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角质细胞生长因子对常染色体显性遗传型多囊肾病囊肿衬里上皮细胞的促增殖作用 被引量:9
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作者 刘沙勤 梅长林 +2 位作者 孙田美 盛茂 李林 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第8期871-873,共3页
目的 :观察角质细胞生长因子 (KGF)在体外对常染色体显性遗传型多囊肾病 (ADPKD)囊肿衬里上皮细胞的促增殖作用并探讨其可能的作用机制。方法 :外源性给予不同浓度的 KGF(0~ 10 0 ng/ ml) ,采用 MTT法检测细胞增殖情况 ,流式细胞术检... 目的 :观察角质细胞生长因子 (KGF)在体外对常染色体显性遗传型多囊肾病 (ADPKD)囊肿衬里上皮细胞的促增殖作用并探讨其可能的作用机制。方法 :外源性给予不同浓度的 KGF(0~ 10 0 ng/ ml) ,采用 MTT法检测细胞增殖情况 ,流式细胞术检测细胞周期 ,在电镜下观察细胞形态。结果 :KGF呈剂量、时间依赖性地促进了 ADPKD囊肿衬里上皮细胞的增生 ,表现为细胞数量增多 ,S期细胞比率增高 ,细胞分裂活跃 ,增生的细胞形态尤其是细胞核较正常体积增大。结论 :KGF可显著刺激 ADPKD囊肿衬里上皮细胞的增殖 ,提示 KGF可能参与 ADPKD肾囊肿的形成和发展。 展开更多
关键词 角质细胞生长因子 常染色体显性遗传型多囊肾病 囊肿衬里上皮细胞 细胞增殖
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塞来昔布通过阻断丝裂原活化蛋白激酶信号途径抑制多囊肾囊肿衬里上皮细胞增殖 被引量:4
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作者 许涛 曲巍 +3 位作者 梅长林 叶朝阳 王素霞 付莉莉 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期585-589,共5页
目的:探讨环氧合酶-2(COX-2)抑制剂塞来昔布(CXB)能否通过阻断丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号转导途径抑制多囊肾囊肿衬里上皮细胞增殖。方法:原代培养多囊肾囊肿衬里上皮细胞,以不同浓度CXB(0、2.5×10-6、5×10-6、1×10-5... 目的:探讨环氧合酶-2(COX-2)抑制剂塞来昔布(CXB)能否通过阻断丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号转导途径抑制多囊肾囊肿衬里上皮细胞增殖。方法:原代培养多囊肾囊肿衬里上皮细胞,以不同浓度CXB(0、2.5×10-6、5×10-6、1×10-5、2×10-5、3×10-5、4×10-5、5×10-5mol/L)处理细胞,采用BrdU法检测细胞增殖状态。ELISA法检测各组血管内皮生长因子(VEGF)的含量。荧光定量PCR技术检测增殖细胞核抗原(PCNA)、磷酸化MAPK的mRNA含量,Western印迹法检测PCNA、MAPK和磷酸化MAPK的表达。结果:CXB对囊肿衬里上皮细胞的增殖具有明显抑制作用,呈时间和剂量依赖性,其中2×10-5mol/L CXB作用24 h的抑制作用最强,抑制率为(63.9±1.2)%;CXB可减少囊肿衬里上皮细胞VEGF的分泌,而且抑制作用具有时间、浓度依赖性。CXB剂量依赖性减低PCNA和磷酸化MAPK的mRNA和蛋白表达。结论:CXB明显抑制囊肿衬里上皮细胞增殖,抑制细胞产生VEGF;其作用与干扰MAPK磷酸化,部分阻断MAPK信号转导通路有关。 展开更多
关键词 塞来昔布 丝裂原活化蛋白激酶 囊肿衬里上皮细胞 多囊肾 常染色体显性
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霉酚酸酯与雷帕霉素对多囊肾囊肿衬里上皮细胞增殖和凋亡影响的比较 被引量:3
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作者 张彤 付莉莉 梅长林 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期921-924,共4页
目的:观察霉酚酸酯(MMF)对多囊肾囊肿衬里上皮细胞增殖和凋亡的影响,并与雷帕霉素(RAPA)比较。方法:采用原代培养的人多囊肾囊肿衬里上皮细胞,用不同浓度MMF和RAPA分别作用48 h和72 h。MTT法检测细胞增殖情况;流式细胞术检测细胞周期变... 目的:观察霉酚酸酯(MMF)对多囊肾囊肿衬里上皮细胞增殖和凋亡的影响,并与雷帕霉素(RAPA)比较。方法:采用原代培养的人多囊肾囊肿衬里上皮细胞,用不同浓度MMF和RAPA分别作用48 h和72 h。MTT法检测细胞增殖情况;流式细胞术检测细胞周期变化;AnnexinⅤ-FITC流式细胞术测定细胞凋亡率;透射电镜观察细胞超微结构改变。结果:MMF和RAPA均能抑制囊肿衬里上皮细胞增殖,呈明显的量效和时效关系。作用48 h后MMF使细胞阻滞在S期,RAPA使细胞阻滞在G0/G1期。MMF和RAPA均可诱导细胞凋亡,最大凋亡率分别为(5.53±0.27)%和(4.36±0.10)%;电镜下可见典型的凋亡改变。结论:MMF与RAPA相比同样能明显抑制囊肿衬里上皮细胞增殖,诱导细胞凋亡,但其对细胞增殖的抑制作用较RAPA弱。 展开更多
关键词 霉酚酸酯 雷帕霉素 多囊肾 囊肿衬里上皮细胞 细胞增殖 细胞凋亡
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肝细胞生长因子对多囊肾病囊肿衬里上皮细胞增殖及细胞外基质合成的影响 被引量:2
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作者 原爱红 梅长林 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第7期642-644,共3页
目的 :研究重组人肝细胞生长因子 (rh HGF)对常染色体显性遗传型多囊肾病 (ADPKD)囊肿衬里上皮细胞增殖及细胞外基质合成的影响。方法 :用 3H- Td R掺入法测定不同浓度 (0 .5、1、2 .5、5 ng/m l) rh HGF作用 48h以及最适浓度的 rh HGF... 目的 :研究重组人肝细胞生长因子 (rh HGF)对常染色体显性遗传型多囊肾病 (ADPKD)囊肿衬里上皮细胞增殖及细胞外基质合成的影响。方法 :用 3H- Td R掺入法测定不同浓度 (0 .5、1、2 .5、5 ng/m l) rh HGF作用 48h以及最适浓度的 rh HGF分别作用 2 4、48、72 h ADPKD囊肿衬里上皮细胞系细胞的增殖情况 ;并分别用 3H -脯氨酸掺入法和放免法测定最适浓度rh HGF作用最佳时间后 ADPKD囊肿衬里上皮细胞系细胞胶原及层粘连蛋白的合成情况。 结果 :rh HGF促进了 ADPKD囊肿衬里上皮细胞增殖及胶原和层粘连蛋白的合成 ,以 1ng/m l持续作用 48h最为显著。结论 :rh HGF对体外培养的 ADPKD囊肿衬里上皮细胞增殖及细胞外基质合成有明显的促进作用。 展开更多
关键词 细胞生长因子 重组遗传 常染色体显性 囊肿衬里上皮细胞 细胞外基质 ADPKD
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山柰酚对多囊肾囊肿衬里上皮细胞增殖和凋亡的影响 被引量:1
5
作者 潘雪 赵建荣 段晓星 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期1648-1651,共4页
目的探讨山柰酚对多囊肾囊肿衬里上皮细胞增殖和凋亡的影响。方法培养多囊肾囊肿衬里上皮细胞,使用不同浓度山柰酚(5、10、20μmol/L)进行处理。采用MTT、克隆形成实验检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞周期、凋亡,蛋白免疫印迹(West... 目的探讨山柰酚对多囊肾囊肿衬里上皮细胞增殖和凋亡的影响。方法培养多囊肾囊肿衬里上皮细胞,使用不同浓度山柰酚(5、10、20μmol/L)进行处理。采用MTT、克隆形成实验检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞周期、凋亡,蛋白免疫印迹(Western blot)法检测细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)、增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、p-ERK1、p-p38 MAPK蛋白表达。结果与对照组比较,各浓度山柰酚组多囊肾囊肿衬里上皮细胞克隆细胞数、CDK2、PCNA、Bcl-2、p-ERK1、p-p38 MAPK蛋白表达降低(P<0.05),细胞增殖抑制率、凋亡率、Bax蛋白表达升高(P<0.05)。结论山柰酚可能通过抑制MAPK信号通路抑制多囊肾囊肿衬里上皮细胞增殖,并诱导细胞凋亡和细胞周期阻滞。 展开更多
关键词 山柰酚 多囊肾囊肿衬里上皮细胞 增殖 凋亡 MAPK
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4-羟苯基维甲酸诱导常染色体显性遗传性多囊肾病囊肿衬里上皮细胞凋亡 被引量:1
6
作者 原爱红 梅长林 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期38-43,共6页
目的 :探讨 4 -羟苯基维甲酸 (4- HPR)诱导常染色体显性遗传性多囊肾病 (ADPKD)囊肿衬里上皮细胞凋亡的作用及其机制。方法 :采用 MTT法检测 1、2 .5、5、10μmol/ L 4 - HPR分别作用 ADPKD囊肿衬里上皮细胞 2 4、4 8、72、96 h后细胞... 目的 :探讨 4 -羟苯基维甲酸 (4- HPR)诱导常染色体显性遗传性多囊肾病 (ADPKD)囊肿衬里上皮细胞凋亡的作用及其机制。方法 :采用 MTT法检测 1、2 .5、5、10μmol/ L 4 - HPR分别作用 ADPKD囊肿衬里上皮细胞 2 4、4 8、72、96 h后细胞的增殖情况 ;采用锥虫蓝染色、DNA电泳、Hoechst 33342染色检测 4 - HPR作用后的肝细胞生长因子 (HGF)刺激的 ADPKD囊肿衬里上皮细胞的存活率和凋亡率 ;采用免疫组化及半定量分析检测 4 - HPR对 HGF刺激的囊肿衬里上皮细胞表达 HGF和c- Myc蛋白的作用。结果 :与对照组比较 ,4 - HPR抑制了 ADPKD囊肿衬里上皮细胞增殖 ,且呈量效和时效关系 ,5 μmol/ L 或10 μmol/ L 4 - HPR作用 96 h后抑制效果最强 (P<0 .0 1)。 4 - HPR显著降低 HGF刺激的囊肿衬里上皮细胞的存活率 ,且诱导细胞凋亡 ,与对照组比较差异显著 (P<0 .0 1)。与 HGF组比较 ,4 - HPR显著降低 HGF刺激的囊肿衬里上皮细胞表达 HGF蛋白 (P<0 .0 1) ,但不影响表达 c- Myc蛋白。 结论 :4 - HPR诱导了 HGF刺激的 ADPKD囊肿衬里上皮细胞凋亡 ,其机制可能通过降低 HGF刺激的 ADPKD囊肿衬里上皮细胞表达 HGF蛋白 ,不是影响 c- 展开更多
关键词 维甲酸 多囊肾病 常染色体显性 囊肿衬里上皮细胞 凋亡
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雷公藤内酯醇对多囊肾囊肿衬里上皮细胞增殖和凋亡的影响 被引量:4
7
作者 杨焕荣 杨淑美 +4 位作者 王广鑫 孟凡杰 蔡淑芳 武文斌 王世军 《医药导报》 CAS 2016年第9期920-924,共5页
目的观察雷公藤内酯醇(TP)对多囊肾囊肿衬里上皮细胞增殖和凋亡的影响。方法采用原代培养的人多囊肾囊肿衬里上皮细胞,用不同浓度TP作用12,24,48和72 h。Brdu法检测细胞的增殖活性;流式细胞术检测细胞周期变化;FITC-Annexin V binding/P... 目的观察雷公藤内酯醇(TP)对多囊肾囊肿衬里上皮细胞增殖和凋亡的影响。方法采用原代培养的人多囊肾囊肿衬里上皮细胞,用不同浓度TP作用12,24,48和72 h。Brdu法检测细胞的增殖活性;流式细胞术检测细胞周期变化;FITC-Annexin V binding/PI染色检测细胞凋亡及凋亡率;透射电镜观察细胞超微结构变化。结果 TP能抑制囊肿衬里上皮细胞增殖、诱导细胞凋亡,呈明显的量效关系(10~40 ng·m L-1)和时效关系(12~48 h)。电镜下可见典型凋亡细胞的超微结构变化。结论 TP能明显抑制囊肿衬里上皮细胞增殖,诱导细胞凋亡,其机制可能是多靶点、多途径抑制细胞的增殖,诱导细胞的凋亡,从而抑制囊肿生成,延缓囊肿进展。 展开更多
关键词 雷公藤内酯醇 多囊肾病 上皮细胞 囊肿衬里 细胞增殖 细胞周期 细胞凋亡
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胰岛素样生长因子在常染色体显性遗传性多囊肾病发病中的作用
8
作者 吴玉梅 梅长林 +6 位作者 孙田美 张维莉 章建全 张玲 宋吉 戴兵 汤兵 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期623-625,共3页
目的研究胰岛素样生长因子1(insulin-likegrowthfactor-1,IGF-1)在常染色体显性遗传性多囊肾病(autosomal dominantpolycystickidneydisease,ADPKD)发病中的作用。方法:采用酶联免疫吸附法测定41例ADPKD患者血液、囊肿液 及尿液中IGF-1... 目的研究胰岛素样生长因子1(insulin-likegrowthfactor-1,IGF-1)在常染色体显性遗传性多囊肾病(autosomal dominantpolycystickidneydisease,ADPKD)发病中的作用。方法:采用酶联免疫吸附法测定41例ADPKD患者血液、囊肿液 及尿液中IGF-1浓度;应用免疫组织化学染色方法检测IGF-1及其受体(IGF-1R)在ADPKD囊肿组织中的表达。结果:41例 ADPKD患者囊肿液中的IGF-1浓度[(162.0±5.06)ng/ml]显著高于血液[(76.0±28.13)ng/ml]和尿液[(62.0±11.18) ng/ml]中浓度(P<0.01);IGF-1和IGF-1R在ADPKD囊肿组织中的囊肿衬里上皮细胞、平滑肌细胞及间质细胞均呈阳性表 达。结论:囊肿液中IGF-1的增多可能来自囊肿衬里上皮细胞及间质细胞的合成和分泌,并与囊肿的形成和长大有关。 展开更多
关键词 胰岛素样生长因子 常染色体 遗传性多囊肾病 囊肿衬里上皮细胞
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