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抗CEACAM5纳米抗体在大肠杆菌中的高效周质表达
1
作者
王准
陈玉娟
+10 位作者
谢英林
陈泉
宋水燕
朱晓宇
敬媛媛
周宇杭
李飞
咸漠
冯东晓
年锐
宋海鹏
《科学技术与工程》
北大核心
2019年第1期71-77,共7页
纳米抗体具有相对分子质量小、稳定性高、特异性强以及能够穿过血脑屏障等众多优势,而且其能够通过大肠杆菌、酵母等简单微生物大量表达。大肠杆菌周质表达纳米抗体是目前纳米抗体制备主要的方法之一,但是纳米抗体的表达水平还相对较低...
纳米抗体具有相对分子质量小、稳定性高、特异性强以及能够穿过血脑屏障等众多优势,而且其能够通过大肠杆菌、酵母等简单微生物大量表达。大肠杆菌周质表达纳米抗体是目前纳米抗体制备主要的方法之一,但是纳米抗体的表达水平还相对较低。以pET22b和pMES4为载体构建了两种重组表达质粒,并且比较了他们在不同宿主菌中表达纳米抗体的情况。结果表明,以pMES4为载体的大肠杆菌能够在周质中可溶性表达纳米抗体,而以pET22b为载体的大肠杆菌表达的纳米抗体无法分泌到周质空间中。随后,通过IPTG浓度优化及5 L发酵罐过程,控制实现了纳米抗体在大肠杆菌周质中的表达量达到308. 32 mg/L。研究提供了一种高效表达纳米抗体的方法,为纳米抗体的规模化制备奠定了技术基础。
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关键词
癌胚抗原
纳米抗体
大肠杆菌
周质表达
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职称材料
题名
抗CEACAM5纳米抗体在大肠杆菌中的高效周质表达
1
作者
王准
陈玉娟
谢英林
陈泉
宋水燕
朱晓宇
敬媛媛
周宇杭
李飞
咸漠
冯东晓
年锐
宋海鹏
机构
长春理工大学生命科学技术学院
吉林亚泰生物药业股份有限公司
中国科学院青岛生物能源与过程研究所
长春力太生物技术有限公司
出处
《科学技术与工程》
北大核心
2019年第1期71-77,共7页
文摘
纳米抗体具有相对分子质量小、稳定性高、特异性强以及能够穿过血脑屏障等众多优势,而且其能够通过大肠杆菌、酵母等简单微生物大量表达。大肠杆菌周质表达纳米抗体是目前纳米抗体制备主要的方法之一,但是纳米抗体的表达水平还相对较低。以pET22b和pMES4为载体构建了两种重组表达质粒,并且比较了他们在不同宿主菌中表达纳米抗体的情况。结果表明,以pMES4为载体的大肠杆菌能够在周质中可溶性表达纳米抗体,而以pET22b为载体的大肠杆菌表达的纳米抗体无法分泌到周质空间中。随后,通过IPTG浓度优化及5 L发酵罐过程,控制实现了纳米抗体在大肠杆菌周质中的表达量达到308. 32 mg/L。研究提供了一种高效表达纳米抗体的方法,为纳米抗体的规模化制备奠定了技术基础。
关键词
癌胚抗原
纳米抗体
大肠杆菌
周质表达
Keywords
carcino-embryonic antigen
nanobody
Escherichia.coli
periplasmic expression
分类号
R979.1 [医药卫生—药品]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
抗CEACAM5纳米抗体在大肠杆菌中的高效周质表达
王准
陈玉娟
谢英林
陈泉
宋水燕
朱晓宇
敬媛媛
周宇杭
李飞
咸漠
冯东晓
年锐
宋海鹏
《科学技术与工程》
北大核心
2019
0
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