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题名嗜热栖热菌重组锰超氧化物歧化酶的性质
被引量:2
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作者
李鹤宾
席守民
杨五彪
叶子坚
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机构
厦门医学高等专科学校
河南科技大学医学院
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出处
《台湾海峡》
CAS
CSCD
2012年第1期53-57,共5页
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基金
厦门市科技计划资助项目(3502Z20093041)
河南科技大学青年科学基金资助项目(2010QN0023)
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文摘
嗜热栖热菌(Thermus thermophilus)wl的超氧化物歧化酶基因在Escherichia coli BL21(DE3)中进行表达,采用Ni-NTA agarose亲和层析获得重组超氧化物歧化酶,比活力达565 U/mg.重组酶的相对分子质量为110.9 kDa,亚基相对分子质量为28.3 kDa,该酶为同聚四聚体蛋白.重组酶对氯仿-乙醇和SDS敏感,对H2O2不敏感,并且它的紫外最大吸收波长位于279 nm,判断其属于锰超氧化物歧化酶类型.1.0 mmol/dm3Mn2+对重组酶有激活作用,同浓度的其他金属离子Mg2+、Ca2+、Ba2+、Co2+、Cu2+、Zn2+和Fe2+对重组酶活力都有抑制作用,其中以Co2+的作用最强,抑制了约64%的酶活性.重组酶在70℃下处理1 h,保持原有活力的60%,即使在90℃下处理1 h,仍保持原有活力的35%.在pH值为4.0~11.0的缓冲液中25℃下处理1 h,保持65%以上的原始活力.由此可见,重组锰超氧化物歧化酶具有高的热稳定性和宽pH稳定性,在工业上具有巨大的应用潜力.
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关键词
海洋生物学
锰超氧化物歧化酶
热稳定
嗜热栖热菌wl
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Keywords
marine biology
manganesesuperoxide dismutase
thermostability
Thermus thermophilus wl
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分类号
P735
[天文地球—海洋生物学]
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