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青虾咽侧体抑制激素基因全长cDNA序列的克隆及表达分析 被引量:3
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作者 卜宪飞 李真真 +5 位作者 乔慧 傅洪拓 吴滟 龚永生 蒋速飞 熊贻伟 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期116-124,共9页
咽侧体抑制激素(Allatostatin,AST)是一类由几至几十个氨基酸构成的神经肽类激素,在甲壳动物中刺激下颌器官合成甲基法尼酯,影响甲壳动物的蜕皮和生殖。然而AST基因在甲壳动物中的克隆和表达却罕见报道。研究克隆了青虾的AST基因全长cDN... 咽侧体抑制激素(Allatostatin,AST)是一类由几至几十个氨基酸构成的神经肽类激素,在甲壳动物中刺激下颌器官合成甲基法尼酯,影响甲壳动物的蜕皮和生殖。然而AST基因在甲壳动物中的克隆和表达却罕见报道。研究克隆了青虾的AST基因全长cDNA序列,在甲壳动物中使用荧光定量PCR技术检测了AST基因在不同组织中的表达。青虾AST基因cDNA全长2995 bp,包括242 bp的5′非编码区(UTR),647 bp的3′UTR,2106 bp的开放阅读框(ORF)。开放阅读框编码701个氨基酸,可转录翻译出35个AST多肽,在C末端都具有相同的Y/FXFGL-amide结构,属于A型-AST。氨基酸序列比对显示保守氨基酸为Tyr、Ala、Phe、Gly、Leu。蛋白相似度比对显示,AST多肽在无脊椎动物的进化中是相对保守的。系统进化树分析表明,青虾AST多肽与罗氏沼虾聚在一起,具有最近的亲缘关系。荧光定量PCR检测显示,AST基因在所有被检测组织中均有表达,由高到低依次为:肝胰脏>肠道>精巢>脑>心脏>卵巢。对青虾AST基因全长cDNA序列克隆和表达的研究为更进一步的了解AST多肽在青虾中的重要功能奠定了基础。 展开更多
关键词 青虾 咽侧体抑制激素 基因克隆 基因表达
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家蚕A型咽侧体抑制激素对白僵菌感染的抑制作用
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作者 苏韵 吴万明 +8 位作者 林苏 赵泽 王新 陈润浈 侯成香 李木旺 孙霞 张振东 郭锡杰 《中国蚕业》 2021年第3期6-11,共6页
家蚕是鳞翅目昆虫的代表,具有重要的经济价值和昆虫免疫机制研究价值。球孢白僵菌(Beauveria bassiana)作为致病力最强、危害最严重的病原真菌之一,其感染引起的家蚕真菌病常给养蚕业带来严重损失。如何有效防治该病的发生一直是重要的... 家蚕是鳞翅目昆虫的代表,具有重要的经济价值和昆虫免疫机制研究价值。球孢白僵菌(Beauveria bassiana)作为致病力最强、危害最严重的病原真菌之一,其感染引起的家蚕真菌病常给养蚕业带来严重损失。如何有效防治该病的发生一直是重要的研究课题。我们前期研究中发现在球孢白僵菌感染的家蚕中A型咽侧体抑制激素(A type Allatostatin,AST-A)基因的表达水平明显上调,推测其可能参与家蚕对球孢白僵菌感染的免疫反应。为探究AST-A在家蚕抵御球孢白僵菌感染过程中的作用,从家蚕克隆了AST-A基因的cDNA,采用原核表达系统表达获得了重组家蚕A型咽侧体抑制激素(BmAST-A)蛋白,经镍柱层析纯化后,进行了BmAST-A蛋白的体内试验以及BmAST-A基因的RNA干涉试验,检测其对球孢白僵菌感染的抑制作用。结果显示,对球孢白僵菌感染的家蚕5龄幼虫体腔注射纯化的重组BmAST-A蛋白,幼虫半数致死时间比对照组延迟了32.9 h,而采用RNAi沉默BmAST-A基因的表达,幼虫的半数致死时间比对照组提早了16.8 h。上述结果表明,BmAST-A在家蚕抵御球孢白僵菌感染的过程中发挥了重要作用。 展开更多
关键词 家蚕 A型咽侧体抑制激素 RNA干扰 球孢白僵菌 抑菌作用
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