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开放式拉长细管冷冻法对牛卵母细胞体外受精后发育的影响 被引量：13
1
作者 禹学礼 邓雯 +4 位作者 庞有志 王新庄 昝林森 李晓霞 冉林武 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期221-224,共4页
在常规牛体外受精(IVF)技术的基础上,分别采用开放式拉长细管 (OPS,open pulled straw)法和细管法对未经成熟培养的卵丘卵母细胞(COCs)进行玻璃化冷冻,解冻后再进行体外成熟(IVM)、IVF和早期胚胎的体外培养(IVC)。结果表明,细管组和 OP... 在常规牛体外受精(IVF)技术的基础上,分别采用开放式拉长细管 (OPS,open pulled straw)法和细管法对未经成熟培养的卵丘卵母细胞(COCs)进行玻璃化冷冻,解冻后再进行体外成熟(IVM)、IVF和早期胚胎的体外培养(IVC)。结果表明,细管组和 OPS组的解冻后 COCs正常率分别为 59.4%±4.3%和 77.9%±4.1%(P<0 01);成熟率分别为48.2%±5.3%和66.0%±5.8%(P<0 01);卵裂率分别为18.5%±2.0%和32.8%±1.4%(P<0 01);8 细胞阶段的成功率分别为14.8%±2.5%和 24.8%±1.5%(P<0 01);桑椹胚发育率分别为 0 和5 3%±1.1%,明显低于未经冷冻的鲜卵组(21.0%±3.8%;P<0 01);囊胚发育率分别为0和4.0%,明显低于鲜卵组(P<0 01)。说明OPS玻璃化冷冻法可以使未经成熟培养的牛 COCs冷冻后获得桑椹胚和囊胚,但桑囊胚发育率仍较低,方法有待改进。 展开更多
关键词 囊胚发育率 桑椹胚 成熟培养 牛卵母细胞 玻璃化冷冻法 解冻 体外受精 IVF OPS 正常
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牛孤雌生殖胚与体外受精胚体外发育比较 被引量：7
2
作者 张琇 李雪峰 +2 位作者 安志兴 郭继彤 张涌 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期612-614,共3页
从卵巢采集的卵丘-卵母细胞复合体(COCs)经体外成熟培养24h后,随机分为2组分别用于孤雌激活与体外受精。在相同培养条件下,比较孤雌生殖胚与体外受精胚的发育率和发育速度。结果表明:将牛孤雌生殖胚与体外受精胚分别置于mSOFaa和mBECMa... 从卵巢采集的卵丘-卵母细胞复合体(COCs)经体外成熟培养24h后,随机分为2组分别用于孤雌激活与体外受精。在相同培养条件下,比较孤雌生殖胚与体外受精胚的发育率和发育速度。结果表明:将牛孤雌生殖胚与体外受精胚分别置于mSOFaa和mBECMaa培养液中培养,卵裂率(89.3%vs.80.1%;83.2%vs.82.5%)、囊胚发育率(27.5%vs.24.0%;28.9%vs.21.9%)和孵化率(58.7%vs.56.7%;51.5%vs.53.3%),均无显著差异(P>0.05);孤雌生殖胚与体外受精胚在体外发育的速度基本相同。对孤雌生殖胚胎进行培养可以代替体外受精胚胎筛选最佳体外培养系统。 展开更多
关键词 孤雌生殖 体外受精胚胎 体外发育 囊胚发育率 发育速度 孵化率 孤雌激活 体外培养系统 复合体 卵巢
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不同成熟时间的猪卵母细胞对体外受精的影响及孤雌发育 被引量：5
3
作者 张菁 朱淑文 +1 位作者 华修国 李华威 《动物科学与动物医学》 2004年第4期40-42,共3页
采用NCSU-37为体外成熟、受精、培养体系,比较不同成熟时间46h、58h和70h的猪卵母细胞对体外受精的影响和孤雌发育。结果显示,猪卵母细胞在体外成熟培养46h、58h和70h后,46h培养组的卵母细胞体外受精后的卵裂率明显低于58h和70h培养组(P... 采用NCSU-37为体外成熟、受精、培养体系,比较不同成熟时间46h、58h和70h的猪卵母细胞对体外受精的影响和孤雌发育。结果显示,猪卵母细胞在体外成熟培养46h、58h和70h后,46h培养组的卵母细胞体外受精后的卵裂率明显低于58h和70h培养组(P<0.05),但囊胚发育率明显高于其他两组(P<0.05)。46h组的孤雌发育率明显高于其他两组(P<0.05),囊胚发育率三组之间无显著差异。表明猪卵母细胞体外成熟培养时间延长,体外受精后的囊胚发育率降低,孤雌发育率相应增加。 展开更多
关键词 体外成熟时间 猪 卵母细胞 体外受精 孤雌发育 囊胚发育率
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牛体外受精技术的研究——单层细胞预培养时间对牛早期胚胎体外培养效果的影响 被引量：3
4
作者 谭世俭 卢克焕 《广西畜牧兽医》 1993年第1期11-14,共4页
将2469枚经体外成熟、体外受精后获得的牛早期胚胎(2～8细胞阶段)随机放入7组不同日龄(分别预培养0～9天)的牛卵泡颗粒细胞单层细胞滴中进行“复合”培养,然后观察这些胚胎在体外培养条件下继续发育至囊胚和孵化囊胚阶段能力的差异。结... 将2469枚经体外成熟、体外受精后获得的牛早期胚胎(2～8细胞阶段)随机放入7组不同日龄(分别预培养0～9天)的牛卵泡颗粒细胞单层细胞滴中进行“复合”培养,然后观察这些胚胎在体外培养条件下继续发育至囊胚和孵化囊胚阶段能力的差异。结果随单层细胞预培养时间的延长(0～4天内),牛早期胚胎的囊胚发育率、发育速度及囊胚胎孵化率均呈逐渐升高的趋势;尔后,培养效果又稍有下降。经统计学检验,各组间囊胚发育率(31.7～39.2%)和囊胚孵化率(61.1～72.6%)及7日龄囊胚发育比率(41.8～58.5%)均无显著差异(P>0.05)。这表明,利用不同预培养时间(0～6天)的颗粒细胞单层与牛早期胚胎“复合”培养,都同样具有促进胚胎在体外条件下发育到囊胚和孵化囊胚阶段的能力,但以使用预培养2～4天单层细胞进行“复合”培养效果较佳。 展开更多
关键词 囊胚率 单层细胞 体外受精技术 预培养时间 胚胎冷冻 早期胚胎 体外培养条件 体外成熟 胚胎体外培养 颗粒细胞
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兔体外受精的研究 被引量：7
5
作者 蒋涛 高庆华 +2 位作者 何良军 陈强 刘芳 《中国草食动物》 2005年第6期3-7,共5页
为完善家兔体外生产胚胎技术,采用FSH+HCG法处理48只母兔,获得卵母细胞。采用获能的精子与卵母细胞进行体外受精,使用TCM199为基础液进行受精卵的体外培养。结果显示:平均每只供体兔可获得30.69枚可用卵母细胞。屠宰法获得的精子获能以... 为完善家兔体外生产胚胎技术,采用FSH+HCG法处理48只母兔,获得卵母细胞。采用获能的精子与卵母细胞进行体外受精,使用TCM199为基础液进行受精卵的体外培养。结果显示:平均每只供体兔可获得30.69枚可用卵母细胞。屠宰法获得的精子获能以后与卵母细胞进行体外受精,卵裂率达65.51%,囊胚发育率18.04%。自然射出法获得的精子获能以后,与卵母细胞进行体外受精,卵裂率达66.33%,囊胚发育率17.83%。屠宰法与自然射出法获得的精子获能以后卵裂率和囊胚发育率差异不显著。 展开更多
关键词 家兔 超数排卵 体外受精 体外培养 卵裂率 囊胚发育率
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精子不同处理方法对牛卵泡卵母细胞体外受精的影响 被引量：6
6
作者 丁向彬 王新庄 +3 位作者 田万强 李金辉 胡文举 王木 《黄牛杂志》 2005年第3期32-34,共3页
本研究探讨了不同精子处理方法对南阳黄牛卵泡卵母细胞体外受精效果的影响。试验一,研究三种不同的精子洗涤方法对卵母细胞体外受精的影响,结果表明:上浮法和Percoll密度梯度离心法所得的卵裂率(58.3%,60.6%)均显著高于直接离心洗涤法(4... 本研究探讨了不同精子处理方法对南阳黄牛卵泡卵母细胞体外受精效果的影响。试验一,研究三种不同的精子洗涤方法对卵母细胞体外受精的影响,结果表明:上浮法和Percoll密度梯度离心法所得的卵裂率(58.3%,60.6%)均显著高于直接离心洗涤法(47.2%,P<0.05);上浮法所得囊胚发育率(25.9%)显著高于直接离心法(13.3%,P<0.05);上浮法和Percoll法相比,卵裂率和囊胚率均无显著差异。试验二,研究三种受精液对卵母细胞体外受精的影响,结果表明:BO液组和mTyrode’s液组所得的卵裂率(60.1%,59.3%)均显著高于TCM199液组(48.5%,P<0.05);但三组囊胚率(17.8%、19.6%、14.1%)差异不显著(P>0.05)。 展开更多
关键词 卵泡卵母细胞 体外受精 处理方法 精子 PERCOLL 密度梯度离心法 囊胚发育率 卵裂率 上浮法 受精效果 南阳黄牛 洗涤方法 囊胚率 洗涤法 试验 精液
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影响羔羊超数排卵及体外受精的因素 被引量：2
7
作者 谷振慧 王志刚 +1 位作者 刘月琴 张英杰 《中国草食动物科学》 CAS 2014年第S1期74-76,共3页
幼畜胚胎体外生产技术,是集幼畜的超数排卵与采卵、卵母细胞的体外成熟、体外受精、胎体外培养和胚胎移植等技术为一体的生物高技术体系。在哺乳动物卵巢卵泡中存在着大量的卵母细胞,然而在自然状况下由于卵泡闭锁等原因这些卵母细胞并... 幼畜胚胎体外生产技术,是集幼畜的超数排卵与采卵、卵母细胞的体外成熟、体外受精、胎体外培养和胚胎移植等技术为一体的生物高技术体系。在哺乳动物卵巢卵泡中存在着大量的卵母细胞,然而在自然状况下由于卵泡闭锁等原因这些卵母细胞并不能得到充分的利用。运用超数排卵技术使卵泡发育很少发生闭锁,以获得较多、较高发育能力的卵母细胞。随着家畜体外受精技术研究的不断深入,利用幼畜超排卵母细胞进行体外受精的研究越来越受到人们的重视。多年来。 展开更多
关键词 体外受精 超数排卵 卵母细胞 采卵 发育能力 超排 体外成熟 卵丘细胞 卵巢卵泡 囊胚率
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哺乳动物胚胎玻璃化冷冻技术进展
8
作者 朱士恩 曾申明 张忠诚 《畜牧兽医科技信息》 1997年第19期2-4,共3页
1972年Whittingham等首先发明了胚胎的慢速冷冻保存法,这项技术一直被广泛应用。直到1985年Rall & Fahy又发明了胚胎的玻璃化冷冻保存技术,该技术的开发,简化了操作程序,大大缩短了操作时间,逐步代替了传统的慢速冷冻法。1986年Sche... 1972年Whittingham等首先发明了胚胎的慢速冷冻保存法,这项技术一直被广泛应用。直到1985年Rall & Fahy又发明了胚胎的玻璃化冷冻保存技术,该技术的开发,简化了操作程序,大大缩短了操作时间,逐步代替了传统的慢速冷冻法。1986年Scheffen等使用丙三醇和丙二醇各为25％,配制成的GP25玻璃化溶液,虽然化学毒性有所降低,但冷冻后胚胎,特别是囊胚的发育率仍不稳定。为此,Kasai等(1990)利用化学毒性较低的乙二醇为主体抗冻保护剂。 展开更多
关键词 冷冻保存 玻璃化溶液 哺乳动物胚胎 冷冻技术 体外发育率 抗冻保护剂 移植妊娠率 体外受精 胚胎细胞 产仔率
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雪龙黑牛试管胚胎产业化生产培养方法的建立 被引量：2
9
作者 许红喜 邢雪森 +3 位作者 王秀利 仇雪梅 刘雪江 吴蒙 《中国奶牛》 2012年第4期32-34,共3页
为充分利用雪龙兼松屠宰场废弃的优秀母牛卵巢,加速雪龙黑牛培育进程,满足高档牛肉市场需求,本文对胚胎生产体外受精3个关键技术环节进行了试验研究,共做了15批次试验,包括卵母细胞体外成熟培养的试验研究,卵母细胞体外受精试验研究以... 为充分利用雪龙兼松屠宰场废弃的优秀母牛卵巢,加速雪龙黑牛培育进程,满足高档牛肉市场需求,本文对胚胎生产体外受精3个关键技术环节进行了试验研究,共做了15批次试验,包括卵母细胞体外成熟培养的试验研究,卵母细胞体外受精试验研究以及受精卵体外培养试验研究。结果显示,卵母细胞的成熟率达98.6%,卵裂率为86.5%,囊胚发育率为36.8%。初步建立了一整套雪龙黑牛试管胚胎产业化生产培养方法和技术。 展开更多
关键词 卵母细胞卵丘细胞复合体 卵裂率 囊胚发育率:体外受精技术
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羊卵母细胞体外成熟影响因素
10
作者 任立坤 刘月琴 +2 位作者 张英杰 杨少华 王红娜 《中国草食动物科学》 CAS 2012年第S1期87-89,共3页
随着哺乳动物体外受精、转基因、核移植、外源基因的导入等生物工程技术研究的不断深入,卵母细胞的体外成熟技术与冷冻保存联系密切也日益受到重视。但迄今为止,与体内成熟卵母细胞相比,体外成熟卵母细胞质量差,胞质成熟鉴定困难,核、... 随着哺乳动物体外受精、转基因、核移植、外源基因的导入等生物工程技术研究的不断深入,卵母细胞的体外成熟技术与冷冻保存联系密切也日益受到重视。但迄今为止,与体内成熟卵母细胞相比,体外成熟卵母细胞质量差,胞质成熟鉴定困难,核、质成熟不同步等许多问题还未解决。这些都直接影响着卵母细胞体外成熟的质量,并制约着上述生物技术的发展。因此,完善哺乳动物卵母细胞体外成熟培养体系,提高卵母细胞体外成熟的质量,成为亟待解决的问题。 展开更多
关键词 卵母细胞 体外成熟 体外受精 核移植 冷冻保存 卵裂率 外源基因 囊胚发育率 羊卵 影响因素
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