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题名噬菌体随机肽库淘选桔霉素模拟表位的研究
被引量：10
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作者
黄思敏
许杨
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机构
南昌大学中德联合研究院
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出处
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2006年第12期67-70,共4页
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基金
教育部长江学者和创新团队发展计划资助(IRT0540)
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文摘
目的:从噬菌体随机肽库中淘选模拟桔霉素表位的噬菌体粒子。方法:以抗桔霉素的单克隆抗体为配基,分别免疫亲和淘选以融合蛋白形式表达在丝状噬菌体M13外壳蛋白Ⅲ上的随机7肽库和12肽库,以ELISA方法鉴定阳性克隆,同时进行DNA测序以分析插入的7肽和12肽的氨基酸序列。结果:经过3轮淘选,在7肽库中淘选到20株能与该抗体特异性结合的阳性克隆,在12肽库中淘选到33株能与该抗体特异性结合的阳性克隆,且该结合均能被桔霉素阻断,模拟表位的共有序列为X-组氨酸-赖氨酸-X-X-X-X,X为任意氨基酸。以7肽库中亲和力最强的克隆(P10)建立了竞争ELISA检测方法,线性范围为10～325ng/ml,检测下限为10ng/ml;以12肽库中亲和力最强的克隆(P1)建立了竞争ELISA检测方法,线性范围为10～439ng/ml,检测下限为10ng/ml。结论:噬菌体展示技术可成功淘选到桔霉素模拟表位,高度保守的His和Lys的存在,提示His和Lys在CIT与其配体的结合中可能起重要作用。
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关键词
噬菌体示肽库
模拟表位
桔霉素
单克隆抗体
免疫分析
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Keywords
phage display peptide library
mimotope： citrinin
monoclonal antibody
immunoassay
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分类号
R446.61
[医药卫生—诊断学]
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