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利用抑制性消减杂交技术筛选大鼠哮喘相关基因
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作者 钟波 王慧莲 +5 位作者 Muhammad Shahzad 宁启兰 韩燕 杨旭东 张富军 吕社民 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期362-369,共8页
目的:利用哮喘大鼠模型筛选与哮喘发病相关的差异性表达基因。方法:采用抑制性消减杂交技术,以哮喘大鼠肺组织总RNA为检验子,对照大鼠肺组织总RNA为驱赶子,将消减杂交获得的DNA片断与pGEM-T Easy Vector连接,构建cDNA文库后,转化大肠杆... 目的:利用哮喘大鼠模型筛选与哮喘发病相关的差异性表达基因。方法:采用抑制性消减杂交技术,以哮喘大鼠肺组织总RNA为检验子,对照大鼠肺组织总RNA为驱赶子,将消减杂交获得的DNA片断与pGEM-T Easy Vector连接,构建cDNA文库后,转化大肠杆菌DH5α,筛选阳性克隆。将获得的阳性克隆插入片段进行测序分析,测序结果与GenBank数据库中cDNA和EST序列进行相似性比对,获得差异性表达基因的信息。结果:扩增消减cDNA文库获得300余个白色克隆,随即挑选36个测序,除去重复序列,结果中含有已知的基因4个,ESTs 2个及与任何序列无同源性的新基因片段3个。结论:成功构建了哮喘大鼠肺脏差异性表达基因的正向消减cDNA文库,筛选出数个与哮喘相关的差异表达基因。 展开更多
关键词 哮喘/免疫学 哮喘/病理生理 抑制性消减杂交 差异性表达基因 CDNA文库
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CTLA4-Ig对支气管哮喘患者外周血IL-13的影响
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作者 彭丽萍 华树成 迟宝荣 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期100-103,共4页
目的 :通过对支气管哮喘患者外周血 T细胞表达 IL- 13的情况及 CTL A4 - Ig对其影响的研究 ,进一步明确支气管哮喘的免疫发病机制并为治疗支气管哮喘寻求一条安全有效的途径。方法 :用 EL ISA和逆转录 PCR方法测定支气管哮喘患者外周血... 目的 :通过对支气管哮喘患者外周血 T细胞表达 IL- 13的情况及 CTL A4 - Ig对其影响的研究 ,进一步明确支气管哮喘的免疫发病机制并为治疗支气管哮喘寻求一条安全有效的途径。方法 :用 EL ISA和逆转录 PCR方法测定支气管哮喘患者外周血在 CTL A4 - Ig作用前后 T细胞表达 IL- 13的情况。结果 :EL ISA法测得哮喘患者IL- 13明显高于正常对照组 (P<0 .0 1) ,CTL A4 - Ig明显抑制了 IL- 13的分泌 (P<0 .0 1)。正常对照组 PHA刺激条件下用逆转录 PCR方法测不出 IL- 13的表达 ;哮喘组在 PHA作用下 ,T细胞表达 IL- 13的量增加 (P<0 .0 1) ;同在 PHA刺激情况下 ,CTL A4 - Ig使 IL- 13表达明显下降 (P<0 .0 1)。结论 :IL- 13在支气管哮喘发病中起重要作用 ,CTL A4 - Ig对 T细胞产生 IL- 13起抑制作用 ,对哮喘的治疗具有临床意义。 展开更多
关键词 哮喘/病因 哮喘/免疫学 细胞毒性T淋巴细胞相关性抗原4 T淋巴细胞 细胞毒性 白细胞介素13/血液
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隐孔菌多糖成分对致敏大鼠气道高反应性和炎症细胞的影响 被引量:9
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作者 汤慧芳 陈季强 +2 位作者 谢强敏 赵晓燕 柯传奎 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2003年第4期287-291,共5页
目的 :研究隐孔菌多糖成分对大鼠气道高反应性的影响 ,初步探索其作用机制。方法 :采用卵白蛋白致敏雾化吸入攻击制备大鼠哮喘模型 ,隐孔菌多糖成分 A、B(5 mg/ kg、2 0 mg/ kg)和酮替芬 (5 mg/ kg)及溶媒对照(等量生理盐水 )灌胃 10 d... 目的 :研究隐孔菌多糖成分对大鼠气道高反应性的影响 ,初步探索其作用机制。方法 :采用卵白蛋白致敏雾化吸入攻击制备大鼠哮喘模型 ,隐孔菌多糖成分 A、B(5 mg/ kg、2 0 mg/ kg)和酮替芬 (5 mg/ kg)及溶媒对照(等量生理盐水 )灌胃 10 d。用甲酰胆碱激发气道高反应性后 ,行支气管肺泡灌洗和腹腔灌洗 ,计数支气管肺泡灌洗液中细胞总数并分类 ,和腹腔灌洗液中脱颗粒肥大细胞及白细胞分类。结果 :隐孔菌多糖成分 A、B均能明显抑制致敏大鼠抗原攻击后气道阻力的增加及肺顺应性的下降 ;减少支气管肺泡灌洗液中白细胞总数 ,降低嗜酸细胞的数目 ,以多糖 B作用更明显 ;多糖 A和多糖 B也明显抑制腹腔肥大细胞脱颗粒及腹腔嗜酸性粒细胞的渗出。结论 :隐孔菌多糖 A、B成分抑制大鼠的气道高反应性 ,其作用可能与稳定肥大细胞膜、抑制嗜酸细胞炎症和趋化有关。 展开更多
关键词 多孔菌科 哮喘/免疫学 多糖类 支气管高反应性/免疫 嗜酸细胞 肥大细胞 隐孔菌 大鼠
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