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银鲫与彩鲫卵母细胞cDNA文库构建及周期蛋白A_1的cDNA克隆 被引量:17
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作者 樊连春 谢京 +1 位作者 汪洋 桂建芳 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期573-581,共9页
分别取行天然雌核发育繁殖的银鲫和两性生殖的彩鲫的卵母细胞为材料 ,提取总RNA ,分离mRNA ,进而反转录合成cDNA并定向插入λgtllSfi Not克隆载体 ,经体外包装构建了银鲫与彩鲫卵母细胞的表达型cDNA文库。测试结果表明库容量分别达到 3 ... 分别取行天然雌核发育繁殖的银鲫和两性生殖的彩鲫的卵母细胞为材料 ,提取总RNA ,分离mRNA ,进而反转录合成cDNA并定向插入λgtllSfi Not克隆载体 ,经体外包装构建了银鲫与彩鲫卵母细胞的表达型cDNA文库。测试结果表明库容量分别达到 3 1× 1 0 6(银鲫 )和 1 6× 1 0 6(彩鲫 )。进一步人工合成CyclinA1 保守引物 ,采用PCR扩增文库的方法 ,克隆了银鲫 (1 61 6bp)与彩鲫 (1 62 6bp)的CyclinA1 全长cDNA。序列分析结果表明 :两种鱼编码区长度均为 1 1 73bp ,起始于一个包含在脊椎动物起始密码子ANNATG基元内ATG的单一开放读码框 ,编码 391个氨基酸 ;5’ -端非编码区长度也同为 70bp ,3-’端非编码区长度略有不同 ,银鲫为 373bp ,而彩鲫则为 383bp ;二者 3’ -端均带有AATAAA的Poly(A)加尾信号以及 2 4bp(银鲫 )和 2 7bp(彩鲫 )的Poly(A)尾巴。比较银鲫、彩鲫和金鱼与人、爪蟾CyclinA1氨基酸序列同源性的结果表明 ,CyclinA1 在人、爪蟾与鱼类之间具有较高同源性 ;而在银鲫、彩鲫和金鱼之间 ,CyclinA1 仅在周期蛋白框外存在 5个氨基酸的差异 ,且这些差异均是由个别碱基的变异造成的。 展开更多
关键词 雌核发育 银鲫 彩鲫 CDNA文库 周期蛋白a1
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家蚕周期蛋白A基因(BmcyclinA)的克隆和表达谱分析 被引量:6
2
作者 张春冬 谈娟 +4 位作者 赵丹红 刘迪 冯业勋 潘敏慧 鲁成 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期761-767,共7页
周期蛋白A(cyclinA)能分别与2种重要的周期蛋白依赖性激酶cdk1和cdk2作用,推动细胞周期的正常进行。利用家蚕基因组数据和分子生物学方法克隆了cyclinA基因在家蚕中的同源物BmcyclinA(GenBank登录号:FJ619105),发现了BmcyclinA基因的另... 周期蛋白A(cyclinA)能分别与2种重要的周期蛋白依赖性激酶cdk1和cdk2作用,推动细胞周期的正常进行。利用家蚕基因组数据和分子生物学方法克隆了cyclinA基因在家蚕中的同源物BmcyclinA(GenBank登录号:FJ619105),发现了BmcyclinA基因的另一种错误剪接形式BmcyclinA-1。BmcyclinA基因位于家蚕第13号染色体,由7个外显子和6个内含子组成,其完整开放阅读框为1 533 bp,编码511个氨基酸,在248th-450th氨基酸区域存在2个保守的周期蛋白框。BmcyclinA-1仅能编码正常cyclinA蛋白N端的153个氨基酸残基。RT-PCR分析显示BmcyclinA基因在家蚕整个胚胎发育时期及5龄第3天各组织中均有表达,并且在幼虫精巢中的表达相对较高。 展开更多
关键词 家蚕 周期蛋白a 基因克隆 染色体定位 表达分析
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细胞周期蛋白A及P21在子宫内膜异位症患者在位和异位内膜组织中的表达 被引量:3
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作者 龙行涛 唐良萏 +1 位作者 周敏 张婧 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期1038-1042,共5页
目的探讨细胞周期蛋白A(CyclinA)及P21在子宫内膜异位症发生、发展中的作用。方法采集子宫内膜异位症患者(观察组)在位内膜(25例)和异位子宫内膜(28例)以及其他良性疾病患者的子宫内膜(对照组35例),用免疫印迹、RT-PCR、免疫组化的方法... 目的探讨细胞周期蛋白A(CyclinA)及P21在子宫内膜异位症发生、发展中的作用。方法采集子宫内膜异位症患者(观察组)在位内膜(25例)和异位子宫内膜(28例)以及其他良性疾病患者的子宫内膜(对照组35例),用免疫印迹、RT-PCR、免疫组化的方法检测CyclinA和P21表达。结果cyclinAmRNA在异位内膜增生期与分泌期表达量(1.24±0.10)、(1.33±0.21)均明显高于在位内膜(0.72±0.26)、(0.42±0.22)及对照组(0.68±0.09)、(0.35±0.06)(P<0.05)。CyclinA蛋白在异位内膜增生期与分泌期表达量(0.95±0.10)、(0.91±0.18)均明显高于在位内膜(0.53±0.08)、(0.27±0.11)及对照组(0.47±0.11)、(0.22±0.09)(P<0.05)。在位内膜CyclinA表达量与对照组相比均无显著性差异(P>0.05)。P21mRNA在对照组内膜增生期与分泌期表达量(0.21±0.01)、(0.54±0.35)均明显高于在位内膜(0.09±0.06)、(0.28±0.02)及异位内膜(0.06±0.01)、(0.13±0.00)(P<0.05)。P21蛋白在对照组内膜增生期与分泌期表达量(0.74±0.13)、(1.13±0.15)均明显高于在位内膜(0.59±0.21)、(0.62±0.29)及异位内膜(0.40±0.36)、(0.43±0.33)(P<0.05)。CyclinA在对照组内膜增生期表达高于分泌期(P<0.05),P21在对照组内膜分泌期表达高于增生期(P<0.05),而两者在异位内膜表达均失去周期性(P>0.05),两者在异位内膜中表达呈显著负相关(r=-0.738,P<0.01)。结论CyclinA及P21异常表达可能在子宫内膜异位症异位内膜增殖中起重要作用。 展开更多
关键词 子宫内膜异位症 细胞周期蛋白a 子宫内膜
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细胞周期蛋白A1 mRNA在骨髓增生异常综合症中的表达及其临床意义 被引量:3
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作者 贾晋松 徐世荣 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2009年第2期377-381,共5页
本研究探讨骨髓增生异常综合症(MDS)患者中细胞周期蛋白A1(cyclin A1)mRNA表达及其临床意义。采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测56例骨髓增生异常综合症患者及10例正常人骨髓细胞中的cyclin A1表达及cdk2、p21cip1的mRNA表达。结果... 本研究探讨骨髓增生异常综合症(MDS)患者中细胞周期蛋白A1(cyclin A1)mRNA表达及其临床意义。采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测56例骨髓增生异常综合症患者及10例正常人骨髓细胞中的cyclin A1表达及cdk2、p21cip1的mRNA表达。结果表明:MDS患者中cyclin A1的阳性率及mRNA表达水平(69.64%;0.964±1.879)均较正常人(0%;0.012±0.014)明显增高(p<0.01);在初治MDS患者中,MDS-RAEB组cyclinA1表达水平(1.895±1.769)明显高于MDS-RA组(0.629±1.583)(p<0.01);治疗后MDS患者的cyclin A1表达水平较治疗前明显降低(p<0.01)。结论:MDS患者cyclin A1表达水平较正常人明显增高,其异常表达可能是影响MDS患者预后的指标之一。 展开更多
关键词 骨髓增生异常综合症 细胞周期蛋白a1 RT-PCR
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肠型胃癌中TGF-β及细胞周期蛋白A过表达的临床意义 被引量:1
5
作者 张川 江佛湖 +1 位作者 赵力民 戴强 《上海第二医科大学学报》 CSCD 2003年第2期137-139,共3页
目的 探讨TGF-β_1、TGF-β_2、细胞周期蛋白A(Cyelin A)在肠型胃癌及癌旁组织中表达的意义。方法 采用免疫组化法检测TGF-β_1、TGF-β_2、Cyelin A的表达。结果 胃癌组织中TGF-β_1、TGF-β_2、Cyelin A阳性率分别为59.5%(25/42)、73.... 目的 探讨TGF-β_1、TGF-β_2、细胞周期蛋白A(Cyelin A)在肠型胃癌及癌旁组织中表达的意义。方法 采用免疫组化法检测TGF-β_1、TGF-β_2、Cyelin A的表达。结果 胃癌组织中TGF-β_1、TGF-β_2、Cyelin A阳性率分别为59.5%(25/42)、73.6%(31/42)及85.7%(36/42),显著高于癌旁组织;有区域淋巴结转移、侵及浆膜或组织分化程度高者TGF-β_1、TGF-β_2阳性表达率显著增高(P<0.05)。结果 胃癌组织TGF-β_1、TGF-β_2、Cyelin A过表达可能在肿瘤分化程度、浸润、转移及预后中起重要作用。 展开更多
关键词 胃肿瘤 转化生长因子Β 细胞周期蛋白a
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细胞周期蛋白A2在大鼠急性心肌梗死后心肌细胞的表达
6
作者 胡圣大 李拥军 +2 位作者 马根山 鄢高亮 姚玉宇 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期918-922,共5页
目的:探讨急性心肌梗死后梗死区周围心肌细胞内细胞周期蛋白A2(cyclin A2)的表达。方法:制作SD大鼠急性心肌梗死模型,分别于梗死后3d、1周、2周、3周、4周各处死5只大鼠,5只假手术大鼠为对照,取出心脏组织,进行Masson染色,同时使用免疫... 目的:探讨急性心肌梗死后梗死区周围心肌细胞内细胞周期蛋白A2(cyclin A2)的表达。方法:制作SD大鼠急性心肌梗死模型,分别于梗死后3d、1周、2周、3周、4周各处死5只大鼠,5只假手术大鼠为对照,取出心脏组织,进行Masson染色,同时使用免疫组织化学法检测心脏组织中cyclin A2及磷酸化组蛋白H3(phospho-histone H3,H3P)的表达。结果:Masson染色从病理上证明心肌梗死模型构建成功;梗死区周围心肌细胞cyclin A2的表达在梗死后1周时最高,阳性细胞染色百分比为(7.72±1.16)%,2周后逐渐下降,梗死后4周时,与假手术组相似,几乎无阳性表达。梗死后第3天、1周、2周和3周均可见少量心肌细胞核表达H3P,其阳性率为1.56%~3.12%。结论:心肌细胞cyclin A2的阳性表达提示急性心肌梗死后梗死区周围少部分心肌细胞能重新进入有丝分裂周期。 展开更多
关键词 细胞周期蛋白a2 急性心肌梗死
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周期蛋白A在白血病细胞中表达意义的临床与实验研究(英文) 被引量:3
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作者 俞翚 谢彦晖 +2 位作者 范华骅 郑滨 谢毅 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2003年第2期146-152,共7页
不断增殖是肿瘤的基本特征。一些基本的细胞周期调控分子参与了肿瘤的形成。细胞周期蛋白A(cyclinA)是在G1/S期表达的细胞周期蛋白 (cyclin) ,其异常高表达参与了肿瘤的形成。为了探讨cyclinA异常高表达与白血病细胞恶性增殖的关系 ,采... 不断增殖是肿瘤的基本特征。一些基本的细胞周期调控分子参与了肿瘤的形成。细胞周期蛋白A(cyclinA)是在G1/S期表达的细胞周期蛋白 (cyclin) ,其异常高表达参与了肿瘤的形成。为了探讨cyclinA异常高表达与白血病细胞恶性增殖的关系 ,采用流式细胞仪胞浆内间接免疫荧光 /DNA双染色法半定量分析了急性白血病患者、门诊接受骨髓穿刺的患者、健康献血者这三种不同来源的外周血或骨髓标本细胞 ,以及白血病细胞系 (HL 6 0 )cyclinA表达水平。为了进一步研究cyclinA在白血病细胞增殖中的作用 ,用在体内、体外均有抗肿瘤作用的六亚甲基二乙酰胺 (HMBA)在体外抑制白血病细胞系HL 6 0增殖 ,并诱导其分化。增殖抑制效应采用四唑盐还原试验和细胞周期分析来检测。细胞表面分化抗原CD33、CD11b改变来检测分化。结果发现 ,两组来自白血病标本的细胞S期cyclinA (即急性白血病患者外周血或骨髓幼稚细胞和白血病细胞系 )表达阳性率要远远高于另两组 (门诊骨髓穿刺的患者骨髓细胞和健康献血员外周血细胞 ) ;在HMBA抗肿瘤细胞系HL 6 0增殖实验中发现随药物剂量的加大 ,增殖抑制和分化程度呈剂量依赖性 ;同时 ,胞内cyclinA蛋白表达水平被明显下调了 ,也呈剂量依赖性。结论 :白血病细胞S期cyclinA异常高表达 。 展开更多
关键词 周期蛋白a 细胞表达 实验研究 细胞周期 肿瘤形成 急性白血病
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转染反义细胞周期蛋白A的舌癌细胞系的建立与鉴定 被引量:1
8
作者 周峻 杨连甲 +2 位作者 金岩 董绍忠 赵宇 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期287-289,293,共4页
目的 :研究反义细胞周期蛋白 (cyclinA)基因对舌癌细胞周期的调控作用 ,为cyclinA在基因治疗方面提供理论基础。方法 :采用阳离子脂质体转染方法将已构建成功含人全长cyclinA(1 77kb)的反义真核表达载体pAS_A导入舌癌细胞系 (Tca8113) ,... 目的 :研究反义细胞周期蛋白 (cyclinA)基因对舌癌细胞周期的调控作用 ,为cyclinA在基因治疗方面提供理论基础。方法 :采用阳离子脂质体转染方法将已构建成功含人全长cyclinA(1 77kb)的反义真核表达载体pAS_A导入舌癌细胞系 (Tca8113) ,经G418选择性培养液筛选 ,获得阳性克隆细胞 ,通过细胞原位杂交检测cyclinA基因的稳定转染情况。结果 :pAS_A成功转染进入Tca8113,转染后细胞内cyclinAmRNA的转录和蛋白表达明显降低。结论 展开更多
关键词 细胞周期蛋白a 反义技术 基因转染 舌癌
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猪细胞周期蛋白A基因的克隆及其功能研究
9
作者 范丽 唐青海 +2 位作者 张彦明 刘伟 仝刚 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期469-477,共9页
本研究旨在克隆猪细胞周期蛋白A基因(CyclinA),并在猪脐静脉血管内皮细胞(SUVEC)中表达,以验证其功能。以人的CyclinA基因为信息探针,经电子克隆得到猪CyclinA基因,通过RT-PCR和DNA测序验证电子克隆结果并对其作生物信息学分析,用RT-PCR... 本研究旨在克隆猪细胞周期蛋白A基因(CyclinA),并在猪脐静脉血管内皮细胞(SUVEC)中表达,以验证其功能。以人的CyclinA基因为信息探针,经电子克隆得到猪CyclinA基因,通过RT-PCR和DNA测序验证电子克隆结果并对其作生物信息学分析,用RT-PCR、Westernblot研究它在SUVEC中的表达情况。应用激光共聚焦显微镜分析它在细胞中的亚细胞定位,并通过流式细胞仪分析细胞周期以及用MTS法测定细胞的增殖能力。结果如下:核酸测序证明RT-PCR产物同电子克隆结果相符。该cDNA包含1299bp的完整开放阅读框(ORF),共编码432个氨基酸,经NCBIBLAST分析,该基因定位于猪的8号染色体上。Westernblot结果显示CyclinA基因编码蛋白的相对分子质量大小约为40ku,亚细胞定位研究表明该蛋白定位于细胞核中。经流式细胞仪分析表明稳定表达该基因的细胞,其G1期的细胞数量比对照组细胞增加了15%~20%,而S期的细胞数量比对照组细胞减少了约18%;MTS法检测显示细胞株SUVEC-CycAGFP的增殖活性明显高于对照组细胞。作者成功克隆到新基因猪源细胞周期蛋白A,并验证了其生物学功能,为今后开展病毒感染对猪细胞周期蛋白A影响的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 猪细胞周期蛋白a基因 克隆 猪脐静脉血管内皮细胞 真核表达 细胞周期 MTS
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细胞周期蛋白A1对SKM-1细胞增殖的影响及其在骨髓异常增生综合征中的作用
10
作者 丁雪 程雅琳 +3 位作者 高海成 卢文艺 张瑶 贾晋松 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期1733-1737,共5页
目的:通过小干扰RNA(siRNA)下调Cyclin A1的表达,观察其对骨髓增生异常综合征(MDS)细胞系SKM-1细胞增殖的影响并探讨其作用机制。方法:采用阳离子脂质体转染方法,在SKM-1细胞中转染Cyclin A1的siRNA;转染48 h后收集细胞,应用Western blo... 目的:通过小干扰RNA(siRNA)下调Cyclin A1的表达,观察其对骨髓增生异常综合征(MDS)细胞系SKM-1细胞增殖的影响并探讨其作用机制。方法:采用阳离子脂质体转染方法,在SKM-1细胞中转染Cyclin A1的siRNA;转染48 h后收集细胞,应用Western blot及RT-PCR测定转染效率;应用CCK-8方法检测细胞增殖,Western blot及RT-PCR检测Cyclin A1基因沉默前后CDK2、RUNX1、SRSF2基因表达的水平。结果:转染Cyclin A1特异性siRNA 48 h后,Cyclin A1蛋白及mRNA表达水平显著下降(P<0.01)。下调Cyclin A1后,SKM-1细胞的增殖受抑,CDK2、RUNX1及SRSF2基因的蛋白及mRNA表达量均下调(P<0.05)。结论:Cyclin A1表达下调后,SKM-1细胞的增殖受到抑制,表明Cyclin A1可能是MDS治疗的潜在靶点之一。 展开更多
关键词 细胞周期蛋白a1 骨髓增生异常综合征 SKM-1细胞
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细胞周期蛋白A对舌鳞癌细胞周期和抗原含量的影响
11
作者 周峻 杨连甲 +2 位作者 金岩 董绍忠 李媛 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期134-135,共2页
关键词 细胞周期蛋白a 舌肿瘤 流式细胞术 舌鳞癌 抗原含量
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调控细胞周期蛋白A周期性变化的关键分子——UbcH10
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作者 刘亚庆 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期133-133,共1页
关键词 细胞周期蛋白a 细胞增殖 周期性变化 分子基础 调控点 控制 染色质 激酶 繁衍 生物化学与分子生物学
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内皮细胞分裂周期蛋白42在急性肺损伤所致肺血管屏障受损中的机制研究
13
作者 徐雯 李家飞 +2 位作者 王芳 吴南林 秦立龙 《中国病理生理杂志》 北大核心 2025年第4期704-713,共10页
目的:探讨细胞分裂周期蛋白42(cell division cycle protein 42,Cdc42)在急性肺损伤(acute lung injury,ALI)所致肺血管屏障受损中的可能机制。方法:(1)通过GEO(Gene Expression Omnibus)数据库分析ALI中Cdc42和含IQ基序GTP酶激活蛋白1(... 目的:探讨细胞分裂周期蛋白42(cell division cycle protein 42,Cdc42)在急性肺损伤(acute lung injury,ALI)所致肺血管屏障受损中的可能机制。方法:(1)通过GEO(Gene Expression Omnibus)数据库分析ALI中Cdc42和含IQ基序GTP酶激活蛋白1(IQ motif-containing GTPase-activating protein 1,IQGAP1)的表达。(2)收集2022年1月至2023年12月期间在呼吸与危重症医学科及重症医学科确诊为ALI的30例患者和30名健康体检者的血浆样本,同时收集ALI患者的支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)。动物实验选取18只雄性C57小鼠,随机分为对照(control,CON)组、脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)组和LPS+ML141(Cdc42抑制剂)组,每组6只。各组小鼠在72 h后处死,收集BALF,计数BALF细胞数目,BCA法测定BALF中蛋白浓度,酶联免疫吸附实验检测人血浆及小鼠BALF中Cdc42及炎症因子白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、IL-1β和肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)水平,通过小鼠肺组织切片HE染色评估肺损伤程度。(3)内皮磁珠分选小鼠肺微血管内皮细胞(pulmonary microvascular endothelial cells,PMVECs),细胞实验分为CON组、LPS组和LPS+ML141组。采用血管成环实验检测各组PMVECs的血管成环能力,细胞Ca^(2+)成像技术测定PMVECs的Ca^(2+)水平,活性氧(reactive oxygen species,ROS)检测试剂盒检测PMVECs的ROS水平,并通过Western blot分析各组PMVECs中Cdc42、血管内皮钙黏蛋白(VE-cadherin)、细胞间黏附分子1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)、肌球蛋白轻链(myosin light chain,MLC)、磷酸化MLC(phosphorylated MLC,p-MLC)和IQGAP1的蛋白水平。结果:(1)GEO数据库分析显示,ALI模型中Cdc42的表达水平显著升高(P<0.01)。(2)ALI患者血浆中Cdc42及炎症因子(IL-6、IL-1β和TNF-α)水平显著升高(P<0.01),BALF中性粒细胞显著增多;治疗后上述指标显著下降(P<0.05)。ALI动物模型显示,BALF细胞计数、蛋白浓度、炎症因子及肺组织损伤评分均显著升高(P<0.01);ML141处理后,上述指标显著改善(P<0.05)。(3)体外细胞实验结果显示,LPS组PMVECs中Cdc42、ICAM-1、p-MLC、IQGAP1、ROS及Ca^(2+)水平均显著升高(P<0.01),而VE-cadherin和血管成环能力则显著下降(P<0.01);ML141处理后上述指标显著改善(P<0.05)。结论:Cdc42可能通过调节PMVEC中Ca^(2+)通量影响IQGAP1,从而参与ALI所致肺血管屏障损伤。 展开更多
关键词 急性肺损伤 细胞分裂周期蛋白42 钙黏蛋白 含IQ基元GTP酶激活蛋白1 血管生成
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金针菇细胞周期蛋白编码基因fvccnl的鉴定及表达分析
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作者 黄千慧 汤熙 +3 位作者 周冰心 林冬梅 张维瑞 郑世仲 《微生物学杂志》 北大核心 2025年第1期43-50,共8页
为探索细胞周期蛋白在食用菌生长发育过程中的作用,基于金针菇(Flammulina filiformis)的基因组和转录组数据筛选得到一个假定细胞周期蛋白编码基因fvccnl,并对其基因结构、蛋白质基本性质、分子进化、蛋白质比对与表达模式进行分析。... 为探索细胞周期蛋白在食用菌生长发育过程中的作用,基于金针菇(Flammulina filiformis)的基因组和转录组数据筛选得到一个假定细胞周期蛋白编码基因fvccnl,并对其基因结构、蛋白质基本性质、分子进化、蛋白质比对与表达模式进行分析。结果表明,fvccnl基因全长1767 bp,含有5个外显子及4个内含子,CDS长度为1563 bp,编码蛋白含520个氨基酸,预测分子量为59099.95 Da,等电点为5.01。保守域与分子进化分析结果显示,Fvccnl蛋白具有Cyclin_N与CYCLIN两个保守结构域,均系典型的细胞周期蛋白保守域,属于细胞周期蛋白超家族成员;Fvccnl与子囊菌和动物的B类细胞周期蛋白进化关系较近,而与动物D类和子囊菌CLN型细胞周期蛋白关系较远。实时荧光定量PCR结果表明,fvccnl在原基、菌柄和菌盖中的表达量分别是菌丝的3.2、9.1和4.2倍,在菌柄伸长部位的表达量是非伸长部位的11倍,推测fvccnl对金针菇子实体的发育,尤其是对菌柄的伸长具有重要作用。 展开更多
关键词 细胞周期蛋白 子实体发育 金针菇 菌柄伸长 细胞周期蛋白依赖性激酶
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细胞周期蛋白D1和细胞周期蛋白E1基因多态性及其交互作用与先兆子痫的关联研究
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作者 周韵哲 苗竣翔 +2 位作者 韦杰桦 陈立章 王婷婷 《中国全科医学》 北大核心 2025年第17期2142-2148,共7页
背景先兆子痫(PE)是一种致命的多系统疾病,严重威胁妇女和胎儿的健康。目的探索细胞周期蛋白D1(CCND1)和细胞周期蛋白E1(CCNE1)基因多态性及其交互作用与PE的关联,为PE病因学研究提供科学依据。方法采用病例对照研究设计,招募2020年10月... 背景先兆子痫(PE)是一种致命的多系统疾病,严重威胁妇女和胎儿的健康。目的探索细胞周期蛋白D1(CCND1)和细胞周期蛋白E1(CCNE1)基因多态性及其交互作用与PE的关联,为PE病因学研究提供科学依据。方法采用病例对照研究设计,招募2020年10月—2023年10月在中南大学湘雅三医院和湖南省妇幼保健院产科就诊的202例PE患者作为病例组,以同期在该院产检且血压正常的400例孕产妇作为对照组。采用多因素Logistic回归分析探讨CCND1和CCNE1基因多态性与PE发生的关联,并计算调整后比值比(aOR)及95%置信区间(95%CI)。采用叉生分析探索基因-基因相加交互作用与PE的关联。使用3DSNP数据库对单核苷酸多态性(SNP)位点进行功能注释。结果多因素Logistic回归分析发现,CCND1 rs1352075位点携带CT/TT基因型孕妇发生PE的风险低于CC基因型(显性模型:aOR=0.44,95%CI=0.20~0.96,P<0.05)。CCNE1 rs3218070位点携带GG基因型孕妇发生PE的风险高于CC/GC基因型(隐性模型:aOR=4.31,95%CI=1.16~16.04,P<0.05)。3DSNP数据库分析结果显示rs1352075和rs3218070染色质开放区域中,与血管以及胎盘形成相关的细胞调控因子结合位点占比较高。交互作用分析显示,rs1352075和rs3218070位点间的相加交互作用与PE发生无关。结论CCND1 rs1352075位点携带CC基因型和CCNE1 rs3218070位点携带GG基因型可能与PE发生风险升高有关。 展开更多
关键词 先兆子痫 细胞周期蛋白D1 细胞周期蛋白E1 单核苷酸基因多态性 病例对照研究 LOGISTIC回归分析
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细胞分裂周期蛋白42通过钙池操纵钙通道调控肺动脉高压内皮-间充质转化的机制研究
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作者 秦立龙 王晓彤 +2 位作者 汪丽静 臧蕾蕾 程玉生 《中国病理生理杂志》 北大核心 2025年第10期1900-1909,共10页
目的:探讨细胞分裂周期蛋白42(cell division cyclin 42,Cdc42)在肺动脉高压(pulmonary hyperten⁃sion,PH)中调控内皮-间充质转化(endothelial-mesenchymal transition,EndMT)的可能机制。方法:采用Sugen-5416联合低氧构建PH模型,将24只... 目的:探讨细胞分裂周期蛋白42(cell division cyclin 42,Cdc42)在肺动脉高压(pulmonary hyperten⁃sion,PH)中调控内皮-间充质转化(endothelial-mesenchymal transition,EndMT)的可能机制。方法:采用Sugen-5416联合低氧构建PH模型,将24只C57BL/6小鼠随机分为常氧对照(CON)组、常氧+ML141(CON+ML141)组、Sug⁃en-5416+低氧(SuHx)组及SuHx+ML141组,每组6只。4周后检测右心室收缩压(right ventricular systolic pressure,RVSP)和心脏超声指标,并取肺组织进行免疫荧光染色。使用磁珠分选小鼠肺微血管内皮细胞(pulmonary micro⁃vascular endothelial cells,PMVECs),通过Ca^(2+)成像技术检测Ca^(2+)信号,Western blot检测EndMT相关蛋白及基质相互作用分子1(stromal interaction molecule 1,STIM1)和钙释放激活钙调节蛋白1(calcium release-activated calcium mod⁃ulator 1,Orai1)表达。结果:SuHx组小鼠RVSP、Fulton指数(右室/左室+室间隔)、舒张末期右室游离壁厚度(enddiastolic right ventricular free wall thickness,RVEDWT)和收缩末期右室游离壁厚度(end-systolic right ventricular free wall thickness,RVESWT)显著升高(P<0.01);肺动脉血流加速时间/射血时间(pulmonary artery acceleration time/pul⁃monary artery ejection time,PAT/PET)、三尖瓣环收缩位移(tricuspid annulus plane systolic excursion,TAPSE)显著降低(P<0.01),Cdc42抑制剂ML141可改善上述指标。SuHx组小鼠肺血管内皮细胞CD31荧光强度显著降低(P<0.01),平滑肌细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)荧光强度显著增强(P<0.01),且出现CD31/α-SMA共定位,ML141可逆转此现象。低氧诱导PMVECs发生EndMT,表现为CD31和血管内皮钙黏蛋白(vascular endothelial cadherin,VE-cadherin)降低,α-SMA和波形蛋白(vimentin)升高(P<0.01),ML141可抑制EndMT(P<0.01)。低氧激活钙池操纵钙通道(store-operated calcium entry,SOCE),增加内钙释放、外钙内流及基础钙水平(P<0.01),并上调STIM1和Orai1表达(P<0.01),ML141可逆转上述变化。ML141及敲减STIM1可抑制EndMT转录因子Snail和Twist的升高(P<0.05)。结论:Cdc42可能通过调控PMVECs中钙池操纵钙通道参与PH中的EndMT。 展开更多
关键词 肺动脉高压 细胞分裂周期蛋白42 内皮-间充质转化 钙池操纵钙通道 基质相互作用分子1
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细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子3和血清壳多糖酶3样蛋白1、miR-106b联合检测在肝癌转移中的预测价值
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作者 杨洪 丁钧 +1 位作者 郭鹏 张治清 《实用医学杂志》 北大核心 2025年第10期1473-1479,共7页
目的 探究细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子3(CDKN3)和血清壳多糖酶3样蛋白1(CHI3L1)、微小RNA-106b(miR-106b)联合检测在肝癌转移中的预测价值。方法 选取2019年9月至2023年12月期间医院收治的肝癌患者100例作为研究对象,纳入肝癌组,将... 目的 探究细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子3(CDKN3)和血清壳多糖酶3样蛋白1(CHI3L1)、微小RNA-106b(miR-106b)联合检测在肝癌转移中的预测价值。方法 选取2019年9月至2023年12月期间医院收治的肝癌患者100例作为研究对象,纳入肝癌组,将同期87例肝硬化患者作为肝硬化组,96例慢性乙肝患者作为慢性乙肝组、常规体检健康人员98例纳入健康对照组,对比各组血清CHI3L1、细胞周期分子CDKN3、miR-106b水平。将肝癌组按照随访1年期间是否转移分为26例转移组、63例未转移组、11例失随访,对比两组患者基线资料、细胞周期分子CDKN3、miR-106b、血清CHI3L1水平。利用多因素logistic分析肝癌转移的风险因素,利用ROC曲线分析miR-106b、细胞周期分子CDKN3、血清CHI3L1联合检测对肝癌转移的预测价值。结果 与健康对照组相比,肝癌组、慢性乙型组、肝硬化组的CHI3L1、细胞周期分子CDKN3、血清miR-106b水平升高,且慢性乙型组<肝硬化组<肝癌组,随肝脏疾病程度不断增加,其呈现升高趋势,差异有统计学意义(P <0.05)。与未转移组相比,转移组谷丙转氨酶(ALT)、肿瘤> 3 cm占比、CHI3L1、细胞周期素A2(CCNA2)、肿瘤分期>Ⅲ期占比、细胞周期分子CDKN3、异常凝血酶原、谷氨酰转肽酶(GGT)、miR-106b、总胆汁酸(TBA)、甲胎蛋白(AFP)、肿瘤数量多发占比、谷草转氨酶(AST)水平升高,差异有统计学意义(P <0.05)。多因素logistic分析结果显示,肝癌转移的风险因素包括ALT、CCNA2、肿瘤> 3 cm、AST、GGT、肿瘤分期>Ⅲ期、AFP、CHI3L1、多发肿瘤、miR-106b、细胞周期分子CDKN3、TBA。ROC曲线分析结果显示:miR-106b、血清CHI3L1、细胞周期分子CDKN3联合检测敏感度为93.65%、准确度为84.27%、AUC值为0.776高于单项检测敏感度、准确度、AUC值,差异有统计学意义(P <0.05)。结论 细胞周期分子CDKN3和血清CHI3L1、miR-106b水平升高为肝癌转移的风险因素,可用于预测肝癌转移发生情况,且联合检测预测效能显著。 展开更多
关键词 细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子3 壳多糖酶3样蛋白1 微小RNA-106b 肝癌转移
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细胞分裂周期蛋白20通过激活PI3K/Akt/mTOR通路驱动非小细胞肺癌吉非替尼耐药
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作者 李之坚 张冰 刘宁 《中国生物化学与分子生物学报》 北大核心 2025年第8期1159-1168,共10页
吉非替尼是第一代表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitor,TKI),通过靶向突变型EGFR,在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)治疗中表现出显著疗效。然而,耐... 吉非替尼是第一代表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitor,TKI),通过靶向突变型EGFR,在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)治疗中表现出显著疗效。然而,耐药性的出现限制了其长期临床获益。细胞分裂周期蛋白20(cell division cycle 20,CDC20)是调控细胞周期的关键蛋白质,在多种肿瘤的发生发展中发挥重要作用,但其在NSCLC耐药性获得中的调控机制尚未见报道。本研究旨在揭示CDC20驱动非小细胞肺癌吉非替尼耐药的分子机制。通过吉非替尼诱导构建耐药细胞株HCC827/GR(IC_(50)0.05±0.01μmol/L vs 36.24±6.21μmol/L)和PC9/GR(IC_(50)0.02±0.01μmol/L vs 25.36±5.57μmol/L)。通过生物信息学技术分析证实,CDC 20的转录水平在肺癌样本中呈现表达水平显著上调现象,其异常表达特征与患者总生存期缩短存在明显关联。Western印迹检测证实,耐药细胞HCC827/GR和PC9/GR中CDC20蛋白水平明显高于亲本细胞(HCC827和PC9)。为深入探究CDC20在非小细胞肺癌吉非替尼耐药中的作用机制,我们首先通过CRISPR/Cas9技术敲除CDC 20,发现该干预可显著恢复耐药细胞对吉非替尼的敏感性(IC_(50)37.08±6.15μmol/L vs 10.49±1.83μmol/L,7.23±1.55μmol/L),并同时促进细胞凋亡和诱导G 2/M期阻滞。与之相反,过表达CDC20不仅降低敏感细胞的药物敏感性,还能显著抑制吉非替尼诱导的细胞周期阻滞和凋亡。进一步机制研究表明,CDC 20敲除可抑制PI3K/Akt/mTOR通路活化,同时显著上调促凋亡蛋白质截断胱天蛋白酶3和Bax的表达,下调抗凋亡蛋白质Bcl-2的表达。这些结果证实,CDC20通过PI3K/Akt/mTOR信号通路调控非小细胞肺癌吉非替尼耐药,为克服靶向治疗耐药提供了新靶点。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 吉非替尼耐药 细胞分裂周期蛋白20 PI3K/Akt/mTOR信号通路
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基于FAERS数据库的周期蛋白依赖性激酶4/6抑制剂血液毒性真实世界研究 被引量:8
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作者 董俊丽 宋海斌 +1 位作者 张韶辉 郭珩 《医药导报》 CAS 北大核心 2024年第1期137-142,共6页
目的 基于美国美国食品药品管理局(FDA)的不良事件报告系统(FAERS)分析3种周期蛋白依赖性激酶4/6(CDK4/6)抑制剂上市后的不良事件(AEs)信号,为临床用药安全提供参考。方法 提取FAERS数据库2015年第一季度至2022年第一季度共29个季度AEs... 目的 基于美国美国食品药品管理局(FDA)的不良事件报告系统(FAERS)分析3种周期蛋白依赖性激酶4/6(CDK4/6)抑制剂上市后的不良事件(AEs)信号,为临床用药安全提供参考。方法 提取FAERS数据库2015年第一季度至2022年第一季度共29个季度AEs,利用报告比值比法(ROR)和比例报告比值法(PRR)对CDK4/6抑制剂AEs进行数据挖掘。结果 CDK4/6抑制剂相关性血液毒性报告共有7 872份,各抑制剂血液毒性AEs占总AEs比例依次为哌柏西利(80.31%)>瑞博西利(15.36%)>阿贝西利(4.33%)。血液毒性常见中性粒细胞减少和贫血。哌柏西利(2 982/6 322,47.17%)和瑞博西利(613/1 209,50.70%)致中性粒细胞减少的报告占比较阿贝西利(117/341,34.31%)更高,血液毒性主要发生在药物开始使用后60 d内(1 630,61.86%),哌柏西利中位时间最长,且用药90 d后仍有32.9%的患者存在血液毒性,不同CDK4/6抑制剂血液毒性临床表现及发生强度存在差异。结论 哌柏西利、阿贝西利、瑞博西利均会导致明显的血液毒性,其中阿贝西利致血液毒性报告最少,但要警惕阿贝西利致贫血后导致死亡的风险。用药后的2个月内密切监测全血细胞计数,关注中性粒细胞、血红蛋白等水平,警惕CDK4/6抑制剂相关血液AEs的发生。 展开更多
关键词 周期蛋白依赖性激酶4/6抑制剂 血液毒性 药品不良反应 真实世界研究
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细胞分裂周期相关蛋白5(CDCA5)在人类肿瘤中致癌作用的泛癌分析
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作者 陈铭 丁勇 高振国 《西南大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期98-108,共11页
CDCA5高表达已被发现在多种肿瘤中具有致癌作用.运用生物信息学方法探讨CDCA5在泛癌中的表达特征,通过TCGA和GTEX数据库获得CDCA5在肿瘤样本和癌旁样本中的表达情况,从基因表达、生存分析、基因变异和免疫浸润等方面探讨了CDCA5在不同... CDCA5高表达已被发现在多种肿瘤中具有致癌作用.运用生物信息学方法探讨CDCA5在泛癌中的表达特征,通过TCGA和GTEX数据库获得CDCA5在肿瘤样本和癌旁样本中的表达情况,从基因表达、生存分析、基因变异和免疫浸润等方面探讨了CDCA5在不同肿瘤发病机制中的作用;通过GSCA(Gene Set Cancer Analysis)分析CDCA5表达与药物IC_(50)(半数抑制浓度)的关系并用免疫组化验证了该基因;通过STRING和GEPIA2数据库获取与CDCA5相关的基因并进行KEGG(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes)富集分析.结果表明:CDCA5在大多数肿瘤中高表达,且与部分肿瘤患者的预后存在明显的相关性.CDCA5表达与肿瘤浸润免疫细胞(TIICs)显著相关并且TIICs标记物表现出不同的免疫浸润模式.拷贝数变异(CNV)与CDCA5的表达呈正相关,甲基化与CDCA5的表达呈负相关.IC_(50)数据显示多种药物可显著抑制CDCA5的表达.免疫组化实验证实了CDCA5在肝恶性肿瘤和结肠恶性肿瘤中具有促癌作用,可作为肿瘤治疗的生物标志物,为肿瘤治疗提供了一种新的研究方向. 展开更多
关键词 细胞分裂周期相关蛋白5 泛癌分析 免疫浸润 肿瘤
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