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α2,8-唾液酸转移酶Ⅵ过量表达影响小鼠乳腺癌细胞基因表达的研究
被引量:
1
1
作者
时瀚
顾玉超
+1 位作者
徐良
于文功
《中国海洋大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第1期47-53,共7页
研究α2,8-唾液酸转移酶Ⅵ(Sixth type ofα2,8-sialyltransferase,ST8Sia Ⅵ)对乳腺癌细胞生物学功能的影响及其作用的分子机制。采用全基因组芯片技术检测ST8Sia Ⅵ过表达前后小鼠乳腺癌细胞4T1基因表达谱的差异;利用PathwayExplorer...
研究α2,8-唾液酸转移酶Ⅵ(Sixth type ofα2,8-sialyltransferase,ST8Sia Ⅵ)对乳腺癌细胞生物学功能的影响及其作用的分子机制。采用全基因组芯片技术检测ST8Sia Ⅵ过表达前后小鼠乳腺癌细胞4T1基因表达谱的差异;利用PathwayExplorer分析ST8Sia Ⅵ过表达前后对基因网络的影响。实验结果表明:ST8Sia Ⅵ过表达引起201个基因表达有差异,其中22个基因与肿瘤细胞的黏附、生长、运动、免疫和周期有关。另外,PathwayExplorer分析结果显示,差异表达基因涉及的最显著变化的基因网络是"依赖β-arrestin的G蛋白偶联受体(GPCR)信号通路";进一步的实验结果证明该通路下游Raf蛋白的磷酸化水平在ST8Sia Ⅵ过表达细胞显著升高。上述结果为ST8Sia Ⅵ生物学功能的深入研究提供了前提。
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关键词
唾液酸修饰
ST8Sia
Ⅵ
基因表达
Raf激酶
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职称材料
日本脑炎病毒NS1蛋白致脑血管内皮细胞损伤研究
被引量:
3
2
作者
潘俊慧
刘亚林
+3 位作者
梁真洁
杨兴淼
谢盛达
曹瑞兵
《南京农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第6期1107-1115,共9页
[目的]本试验旨在探究日本脑炎病毒(Japanese encephalitis virus, JEV)非结构蛋白NS1的生物学功能。[方法]将JEV NS1基因克隆到pFastbac1载体并将其转化至感受态DH10Bac得到重组杆粒,将重组杆粒转染sf9细胞产生重组杆状病毒,通过病毒感...
[目的]本试验旨在探究日本脑炎病毒(Japanese encephalitis virus, JEV)非结构蛋白NS1的生物学功能。[方法]将JEV NS1基因克隆到pFastbac1载体并将其转化至感受态DH10Bac得到重组杆粒,将重组杆粒转染sf9细胞产生重组杆状病毒,通过病毒感染High5细胞成功表达了JEV NS1。在人脑微血管内皮细胞(HBMEC)培养液添加外源NS1蛋白,通过光学显微镜观察细胞形态,利用共聚焦显微镜观察JEV NS1蛋白对HBMEC表面唾液酸修饰的影响,IFA检测细胞中组织蛋白酶L的表达;小鼠经尾静脉注射JEV NS1及其N207糖基化位点突变体蛋白NS1 N207Q,分别于24、48和72 h通过伊文思蓝(EB)染色检测2个蛋白对小鼠的血脑屏障(BBB)通透性的影响。[结果]JEV NS1蛋白通过下调人脑内皮细胞表面的唾液酸修饰和上调组织蛋白酶L表达损伤内皮糖萼;动物试验表明NS1蛋白能够破坏小鼠的血脑屏障;NS1 N207Q蛋白处理对细胞表面唾液酸修饰的影响不显著,体内处理对小鼠的血脑屏障无明显损伤。[结论]JEV NS1蛋白具有损伤人脑微血管内皮细胞的生物学功能,突变N207位点可导致其损伤功能减弱,可为JEV亚单位疫苗候选抗原的优化提供新思路。
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关键词
日本脑炎病毒
NS1蛋白
唾液酸修饰
组织蛋白酶L
脑血管内皮损伤
N207Q突变
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职称材料
题名
α2,8-唾液酸转移酶Ⅵ过量表达影响小鼠乳腺癌细胞基因表达的研究
被引量:
1
1
作者
时瀚
顾玉超
徐良
于文功
机构
中国海洋大学医药学院分子生物学实验室
出处
《中国海洋大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第1期47-53,共7页
基金
国家重点基础研究发展规划项目(2003CB716402)资助
文摘
研究α2,8-唾液酸转移酶Ⅵ(Sixth type ofα2,8-sialyltransferase,ST8Sia Ⅵ)对乳腺癌细胞生物学功能的影响及其作用的分子机制。采用全基因组芯片技术检测ST8Sia Ⅵ过表达前后小鼠乳腺癌细胞4T1基因表达谱的差异;利用PathwayExplorer分析ST8Sia Ⅵ过表达前后对基因网络的影响。实验结果表明:ST8Sia Ⅵ过表达引起201个基因表达有差异,其中22个基因与肿瘤细胞的黏附、生长、运动、免疫和周期有关。另外,PathwayExplorer分析结果显示,差异表达基因涉及的最显著变化的基因网络是"依赖β-arrestin的G蛋白偶联受体(GPCR)信号通路";进一步的实验结果证明该通路下游Raf蛋白的磷酸化水平在ST8Sia Ⅵ过表达细胞显著升高。上述结果为ST8Sia Ⅵ生物学功能的深入研究提供了前提。
关键词
唾液酸修饰
ST8Sia
Ⅵ
基因表达
Raf激酶
Keywords
sialylated modification
STSSia VI
gene expression
Raf
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
日本脑炎病毒NS1蛋白致脑血管内皮细胞损伤研究
被引量:
3
2
作者
潘俊慧
刘亚林
梁真洁
杨兴淼
谢盛达
曹瑞兵
机构
南京农业大学动物医学院
出处
《南京农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第6期1107-1115,共9页
基金
国家重点研发计划项目(2016YFD0500402)
国家自然科学基金项目(31772756)。
文摘
[目的]本试验旨在探究日本脑炎病毒(Japanese encephalitis virus, JEV)非结构蛋白NS1的生物学功能。[方法]将JEV NS1基因克隆到pFastbac1载体并将其转化至感受态DH10Bac得到重组杆粒,将重组杆粒转染sf9细胞产生重组杆状病毒,通过病毒感染High5细胞成功表达了JEV NS1。在人脑微血管内皮细胞(HBMEC)培养液添加外源NS1蛋白,通过光学显微镜观察细胞形态,利用共聚焦显微镜观察JEV NS1蛋白对HBMEC表面唾液酸修饰的影响,IFA检测细胞中组织蛋白酶L的表达;小鼠经尾静脉注射JEV NS1及其N207糖基化位点突变体蛋白NS1 N207Q,分别于24、48和72 h通过伊文思蓝(EB)染色检测2个蛋白对小鼠的血脑屏障(BBB)通透性的影响。[结果]JEV NS1蛋白通过下调人脑内皮细胞表面的唾液酸修饰和上调组织蛋白酶L表达损伤内皮糖萼;动物试验表明NS1蛋白能够破坏小鼠的血脑屏障;NS1 N207Q蛋白处理对细胞表面唾液酸修饰的影响不显著,体内处理对小鼠的血脑屏障无明显损伤。[结论]JEV NS1蛋白具有损伤人脑微血管内皮细胞的生物学功能,突变N207位点可导致其损伤功能减弱,可为JEV亚单位疫苗候选抗原的优化提供新思路。
关键词
日本脑炎病毒
NS1蛋白
唾液酸修饰
组织蛋白酶L
脑血管内皮损伤
N207Q突变
Keywords
Japanese encephalitis virus
NS1 protein
sialic acid modification
cathepsin L
endothelial injury
N207Q mutation
分类号
S855.3 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
α2,8-唾液酸转移酶Ⅵ过量表达影响小鼠乳腺癌细胞基因表达的研究
时瀚
顾玉超
徐良
于文功
《中国海洋大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2010
1
在线阅读
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职称材料
2
日本脑炎病毒NS1蛋白致脑血管内皮细胞损伤研究
潘俊慧
刘亚林
梁真洁
杨兴淼
谢盛达
曹瑞兵
《南京农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023
3
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