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转基因大豆、玉米、油菜和水稻品系特异性检测质粒标准分子的快速构建及应用被引量：11: 1; 作者吴永彬肖维威 +5 位作者张宝蔡翠霞康文杰周琳华刘唐书马文丽《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期775-782,共8页; 本文采用重叠延伸PCR技术快速构建了转基因大豆GTS40-3-2、玉米NK603、油菜RT73和水稻TT51-1的4种品系作物的质粒标准分子.经快速PCR鉴定及测序分析验证后,将构建的阳性质粒标准分子应用于实时荧光定量PCR标准曲线的构建,并建立其相应... 展开更多; 关键词转基因重叠延伸PCR 质粒标准分子品系特异性检测实时荧光定量PCR; 在线阅读下载PDF 职称材料

适于转基因油菜RT73品系特异性检测的标准分子构建及其适用性鉴定被引量：3: 2; 作者李俊毅李想 +5 位作者褚庆华吕蓉张舒亚潘良文黄新朱水芳《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期76-83,共8页; 针对目前转基因产品检测标准物质缺乏的难题,构建适于转基因油菜RT73品系特异性检测的标准分子pEASY-RT73,其包含转基因油菜RT73品系3'端侧翼序列,油菜内标准基因HMG和PEP片段。对其在定性和定量检测中的适用性进行了实验室内部验证... 展开更多; 关键词 PCR RT73 标准分子品系特异性检测实时荧光PCR; 在线阅读下载PDF 职称材料

转基因玉米59122品系的特异性检测被引量：8: 3; 作者许文涛杨蓉 +4 位作者陆姣张南罗云波何景黄昆仑《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第4期139-142,共4页; 使用反向聚合酶链式反应(PCR)技术克隆了转基因玉米59122的外源基因与玉米基因组之间的两段侧翼序列,并据其左侧侧翼序列设计了具品系特异性的引物,运用半巢式PCR技术建立了59122的品系特异性二重PCR检测方法,扩增片段100bp,横跨pat终... 展开更多; 关键词转基因作物品系特异性检测半巢式聚合酶链式反应反向聚合酶链式反应二重聚合酶链式反应; 在线阅读下载PDF 职称材料

利用多重PCR技术快速检测五个转基因大豆品系被引量：17: 4; 作者董立明李葱葱 +4 位作者邢珍娟邵改革夏蔚闫伟李飞武《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期1002-1007,共6页; 转基因大豆305423、MON89788、CV127、GTS40-3-2、356043作为商品化应用最为广泛的大豆品系,种植面积占世界转基因大豆总种植面积的80%以上。根据大豆内标准基因Lectin和5种转基因大豆品系的边界序列设计特异性引物。通过验证引物的适... 展开更多; 关键词转基因大豆多重PCR 品系特异性检测; 在线阅读下载PDF 职称材料

转基因大豆MON89788实时荧光PCR检测方法的建立被引量：8: 5; 作者刘欣张国丛 +2 位作者周兴虎祝长青黄明《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第4期193-197,共5页; 为实现转基因大豆MON89788的标识管理,针对转基因大豆MON89788的品系特异性序列设计引物和Taq Man探针,建立转基因大豆MON89788实时荧光聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测方法,并对该方法的特异性、灵敏度和重复性进... 展开更多; 关键词转基因大豆 MON89788品系实时荧光PCR 品系特异性检测转基因标识; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名转基因大豆、玉米、油菜和水稻品系特异性检测质粒标准分子的快速构建及应用被引量：11: 1; 作者吴永彬肖维威张宝蔡翠霞康文杰周琳华刘唐书马文丽; 机构南方医科大学基因工程研究所广东省产品质量监督检验研究院; 出处《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期775-782,共8页; 基金国家公益性行业科研专项(No.200910265) 广东省科技计划项目(No.2008B080701027)~~; 文摘本文采用重叠延伸PCR技术快速构建了转基因大豆GTS40-3-2、玉米NK603、油菜RT73和水稻TT51-1的4种品系作物的质粒标准分子.经快速PCR鉴定及测序分析验证后,将构建的阳性质粒标准分子应用于实时荧光定量PCR标准曲线的构建,并建立其相应的荧光定量PCR检测体系,同时对该体系的扩增效率、精确度、灵敏度等指标进行了评估.结果显示,建立的实时荧光定量PCR检测体系中,目标序列的扩增效率均在97.434%～101.479%正常范围内(R2≥0.995),定量极限为20 copies,表明我们已成功构建了这4种转基因作物的品系质粒标准分子,并能有效应用于实时荧光定量PCR标准曲线的构建.; 关键词转基因重叠延伸PCR 质粒标准分子品系特异性检测实时荧光定量PCR; Keywords genetically modified crops overlap extension PCR standard reference molecules strain-specific detection real-time quantitative PCR; 分类号 TS207.3 [轻工技术与工程—食品科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名适于转基因油菜RT73品系特异性检测的标准分子构建及其适用性鉴定被引量：3: 2; 作者李俊毅李想褚庆华吕蓉张舒亚潘良文黄新朱水芳; 机构华东理工大学生物工程学院上海出入境检验检疫局中国检验检疫科学研究院动植物检疫研究所; 出处《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期76-83,共8页; 基金国家科技支撑项目(2008BAK41B01) 国家转基因重大专项(2009ZX08012-002B) +2 种基金国家"863"项目(2006AA10Z442) 上海检验检疫局科研项目(HK003-2010); 文摘针对目前转基因产品检测标准物质缺乏的难题,构建适于转基因油菜RT73品系特异性检测的标准分子pEASY-RT73,其包含转基因油菜RT73品系3'端侧翼序列,油菜内标准基因HMG和PEP片段。对其在定性和定量检测中的适用性进行了实验室内部验证,结果表明,标准分子pEASY-RT73高度特异于转基因油菜RT73品系。以标准分子为标准品的普通PCR扩增中,3个目标片段的检测下限(LOD)均为10拷贝。实时荧光PCR检测的LOD均为25拷贝,定量下限(LOQ)均为50拷贝。以标准分子为标准品构建的标准曲线反应效率介于0.96-1.02间,相关系数均大于0.999。分别以PEP和HMG为内标准基因对5个盲样的测试结果显示,测量值与设定值间偏差(Bias)介于-14.13%-14.29%间,SD小于0.20,RSD小于18.0%。因此,标准分子pEASY-RT73可很好地替代植物来源阳性标准品用于转基因油菜RT73及其来源产品品系特异性检测。; 关键词 PCR RT73 标准分子品系特异性检测实时荧光PCR; Keywords PCR RT73 Reference molecule Event-specific Real-time PCR; 分类号 S565.4 [农业科学—作物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名转基因玉米59122品系的特异性检测被引量：8: 3; 作者许文涛杨蓉陆姣张南罗云波何景黄昆仑; 机构中国农业大学食品科学与营养工程学院食品安全实验室农业部转基因产品检验监督测试中心(北京); 出处《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第4期139-142,共4页; 基金国家"863"计划项目(2006AA10Z440) 国家自然科学基金项目(30800770) 国家转基因生物新品种培育重大专项(2008ZX08012-001); 文摘使用反向聚合酶链式反应(PCR)技术克隆了转基因玉米59122的外源基因与玉米基因组之间的两段侧翼序列,并据其左侧侧翼序列设计了具品系特异性的引物,运用半巢式PCR技术建立了59122的品系特异性二重PCR检测方法,扩增片段100bp,横跨pat终止子与转基因玉米侧翼基因之间。以转基因玉米59122、MON863、MON810、GA21、NK603,转基因大豆Roundup Ready和转基因油菜GT73等为材料,证明本方法与其他转基因作物具有高特异性。本方法在检测59122时,确定出连接体系中线性DNA的最佳质量浓度为1ng/μL左右,检出限达到0.1%,灵敏度为38个单倍体基因组拷贝数。因此可准确、快速、高效地检测转基因玉米及其产品,或作为常规PCR定性检测后的验证方法。; 关键词转基因作物品系特异性检测半巢式聚合酶链式反应反向聚合酶链式反应二重聚合酶链式反应; Keywords genetically modified crop event-specific transgenic detection semi-nested polymerase chain reaction inverse polymerase chain reaction duplex polymerase chain reaction; 分类号 Q789 [生物学—分子生物学] S513 [农业科学—作物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名利用多重PCR技术快速检测五个转基因大豆品系被引量：17: 4; 作者董立明李葱葱邢珍娟邵改革夏蔚闫伟李飞武; 机构吉林省农业科学院农业质量标准与检测技术研究所; 出处《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期1002-1007,共6页; 基金国家转基因生物新品种培育重大专项(2014ZX0801202B) 吉林省农业科技创新工程项目(2013); 文摘转基因大豆305423、MON89788、CV127、GTS40-3-2、356043作为商品化应用最为广泛的大豆品系,种植面积占世界转基因大豆总种植面积的80%以上。根据大豆内标准基因Lectin和5种转基因大豆品系的边界序列设计特异性引物。通过验证引物的适用性、特异性和灵敏度,优化多重PCR检测体系中不同引物的用量及反应退火温度,建立了能同时扩增大豆内源基因Lectin和5个转基因大豆品系的六重PCR检测体系。结果表明:确定的大豆内源基因和5个转基因大豆品系的引物具有很好的特异性,引物之间无交叉扩增和非特异性扩增,多重PCR方法的检测灵敏度达到0.1%。该方法可作为转基因大豆及其产品成分检测的辅助手段,快速检测转基因大豆及其产品中的相应品系。; 关键词转基因大豆多重PCR 品系特异性检测; Keywords Genetically modified soybean Multiplex PCR Event-specific detection; 分类号 S565.1 [农业科学—作物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名转基因大豆MON89788实时荧光PCR检测方法的建立被引量：8: 5; 作者刘欣张国丛周兴虎祝长青黄明; 机构南京农业大学食品科技学院石家庄市农林科学研究院南京佳邦食品有限公司; 出处《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第4期193-197,共5页; 基金公益性行业(农业)科研专项(201303083-2) 江苏省科技支撑计划项目(BE2014304) 南京市生物农业项目(2013); 文摘为实现转基因大豆MON89788的标识管理,针对转基因大豆MON89788的品系特异性序列设计引物和Taq Man探针,建立转基因大豆MON89788实时荧光聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测方法,并对该方法的特异性、灵敏度和重复性进行检测。结果显示:建立的转基因大豆MON89788实时荧光PCR检测方法能扩增出127 bp的产物,特异性强,灵敏度达到0.1%,约为40个单倍体基因组拷贝,检测重复性好,可成功应用于实际样品检测。因此,建立的转基因大豆MON89788实时荧光PCR检测方法可以应用于转基因大豆MON89788大豆及其制品的检测。; 关键词转基因大豆 MON89788品系实时荧光PCR 品系特异性检测转基因标识; Keywords genetically modified soybean MON89788 event real-time PCR event-specific detection transgenic labeling; 分类号 S565.1 [农业科学—作物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	转基因大豆、玉米、油菜和水稻品系特异性检测质粒标准分子的快速构建及应用	吴永彬肖维威张宝蔡翠霞康文杰周琳华刘唐书马文丽	《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心	2011	11	在线阅读下载PDF 职称材料
2	适于转基因油菜RT73品系特异性检测的标准分子构建及其适用性鉴定	李俊毅李想褚庆华吕蓉张舒亚潘良文黄新朱水芳	《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心	2011	3	在线阅读下载PDF 职称材料
3	转基因玉米59122品系的特异性检测	许文涛杨蓉陆姣张南罗云波何景黄昆仑	《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心	2011	8	在线阅读下载PDF 职称材料
4	利用多重PCR技术快速检测五个转基因大豆品系	董立明李葱葱邢珍娟邵改革夏蔚闫伟李飞武	《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心	2016	17	在线阅读下载PDF 职称材料
5	转基因大豆MON89788实时荧光PCR检测方法的建立	刘欣张国丛周兴虎祝长青黄明	《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心	2015	8	在线阅读下载PDF 职称材料