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T4噬菌体表面展示技术的研究及应用
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作者 蒋成砚 张以芳 +1 位作者 任兆均 郑锦铃 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2005年第11期1011-1013,共3页
关键词 噬菌体表面展示技术 T4 细菌病毒 遗传结构 形态结构 类病毒 基因组 混合物 蛋白质
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酶联免疫吸附技术和噬菌体表面展示技术在食品检测中的应用
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作者 陆春 俞晓平 +1 位作者 王红 黄光荣 《食品与机械》 CSCD 北大核心 2009年第5期125-128,共4页
介绍食品中可能存在的一些有害小分子物质,综述酶联免疫吸附技术和噬菌体表面展示技术在检测食品有害小分子物质中的应用,展望这两种技术目前存在的不足与今后发展的方向。
关键词 酶联免疫吸附技术 噬菌体表面展示技术 有害小分子物质
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人源性抗血小板膜糖蛋白IIb/IIIa Fab噬菌体抗体库的构建 被引量:2
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作者 崔宇杰 董宁征 +2 位作者 庞爱明 白霞 阮长耿 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期200-201,204,共3页
目的:构建人源性Fab噬菌体抗体库,为进一步从抗体库中筛选人源性抗GPIIb/IIIaFab抗体奠定基础。方法:利用RT-PCR和噬菌体表面展示技术,直接从血小板膜糖蛋白抗体(抗-GPIIb/IIIa)阳性的特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者脾细胞中提取总RNA... 目的:构建人源性Fab噬菌体抗体库,为进一步从抗体库中筛选人源性抗GPIIb/IIIaFab抗体奠定基础。方法:利用RT-PCR和噬菌体表面展示技术,直接从血小板膜糖蛋白抗体(抗-GPIIb/IIIa)阳性的特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者脾细胞中提取总RNA,逆转录合成cDNA,扩增抗体轻链和重链Fd基因。经SacI/XbaI和XhoI/SpeI双酶切,依次将PCR产物插入噬粒载体pComb3H相应位点,电转化大肠杆菌XL1-blue,以辅助噬菌体VCSM13进行超感染,构建成人源性Fab噬菌体抗体库。结果:成功地构建库容量达6.2×106的抗血小板膜糖蛋白GPIIb/IIIaFab噬菌体抗体库。结论:构建了人源性Fab抗体库,并达到建库标准,可进一步从中筛选人源性Fab抗体。 展开更多
关键词 FAB抗体 噬菌体表面展示技术 PCR 血小板膜糖蛋白 IIB/IIIA
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鸭坦布苏病毒E蛋白抗原表位的鉴定及其表位交叉反应性分析 被引量:6
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作者 李晨曦 华荣虹 张云 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期60-65,共6页
为鉴定鸭坦布苏病毒(DTMUV)E蛋白的抗原表位,本研究以纯化的抗DTMUV E蛋白单克隆抗体(MAb)3B6为固相筛选分子,对噬菌体随机12肽库进行淘选,通过对阳性噬菌体克隆测序分析,确定DTMUV E蛋白的模拟表位氨基酸序列,将模拟表位序列与GST蛋白... 为鉴定鸭坦布苏病毒(DTMUV)E蛋白的抗原表位,本研究以纯化的抗DTMUV E蛋白单克隆抗体(MAb)3B6为固相筛选分子,对噬菌体随机12肽库进行淘选,通过对阳性噬菌体克隆测序分析,确定DTMUV E蛋白的模拟表位氨基酸序列,将模拟表位序列与GST蛋白融合表达并进行western blot验证。利用DNAStar对表位序列进行同源性分析,并通过dot blotting方法分析抗原表位在黄病毒阳性血清间的交叉反应性。结果鉴定了DTMUV E蛋白的一个线性抗原表位EVEPPFG,并且该表位在DTMUV与其它黄病毒中均具有高度的保守性。Dot blotting结果显示抗原表位EVEPPFG在黄病毒阳性血清间具有交叉反应性。因此,EVEPPFG为黄病毒共享型的抗原表位,这对于黄病毒E蛋白的抗原结构功能的研究以及研制表位疫苗和诊断抗原等具有重要意义。 展开更多
关键词 鸭坦布苏病毒 噬菌体表面展示技术 E蛋白 抗原表位 黄病毒
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日本乙型脑炎病毒E抗原表位的筛选 被引量:3
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作者 马丽敏 李琳 +6 位作者 胡乐鹏 何晔 李叶 任秀梅 靳朝 夏志平 王本旭 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期60-63,共4页
为筛选日本乙型脑炎病毒(JEV)的E抗原表位,本实验以抗JEV E蛋白的单克隆抗体(MAb)作为固相筛选分子,应用噬菌体表面展示技术,按消减、结合、洗脱、扩增的顺序筛选噬菌体七肽库,挑取噬菌体单克隆培养并采用MAb包被的ELISA鉴定,对阳性克... 为筛选日本乙型脑炎病毒(JEV)的E抗原表位,本实验以抗JEV E蛋白的单克隆抗体(MAb)作为固相筛选分子,应用噬菌体表面展示技术,按消减、结合、洗脱、扩增的顺序筛选噬菌体七肽库,挑取噬菌体单克隆培养并采用MAb包被的ELISA鉴定,对阳性克隆测序分析,确定JEV E抗原模拟表位的氨基酸序列。设计合成包含该表位的E抗原15肽(E-365GGADSMSMAGMAVSYE-379)cDNA序列,与pGEX-KG构建重组表达质粒,诱导表达重组多肽并进行western blot验证。经过4轮筛选后,噬菌体得到高度富集,挑取单克隆采用MAb包被进行ELISA鉴定,有22个克隆呈阳性。对重组多肽进行western blot验证,结果表明该重组多肽能够特异结合兔抗JEV多克隆抗体。本实验成功筛选出JEV结构蛋白E的特异性噬菌体模拟表位,为开展用JEV抗原表位探索JEV的防制研究创造了条件,为多肽疫苗研制、药物筛选以及特异血清学诊断方法的建立提供重要依据。 展开更多
关键词 日本乙型脑炎病毒 噬菌体表面展示技术 E蛋白 表位肽
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基因工程抗体研究进展 被引量:1
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作者 熊术道 温博贵 李冠武 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期23-26,共4页
基因工程抗体技术的发展十分迅速 ,其应用也极其广泛。本文将介绍核糖体展示。
关键词 基因工程抗体 核糖体展示技术 噬菌体表面展示技术
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抗人CD20纳米抗体的筛选、表达及特性分析
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作者 李艳宁 李光琪 +4 位作者 王红霞 蒋丹 楚元奎 张爱君 徐广贤 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期67-72,共6页
目的筛选出抗人CD20纳米抗体序列,并获得具有高亲和力与特异性的抗CD20-人IgG Fc纳米抗体。方法利用天然噬菌体纳米抗体库,以生物素化的CD20抗原为靶标进行4轮液相亲和筛选,采用ELISA鉴定阳性克隆;将筛选到的阳性克隆基因序列与人IgG F... 目的筛选出抗人CD20纳米抗体序列,并获得具有高亲和力与特异性的抗CD20-人IgG Fc纳米抗体。方法利用天然噬菌体纳米抗体库,以生物素化的CD20抗原为靶标进行4轮液相亲和筛选,采用ELISA鉴定阳性克隆;将筛选到的阳性克隆基因序列与人IgG Fc片段偶联,构建到原核表达载体pCZN1中,并转化至大肠杆菌Arctic Express,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)低温诱导重组蛋白的表达,利用Ni柱进行亲和纯化;ELISA和Western blot法鉴定纯化产物。结果筛选得到了一条重复性高且亲水性好的CD20纳米抗体序列,纯化获得了纯度高达85%以上的抗CD20-人IgG Fc纳米抗体。ELISA结果显示其与CD20抗原具有较高亲和力, Western blot结果表明该抗体能特异性识别CD20抗原。结论利用天然噬菌体纳米抗体库成功获得了抗CD20纳米抗体序列,经纯化的抗CD20-人IgG Fc纳米抗体具有高亲和力与特异性。 展开更多
关键词 纳米抗体 CD20 噬菌体表面展示技术 原核表达
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