体-4基因真核表达载体的构建被引量：3: 2; 作者解宇汪亮张冬杰刘娣孙亚蒙; 机构东北农业大学动物科学技术学院黑龙江省农业科学院畜牧所; 出处《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第1期13-16,共4页; 基金现代农业产业技术体系建设专项资金资助(CARS-36) 转基因生物新品种培育重大专项(2008ZX08006-003); 文摘猪黑素皮质激素受体-4(melanocortin-4receptor,MC4R)基因是影响猪生长肥育的主效基因之一,为了进一步研究MC4R基因的生物学功能,制备高成活率转基因猪,通过采用条件性诱导表达载体系统,PCR方法扩增了猪MC4R基因完整编码区,四环素诱导表达系统(Tet-on)的启动子调控区与转录调节元件。采用双酶切和连接等方法将上述元件连接到pcD-NA3.1(+)上,构建了重组质粒pcDNA3.1(+)-rtTA-PTight-MC4R。经双酶切和测序鉴定,结果显示片段正向连接且片段全长测序正确。试验成功构建了四环素诱导的pcDNA3.1(+)-rtTA-PTight-MC4R真核表达载体,并能在时间特异性方面调控MC4R基因的表达。; 关键词猪 MC4R基因四环素诱导表达系统; Keywords pig MC4R gene Tetracycline-inducible expression system; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名四环素诱导的YAP1敲减系统的建立及其对胃癌细胞功能的影响被引量：1: 3; 作者王贺刘俊黄硕丁晓琛乔一桓姜勋亮闫静川李纪鹏; 机构空军军医大学西京医院消化病院消化外科空军军医大学基础医学院空军军医大学生物化学与分子生物学教研室空军军医大学西京医院实验外科西安医学院临床医学院; 出处《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期690-695,共6页; 基金国家自然科学基金资助项目(No.81672751) 陕西省重点研发计划(No.2019SF-010)。; 文摘目的建立一种四环素(tetracycline,DOX)诱导的基因敲减系统,并利用此系统研究YAP1对胃癌细胞功能的影响。方法构建pLKO.1-tetON-YAP1敲减的慢病毒载体,酶切和测序方法检测载体构建成功与否;慢病毒感染胃癌细胞系SGC-7901和MKN-28,建立DOX诱导的YAP1敲减的胃癌细胞系;RT-PCR检测YAP1 mRNA相对表达量,Western blotting检测YAP1蛋白水平变化;平板克隆实验检测细胞增殖情况;划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移的情况。结果构建四环素诱导的YAP1敲减的病毒质粒,酶切鉴定结果显示,在6000 bp和3000 bp处各有一条带,测序结果与设计的shRNA序列一致。包装慢病毒并感染胃癌细胞系SGC-7901和MKN-28,DOX诱导组中,感染pLKO.1-tetON-YAP1的病毒的细胞中YAP1 mRNA的相对表达量和蛋白水平明显下调;而未诱导组则无明显变化。平板克隆形成实验结果显示,DOX诱导后shYAP1组克隆形成数明显降低;未诱导组无明显变化。划痕实验和Transwell迁移实验结果显示,DOX诱导后shYAP1组表达后细胞迁移能力受到抑制,未诱导组无明显变化。结论成功建立了四环素诱导的慢病毒系统,利用此系统敲减胃癌细胞YAP1基因,胃癌细胞增殖和迁移能力受到抑制。; 关键词四环素诱导表达系统 SHRNA 胃癌 YAP1基因增殖迁移; Keywords tetracycline-induced expression system small harp RNA gastric cancer YAP1 gene proliferation migration; 分类号 R34 [医药卫生—基础医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名诱导型eIF3g人工microRNA表达载体的构建及应用被引量：4: 4; 作者褚丽莎韩娜宋向阳曹江; 机构浙江大学附属邵逸夫医院普外科浙江大学邵逸夫临床医学研究所浙江省生物治疗重点实验室; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期135-138,共4页; 基金国家自然科学基金资助项目(30471955) 浙江省自然科学基金资助(R206060); 文摘目的:构建可用四环素调控的针对人eIF3g的人工microRNA表达载体,用于抑制肿瘤细胞中eIF3g的表达。方法:利用网络资源设计针对人eIF3g的人工microRNA,以PCR方法克隆,经DNA测序验证后亚克隆至四环素调控表达系统的pRevTRE2载体上,得到pRevTRE2-eIF3g-microRNA。将四环素调控表达系统的Tet-off质粒转染K562细胞获得稳定转染克隆后,再利用带有报告基因GFP的pRevTRE2-GFP转染选择调控能力较好的K562/Tet-off细胞株,将pRevTRE2-eIF3g-microRNA转染K562/Tet-off细胞,Westernblot检测eIF3g的表达,以研究eIF3g人工microRNA的作用效果。结果:DNA测序结果显示,针对人eIF3g的人工microRNA的克隆正确。pRevTRE2-GFP转染结果表明所选择的K562/Tet-off细胞株有较好的诱导功能。Westernblot结果显示,转染pRevTRE2-eIF3g-microRNA的K562/Tet-off细胞可用四环素调控eIF3g人工microRNA的表达从而抑制K562细胞中eIF3g的表达。结论:成功构建了可用四环素调控的eIF3g人工mi-croRNA表达载体,能有效调控K562细胞中eIF3g的表达。; 关键词 eIF3g MICRORNA 四环素诱导表达系统; Keywords eIF3g microRNA tetracycline-inducible expression system; 分类号 R733.7 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名稳定整合pTet-on载体小鼠胚胎干细胞株的建立被引量：2: 5; 作者张梅英李华董婉维杨葳秦英汪瑛周生来于洋王惟王太一王禄增; 机构中国医科大学实验动物部; 出处《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2006年第3期161-166,F0011,共7页; 基金国家自然科学基金资助项目(编号:30070353); 文摘目的建立稳定整合Tet-on基因的ES-D3细胞系,用于人胰岛素基因(pTRE2-human-Ins)在ES-D3细胞中诱导表达调控的研究。方法通过电穿孔转染的方法,将pTet-on质粒导入ES-D3细胞中,利用G418的药物选择特性,对转染的ES-D3细胞进行压力筛选,用PCR和Southern blot方法进行DNA整合鉴定,并用瞬时转染荧光素酶报告基因(pTRE-Luc)对筛选的Tet-on阳性克隆株的功能进行鉴定。结果经400μg/mL的G418压力筛选后,获得了11个细胞克隆株,特异性核苷酸引物检测细胞基因组DNA,有9个ES-D3细胞株可以扩增出相应的核苷酸片段,部分Tet-on阳性ES-D3株Southern blot鉴定结果表明Tet-on基因片段已整合入ES-D3细胞基因组DNA,荧光素酶报告基因功能鉴定获得1株诱导表达倍率为21.31的ES-D3细胞株,且Tet-on基因阳性ES-D3细胞的形态和生长速度与正常ES-D3细胞没有差异。结论通过电穿孔转染的方法成功地获得1株诱导表达倍率为21.31的高表达ES-D3细胞株,为进行目的基因(pTRE2-human-Ins)在ES-D3细胞中转染和诱导表达打下了基础。; 关键词四环素诱导表达系统电穿孔 ES-D3 细胞; Keywords Tetracycline inducing expression system Electroporation ES-D3 cell; 分类号 Q254 [生物学—细胞生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	小鼠H1foo基因四环素诱导表达系统的构建与表达	李建宁静陈西锐宋成艳雷安民	《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2014	1	在线阅读下载PDF 职称材料
2	四环素诱导的猪黑素皮质激素受体-4基因真核表达载体的构建	解宇汪亮张冬杰刘娣孙亚蒙	《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心	2013	3	在线阅读下载PDF 职称材料
3	四环素诱导的YAP1敲减系统的建立及其对胃癌细胞功能的影响	王贺刘俊黄硕丁晓琛乔一桓姜勋亮闫静川李纪鹏	《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心	2020	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	诱导型eIF3g人工microRNA表达载体的构建及应用	褚丽莎韩娜宋向阳曹江	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2011	4	在线阅读下载PDF 职称材料
5	稳定整合pTet-on载体小鼠胚胎干细胞株的建立	张梅英李华董婉维杨葳秦英汪瑛周生来于洋王惟王太一王禄增	《中国实验动物学报》 CAS CSCD	2006	2	在线阅读下载PDF 职称材料