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基于细菌酯酶活性的叠氮噻唑橙分子设计与特性验证
1
作者
余以刚
黄韵
+2 位作者
李晓凤
肖性龙
吴晖
《华南理工大学学报（自然科学版）》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2013年第10期53-59,共7页
为了建立一种新型、高效的活菌检测技术,以细菌酯酶代谢活性为判断依据,设计合成了一种新型噻唑橙荧光染料——TOMA,其结构经核磁共振谱、高分辨质谱确证.对TOMA的细胞膜穿透性、酯酶敏感性及对DNA的PCR扩增的抑制作用3方面特性进行了...
为了建立一种新型、高效的活菌检测技术,以细菌酯酶代谢活性为判断依据,设计合成了一种新型噻唑橙荧光染料——TOMA,其结构经核磁共振谱、高分辨质谱确证.对TOMA的细胞膜穿透性、酯酶敏感性及对DNA的PCR扩增的抑制作用3方面特性进行了初步验证.结果显示:10 mg/L的TOMA于室温、黑暗条件下与活的大肠杆菌(Escherichia coli)O157:H7混合孵育10 min后菌体发出强烈荧光,表明该分子能有效穿透细菌壁膜,并与核酸有良好的结合能力;用固定化脂肪酶对TOMA进行体外水解,水解率达83%,说明该分子的酯键能在相关酶作用下断裂;TOMA与实时荧光定量PCR联用时,该分子对细菌DNA扩增具有明显的抑制作用.以上结果证明TOMA分子设计基本达到预期目的.
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关键词
细菌
酯酶
代谢活性
噻唑橙荧光染料
PCR
DNA扩增
荧光
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职称材料
题名
基于细菌酯酶活性的叠氮噻唑橙分子设计与特性验证
1
作者
余以刚
黄韵
李晓凤
肖性龙
吴晖
机构
华南理工大学轻工与食品学院
出处
《华南理工大学学报（自然科学版）》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2013年第10期53-59,共7页
基金
国家自然科学基金青年基金资助项目(31101279)
国家自然科学基金资助项目(31271867)
+1 种基金
教育部高等学校博士学科点专项科研基金新教师类资助课题(20110172120034)
华南理工大学中央高校基本科研业务费专项资金重点资助项目(2013ZZ0068)
文摘
为了建立一种新型、高效的活菌检测技术,以细菌酯酶代谢活性为判断依据,设计合成了一种新型噻唑橙荧光染料——TOMA,其结构经核磁共振谱、高分辨质谱确证.对TOMA的细胞膜穿透性、酯酶敏感性及对DNA的PCR扩增的抑制作用3方面特性进行了初步验证.结果显示:10 mg/L的TOMA于室温、黑暗条件下与活的大肠杆菌(Escherichia coli)O157:H7混合孵育10 min后菌体发出强烈荧光,表明该分子能有效穿透细菌壁膜,并与核酸有良好的结合能力;用固定化脂肪酶对TOMA进行体外水解,水解率达83%,说明该分子的酯键能在相关酶作用下断裂;TOMA与实时荧光定量PCR联用时,该分子对细菌DNA扩增具有明显的抑制作用.以上结果证明TOMA分子设计基本达到预期目的.
关键词
细菌
酯酶
代谢活性
噻唑橙荧光染料
PCR
DNA扩增
荧光
Keywords
bacteria
esterase
metabolic activity
novel thiazole orange fluorescent dye
PCR
DNA amplification
fluorescence
分类号
TQ619 [化学工程—精细化工]
Q933.1 [生物学—微生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
基于细菌酯酶活性的叠氮噻唑橙分子设计与特性验证
余以刚
黄韵
李晓凤
肖性龙
吴晖
《华南理工大学学报（自然科学版）》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2013
0
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