基于TaqMan探针的蜜蜂囊状幼虫病病毒荧光PCR检测方法的建立和应用 被引量：13

1

作者 宋战昀 王振国 +5 位作者 冯新 刘金华 魏春艳 蔡阳 孟庆峰 周亮 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期920-925,共6页

为建立快速有效的蜜蜂囊状幼虫病检疫方法,依据TaqMan荧光标记探针技术原理,针对蜜蜂囊状幼虫病病毒保守序列,设计出一对特异性引物和一条探针,建立了一种快速检测蜜蜂囊状幼虫病病毒的荧光PCR方法。该方法对蜜蜂囊状幼虫病的检测具有... 为建立快速有效的蜜蜂囊状幼虫病检疫方法,依据TaqMan荧光标记探针技术原理,针对蜜蜂囊状幼虫病病毒保守序列,设计出一对特异性引物和一条探针,建立了一种快速检测蜜蜂囊状幼虫病病毒的荧光PCR方法。该方法对蜜蜂囊状幼虫病的检测具有较好的特异性,与蜜蜂急性麻痹病病毒、蜜蜂慢性麻痹病病毒、蜜蜂残翼病病毒和黑蜂王台病病毒之间均无交叉反应。检测灵敏度可达1.0×102拷贝/μL阳性质粒,可对低病毒含量的样品进行准确检测。重复性和稳定性试验结果显示,变异系数为1.6%,说明该方法具有较好的重复性和稳定性。应用该方法对蜜蜂及蜂制品进行检测,结果显示所建立的荧光PCR检测方法4h内即可报告检测结果,该方法具有快速、灵敏、特异及重复性好等优点,适用于蜜蜂及其制品中蜜蜂囊状幼虫病病毒的快速检疫。 展开更多

关键词 蜜蜂 囊状幼虫病病毒 TAQMAN探针 荧光PCR检测 检疫

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中蜂囊状幼虫病病毒(CSBV)核酸的结构研究(英文) 被引量：11

2

作者 张勤奋 杨艺峰 +2 位作者 梁玉尧 卢英 张景强 《电子显微学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期331-334,共4页

本文分别应用冷冻电镜与计算机三维重构技术和分子生物学技术对中蜂囊状幼虫病病毒 (CSBV)的核酸的三维结构和核酸一级结构进行测定和分析 。

关键词 中蜂囊状幼虫病病毒 核酸 一级结构 三维结构 CSBV 冷冻电镜 蜜蜂 计算机三维重构 分子生物学

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蜜蜂囊状幼虫病病毒的基因型分析 被引量：15

3

作者 曹兰 沈克飞 +6 位作者 张邑帆 罗文华 王瑞生 任勤 郭军 王志冬 戴荣国 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2012年第1期41-44,共4页

为了解蜜蜂囊状幼虫病病毒的遗传进化规律,依据SB14f/SB15r引物所扩增的RNA依赖的RNA聚合酶基因片段序列对该病毒进行基因型分析。结果表明,该病毒主要分为欧洲型、远东型和南非型3个基因型。欧洲基因型分为中欧和英国亚型,远东基因型... 为了解蜜蜂囊状幼虫病病毒的遗传进化规律,依据SB14f/SB15r引物所扩增的RNA依赖的RNA聚合酶基因片段序列对该病毒进行基因型分析。结果表明,该病毒主要分为欧洲型、远东型和南非型3个基因型。欧洲基因型分为中欧和英国亚型,远东基因型分为东方蜜蜂和西蜂亚型。提示蜜蜂囊状幼虫病病毒总体上按地域分型。 展开更多

关键词 囊状幼虫病病毒 RNA依赖的RNA聚合酶基因 基因型 蜜蜂

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中蜂囊状幼虫病病毒特异性半套式RT-PCR检测方法的建立及应用 被引量：14

4

作者 沈克飞 曹兰 +3 位作者 付利芝 任勤 姬聪慧 王介平 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2009年第12期39-42,共4页

基于中蜂囊状幼虫病病毒基因组序列AF469603中的RNA依赖的RNA聚合酶基因,建立该病毒的半套式RT-PCR检测方法。利用建立的方法检测有典型临床症状的病死中蜂幼虫,可扩增到特异的目的片段,序列分析得出,PCR扩增片段与AF469603同源性高于9... 基于中蜂囊状幼虫病病毒基因组序列AF469603中的RNA依赖的RNA聚合酶基因,建立该病毒的半套式RT-PCR检测方法。利用建立的方法检测有典型临床症状的病死中蜂幼虫,可扩增到特异的目的片段,序列分析得出,PCR扩增片段与AF469603同源性高于97%,与其他病原无同源性,表明该方法可用于临床诊断和流行病学研究。 展开更多

关键词 中蜂 囊状幼虫病病毒 半套式RT—PCR

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重庆中华蜜蜂囊状幼虫病病毒多聚蛋白基因分子特性分析 被引量：4

5

作者 沈克飞 曹兰 +3 位作者 郑华 杨柳 张邑帆 张素辉 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期959-965,共7页

【目的】分析地处中国南方的重庆地区中华蜜蜂Apis cerana cerana(简称"中蜂")囊状幼虫病病毒(sacbrood virus,SBV)(Ac SBV-S.Chn-CQ)的遗传特性。【方法】采用RT-PCR法对采自重庆23个区县的阳性中蜂幼虫进行SBV多聚蛋白基因... 【目的】分析地处中国南方的重庆地区中华蜜蜂Apis cerana cerana(简称"中蜂")囊状幼虫病病毒(sacbrood virus,SBV)(Ac SBV-S.Chn-CQ)的遗传特性。【方法】采用RT-PCR法对采自重庆23个区县的阳性中蜂幼虫进行SBV多聚蛋白基因扩增、序列测定和序列分析,采用邻接法(neighbor-joining method)基于基因组和基因组片段SB11-SB12构建系统进化树,使用RDP3检测SBV的基因重组。【结果】Ac SBV-S.Chn-CQ与中国南方中蜂SBV(Ac SBV-S.Chn)其他分离株、越南北部东方蜜蜂A.cerana SBV(Ac SBV-N.Vie)、越南北部西方蜜蜂A.mellifera SBV(Am SBV-N.Vie)、韩国东方蜜蜂SBV(Ac SBV-S.Kor)的同源性较高。Ac SBV-S.Chn-CQ在结构蛋白编码区域存在连续51个核苷酸缺失,在非结构蛋白编码区域有3个不连续的核苷酸缺失,与Ac SBV-N.Vie,Am SBV-N.Vie和Ac SBV-S.Kor核苷酸缺失相同。Ac SBV-S.Chn-CQ与Ac SBV-S.Chn-FZ,Ac SBV-N.Vie,Am SBV-N.Vie和Ac SBV-S.Kor在亚洲基因型中形成一亚型,亚型内检测到重组事件。【结论】推测Ac SBV-S.Chn-CQ与SBV-N.Vie和Ac SBVS.Kor可能来自一个共同祖先。 展开更多

关键词 中华蜜蜂 囊状幼虫病病毒 多聚蛋白基因 核苷酸缺失 系统进化

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用RT-PCR方法鉴定中蜂囊状幼虫病病毒 被引量：5

6

作者 曹兰 张邑帆 +4 位作者 戴荣国 任勤 王瑞生 罗文华 沈克飞 《中国蜂业》 2011年第Z3期33-35,共3页

为了鉴定病原,依据中蜂囊状幼虫病病毒广东株基因组序列AF469603选择3对引物,运用RT-PCR方法对中蜂病死幼虫进行中蜂囊状幼虫病病毒检测。结果表明,所有样本均检出囊状幼虫病病毒,CSB3F/CSB4R RT-PCR的检出率为90%(45/50),高于CSB1F/CSB... 为了鉴定病原,依据中蜂囊状幼虫病病毒广东株基因组序列AF469603选择3对引物,运用RT-PCR方法对中蜂病死幼虫进行中蜂囊状幼虫病病毒检测。结果表明,所有样本均检出囊状幼虫病病毒,CSB3F/CSB4R RT-PCR的检出率为90%(45/50),高于CSB1F/CSB2R RT-PCR(76%)和SB14R/SB15F RT-PCR(20%)的检出率,CSB3F/CSB4R更适合于中蜂囊状幼虫病病毒的检测。 展开更多

关键词 中蜂 囊状幼虫病病毒 RT-PCR

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云南中蜂蜂箱寄居节肢动物种类及中蜂囊状幼虫病病毒检测

7

作者 宋文菲 梁铖 +3 位作者 苗春辉 张学文 罗卫庭 杨爽 《浙江农业科学》 2017年第5期861-864,共4页

为了解中蜂蜂箱内寄居节肢动物种类及其感染中蜂囊状幼虫病病毒的情况,采集中蜂箱内的主要寄居节肢动物,并利用RT-PCR技术对这些节肢动物样品进行CSBV带毒情况检测。结果显示,云南省中蜂蜂箱内主要的寄居节肢动物有7种,都不同程度地感染... 为了解中蜂蜂箱内寄居节肢动物种类及其感染中蜂囊状幼虫病病毒的情况,采集中蜂箱内的主要寄居节肢动物,并利用RT-PCR技术对这些节肢动物样品进行CSBV带毒情况检测。结果显示,云南省中蜂蜂箱内主要的寄居节肢动物有7种,都不同程度地感染了CSBV,且平均感染率为68.57%。研究表明,中蜂蜂箱内节肢动物可成为CSBV的携带者,可将病毒传播给其他蜂群。 展开更多

关键词 中蜂 中蜂囊状幼虫病病毒 蜂箱 寄居节肢动物 间接传播

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囊状幼虫病病毒侵染对中华蜜蜂营养和免疫反应的影响 被引量：7

8

作者 郑彬悦 赵必安 +3 位作者 金鑫 段辛乐 黄少康 李江红 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期1054-1064,共11页

【目的】囊状幼虫病病毒(sacbrood virus, SBV)是严重危害中华蜜蜂Apis cerana cerana蜂群健康和种群数量的病原微生物,但其对蜜蜂的致死机制不明。本研究旨在探究SBV对不同发育阶段中华蜜蜂营养代谢和免疫的影响。【方法】分别给中华蜜... 【目的】囊状幼虫病病毒(sacbrood virus, SBV)是严重危害中华蜜蜂Apis cerana cerana蜂群健康和种群数量的病原微生物,但其对蜜蜂的致死机制不明。本研究旨在探究SBV对不同发育阶段中华蜜蜂营养代谢和免疫的影响。【方法】分别给中华蜜蜂2日龄幼虫和新羽化成虫饲喂SBV,逐日统计死亡蜜蜂数量,检测病毒对蜜蜂存活的影响;利用qPCR检测中华蜜蜂4日龄幼虫、预蛹以及10和20日龄成虫体内SBV RNA、营养代谢基因(ilp1,ilp2,hex110,hex70b,hex70c和vg)、先天性病毒免疫基因(rel,toll,apidaecin,abaecin,defensin,hymenoptaecin,jra,key和state92e)、细胞凋亡基因(atg7和LOC100577876)和抗RNA病毒基因(dis3和dicer)的表达水平。【结果】SBV感染显著降低了中华蜜蜂幼虫的存活率,但对成虫的生存影响不明显。SBV RNA在中华蜜蜂4日龄幼虫和预蛹体内的表达量显著高于其在10和20日龄成虫体内的表达量。SBV显著降低了中华蜜蜂幼虫营养代谢基因ilp1,ilp2,hex110,hex70b和hex70c以及成虫营养代谢基因vg和hex110的表达量,但显著提高了4日龄幼虫rel,toll,apidaecin,abaecin,defensin,hymenoptaecin和jra以及成虫key和state92e等先天性病毒免疫基因的表达量,还引起预蛹体内的细胞凋亡基因atg7和LOC100577876的表达量显著增加。【结论】SBV在中华蜜蜂幼虫和预蛹体内的感染水平远高于在成虫体内的,其对幼虫的危害也大于对成虫。SBV显著影响了中华蜜蜂正常的营养代谢,染毒中华蜜蜂能够提高自身的免疫水平来应对;预蛹期中华蜜蜂幼虫细胞凋亡水平的显著增加可能与化蛹异常及死亡有关。 展开更多

关键词 中华蜜蜂 囊状幼虫病病毒 营养 免疫 寿命

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中华蜜蜂囊状幼虫病的诊断和防治研究进展 被引量：1

9

作者 李爱芳 王倩芳 +3 位作者 王孜龙 李亚兰 徐朋 冯书营 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第2期864-873,共10页

中华蜜蜂囊状幼虫病(Chinese sacbrood disease, CSBD)是由中华蜜蜂囊状幼虫病病毒(Chinese sacbrood virus, CSBV)引起的一种病毒性疾病。该病对蜂群危害严重,传染性强,死亡率高达100%,给中国养蜂业造成了巨大的经济损失。尽管实际生... 中华蜜蜂囊状幼虫病(Chinese sacbrood disease, CSBD)是由中华蜜蜂囊状幼虫病病毒(Chinese sacbrood virus, CSBV)引起的一种病毒性疾病。该病对蜂群危害严重,传染性强,死亡率高达100%,给中国养蜂业造成了巨大的经济损失。尽管实际生产中采用了多种方法和措施对该病进行预防和治疗,但实际效果欠佳。针对CSBV的检测技术发展迅速,尤其是分子生物学检测手段的更新,使得检测结果的准确性和特异性大大提高。鉴于卵黄抗体(egg yolk antibodies, EYA)在多种病毒性疾病中的应用效果显著,对于CSBD的防治有着潜在的应用开发价值。笔者综述了CSBD诊断和防治的最新研究进展,总结了EYA抗体药物的治疗应用现状。此外,在剖析EYA药物优缺点的基础上,提出了多种EYA协同增效的策略,并从多个方面如新型抗体药物的开发、新型中药单体/配方的鉴定、核苷酸药物的开发等对抗CSBV的研究前景进行望,以期为蜂业病毒性疾病的防控提供参考。 展开更多

关键词 中华蜜蜂囊状幼虫病病毒(CSBV) 诊断 防治 卵黄抗体(EYA)

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利用RNA干扰技术治疗中蜂囊状幼虫病新方法取得进展

10

作者 夏晓翠 张冯斌 +4 位作者 杨勤宏 方冲伟 冯栋 魏太云 周冰峰 《中国蜂业》 2014年第10期26-26,共1页

中蜂囊状幼虫病自1972年在我国广东省发生后，迅速蔓延至全国的中华蜜蜂主产区，成为饲养的中华蜜蜂毁灭性病害。虽然经40多年人工选育和自然进化，中蜂囊状幼虫病已不再具有毁灭性，但仍是中华蜜蜂饲养最主要的病害。中蜂囊状幼虫病的... 中蜂囊状幼虫病自1972年在我国广东省发生后，迅速蔓延至全国的中华蜜蜂主产区，成为饲养的中华蜜蜂毁灭性病害。虽然经40多年人工选育和自然进化，中蜂囊状幼虫病已不再具有毁灭性，但仍是中华蜜蜂饲养最主要的病害。中蜂囊状幼虫病的病原是中蜂囊状幼虫病病毒（Chinese sacbrood virus，CSBV），其感染1—3日龄幼虫，幼虫体内聚集大量的液体和病毒粒体，使其巢房不能封盖，病虫呈尖头状，体颜色由珍珠白色逐渐变为浅黄色。感病幼虫死亡之后，虫体会逐渐变得干枯，形成一个暗褐色如龙船状的鳞片。中蜂囊状幼虫病尚无有效的治疗药物，采用的预防措施主要有选育抗病蜂种，加强蜂群管理等。 展开更多

关键词 中蜂囊状幼虫病病毒 治疗药物 RNA干扰技术 毁灭性病害 利用 中华蜜蜂 人工选育 蜜蜂饲养

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我对中蜂囊状幼虫病的认识

11

作者 杨荣良 《中国蜂业》 2012年第11期20-21,共2页

一、简述 中蜂囊状幼虫病，简称“中囊病”，由中蜂囊状幼虫病病毒引起，病毒首先侵入幼虫呼吸道使幼虫窒息死亡，患中蜂囊状幼虫病的蜂群，蜂王产卵下降，老龄蜂不断提前死亡，新蜂出房少，幼虫大量死亡，群势很快下降，严重时蜂群开... 一、简述 中蜂囊状幼虫病，简称“中囊病”，由中蜂囊状幼虫病病毒引起，病毒首先侵入幼虫呼吸道使幼虫窒息死亡，患中蜂囊状幼虫病的蜂群，蜂王产卵下降，老龄蜂不断提前死亡，新蜂出房少，幼虫大量死亡，群势很快下降，严重时蜂群开始逃亡，特别是饲养几十群以上的、上百群以上的中蜂场会出现大逃亡。 展开更多

关键词 中蜂囊状幼虫病病毒 窒息死亡 蜂王产卵 大量死亡 中囊病 呼吸道 蜂群 群势

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抗菌肽对蜜蜂细菌性病原的抑菌作用研究 被引量：1

12

作者 沈克飞 翟少欽 +2 位作者 曹兰 杨柳 张邑帆 《中国蜂业》 2013年第Z3期32-35,共4页

从囊状幼虫病致死的中蜂幼虫虫体中分离中蜂囊状幼虫病病毒(Chinese sacbrood virus,CSBV),将其接种9日龄鸡胚尿囊腔并盲传5代,采集尿囊液,运用RT-PCR法和免疫印迹法鉴定尿囊液中的CSBV。结果显示胚体肝脏有出血点,但胚体发育正常;在尿... 从囊状幼虫病致死的中蜂幼虫虫体中分离中蜂囊状幼虫病病毒(Chinese sacbrood virus,CSBV),将其接种9日龄鸡胚尿囊腔并盲传5代,采集尿囊液,运用RT-PCR法和免疫印迹法鉴定尿囊液中的CSBV。结果显示胚体肝脏有出血点,但胚体发育正常;在尿囊液中检测出CSBV,表明CSBV可以在鸡胚中增殖。这为CSBV提供了简便的体外培养方法。 展开更多

关键词 中蜂囊状幼虫病病毒 鸡胚 培养 鉴定

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梯度条带PCR快速检测CSBV方法的建立 被引量：7

13

作者 刘新宇 于欢 +2 位作者 高宝国 张彦明 王敦 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2012年第4期6-9,共4页

通过与传统RT-PCR检测方法比较,建立了一种新的快速、准确鉴定中华蜜蜂囊状幼虫病病毒(CSBV)的方法,为中华蜜蜂囊状幼虫病的诊断与防治提供了重要的手段。对陕南、陕北、关中三地的健康蜂及CSBV感染蜂分别进行传统RT-PCR和梯度条带PCR... 通过与传统RT-PCR检测方法比较,建立了一种新的快速、准确鉴定中华蜜蜂囊状幼虫病病毒(CSBV)的方法,为中华蜜蜂囊状幼虫病的诊断与防治提供了重要的手段。对陕南、陕北、关中三地的健康蜂及CSBV感染蜂分别进行传统RT-PCR和梯度条带PCR两种方法的检测,通过琼脂糖凝胶电泳及测序结果对两种方法进行分析比较。结果发现传统RT-PCR和梯度条带PCR方法对陕西三地的感染病毒蜂鉴定结果一致,而梯度条带PCR方法相对更快速和直观。与传统RT-PCR鉴定方法比较,该新方法能够在电泳检测阶段通过DNA片段的梯度次序即确定是否存在病毒,能够省去PCR产物测序步骤,缩短了对该病毒的鉴定周期,对及时发现和鉴定病蜂、采取预防措施提供了重要的技术手段。因此,梯度条带PCR快速鉴定方法不仅为CSBV的检测提供了一种简单、快速、直观的方法,对类似动物病毒的快速鉴定也提供了很好的借鉴。 展开更多

关键词 中华蜜蜂囊状幼虫病病毒 快速检测 梯度条带PCR法

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科技

14

《中国畜牧业》 2022年第15期13-13,共1页

菘蓝及其有效成分抑制中蜂囊状幼虫病病毒感染蜜蜂的机制被揭示近日,中国农业科学院蜜蜂研究所中华蜜蜂利用与生态团队和美国农业部蜜蜂研究实验室合作,研究揭示菘蓝及其有效成分抑制中蜂囊状幼虫病病毒感染蜜蜂的机制。研究发现菘蓝提... 菘蓝及其有效成分抑制中蜂囊状幼虫病病毒感染蜜蜂的机制被揭示近日,中国农业科学院蜜蜂研究所中华蜜蜂利用与生态团队和美国农业部蜜蜂研究实验室合作,研究揭示菘蓝及其有效成分抑制中蜂囊状幼虫病病毒感染蜜蜂的机制。研究发现菘蓝提取物可以显著抑制中蜂囊状幼虫病病毒(Chinese Sacbrood Virus,CSBV)的复制,减轻CSBV对幼虫生长发育的影响,降低CSBV感染中蜂的幼虫死亡率. 展开更多

关键词 中国农业科学院 蜜蜂研究所 中华蜜蜂 幼虫生长发育 中蜂囊状幼虫病病毒 幼虫死亡率 美国农业部 菘蓝

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