槲皮素对糖尿病肾病大鼠的肾小球周期素激酶抑制剂P27水平的影响 被引量：6

1

作者 梅小斌 崔若兰 +3 位作者 袁伟杰 叶志斌 湛冯兰 高从容 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第11期1208-1210,共3页

目的:探讨槲皮素对糖尿病肾病的影响及该影响与肾小球周期素激酶抑制剂P27的关系。方法:腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病(DM)模型,分别以生理盐水或槲皮素(100 mg·kg1·d-1)灌胃8周。蛋白印迹(Western杂交)法测定肾小球裂解液P2... 目的:探讨槲皮素对糖尿病肾病的影响及该影响与肾小球周期素激酶抑制剂P27的关系。方法:腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病(DM)模型,分别以生理盐水或槲皮素(100 mg·kg1·d-1)灌胃8周。蛋白印迹(Western杂交)法测定肾小球裂解液P27蛋白水平,ELISA法测定肾小球裂解液细胞外基质(ECM)蛋白(Ⅳ型胶原及纤维连接蛋白)和尿白蛋白。结果:DM 8周大鼠肾小球P27水平增高,ECM蛋白水平增加,尿白蛋白排泄增多,肾质量/体质量比值增高。槲皮素灌胃8周显著降低DM大鼠。肾小球P27水平(10.6±3.1 vs 18.5±4.3,P<0.01)和ECM蛋白水平,减少尿白蛋白排泄[(17.62±3.02)vs(39.62±3.68)μg/24 h,P<0.01],降低DM大鼠肾质量/体质量比值(11.35±1.76 vs 14.87±2.02,P<0.01)。槲皮素不改变DM大鼠血糖水平。结论:槲皮素可能通过降低肾小球P27水平改善糖尿病肾病症状。 展开更多

关键词 槲皮素 细胞周期蛋白类 周期素激酶抑制剂 糖尿病肾病

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氨基胍通过降低周期素激酶抑制剂P27水平减轻高糖培养系膜细胞肥大程度 被引量：3

2

作者 梅小斌 高从容 +2 位作者 崔若兰 袁伟杰 叶志斌 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期203-205,共3页

目的 :研究氨基胍 (AG)减轻高糖培养系膜细胞 (MC)肥大程度与周期素激酶抑制剂 P2 7的关系。方法 :Western印迹方法测定 MC裂解液 P2 7水平 ,[3H]胸腺嘧啶核苷 ([3H]Td R)及 [3H]亮氨酸 ([3H ]L eu)掺入方法测定 MC肥大情况。 结果 :同... 目的 :研究氨基胍 (AG)减轻高糖培养系膜细胞 (MC)肥大程度与周期素激酶抑制剂 P2 7的关系。方法 :Western印迹方法测定 MC裂解液 P2 7水平 ,[3H]胸腺嘧啶核苷 ([3H]Td R)及 [3H]亮氨酸 ([3H ]L eu)掺入方法测定 MC肥大情况。 结果 :同正常糖 (10 0 mg/ dl)培养相比 ,高糖 (45 0 mg/ dl)培养 MC中 P2 7水平增高 (P<0 .0 1) ,MC肥大 ;[3H ]L eu掺入增加及[3H]Td R掺入降低 (P<0 .0 1) ;AG(0 .2 5 mm ol/ L )降低高糖培养 MC中 P2 7水平 [(2 .5± 0 .6 ) vs (4.0± 0 .8) ,P<0 .0 5 ],使MC肥大程度减轻 ;[3H]leu掺入降低 ,[(342 6± 5 32 ) vs (46 5 2± 30 9) cpm/孔 ,P<0 .0 1],[3H ]Td R掺入增加 [(12 33± 6 9)vs (5 4 3± 2 7) cpm/孔 ,P<0 .0 1]。 结论 :AG可能通过降低高糖培养 MC中 P2 7水平减轻 展开更多

关键词 细胞周期蛋白类 周期素激酶抑制剂 糖尿病肾病 氨基胍 P27

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系膜增生性肾炎大鼠肾小球周期素激酶抑制剂P27的变化及意义

3

作者 梅小斌 崔若兰 +2 位作者 高从容 袁伟杰 叶志斌 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期61-63,共3页

目的 :探讨周期素激酶抑制剂 P2 7在系膜增生性肾炎模型 Thy1肾炎大鼠系膜细胞 (MC)增生中的作用。 方法 :利用抗胸腺细胞抗体制成 Thy1肾炎模型 ,Western印迹法测定肾小球裂解液 P2 7蛋白水平 ,RT- PCR方法测定肾小球 P2 7m RNA,EL IS... 目的 :探讨周期素激酶抑制剂 P2 7在系膜增生性肾炎模型 Thy1肾炎大鼠系膜细胞 (MC)增生中的作用。 方法 :利用抗胸腺细胞抗体制成 Thy1肾炎模型 ,Western印迹法测定肾小球裂解液 P2 7蛋白水平 ,RT- PCR方法测定肾小球 P2 7m RNA,EL ISA方法测定肾小球裂解液细胞外基质 (ECM)蛋白 (纤维连接蛋白及 型胶原 )。 结果 :Thy1肾炎第 1天 P2 7水平即有明显下降 ,第 3天 (MC增生最为明显 ) P2 7水平最低 ,第 5天 (MC增生开始消散 ) P2 7水平有所回升 ,提示 P2 7水平与MC增生程度有关 ;Thy1肾炎第 3天肾小球 P2 7m RNA与正常对照组比较无明显差别 ;而 Thy1肾炎大鼠肾小球纤维连接蛋白和 型胶原均升高 (P<0 .0 1) ,在第 3天达峰值 ,第 5天略有回降 ,但仍显著高于正常对照组 (P<0 .0 1)。结论 :P2 7水平下降可能在 Thy1肾炎 MC增生中起重要作用。 展开更多

关键词 细胞周期蛋白类 周期素激酶抑制剂 系膜增生性肾小球肾炎 P27 大鼠

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EGCG对高糖培养的系膜细胞增殖及周期素激酶抑制剂P27的作用 被引量：2

4

作者 李彩蓉 蔡飞 +1 位作者 杨晓 朱忠华 《茶叶科学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期307-310,共4页

目的:探讨表没食子儿茶素没食子酸脂(EGCG)对高糖培养的系膜细胞(GMCs)增殖及周期素激酶抑制剂p27蛋白表达的作用。方法:以大鼠肾系膜细胞为实验对象,将GMCs分成6组,分别刺激48h后,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)测定GMCs增殖情况,Westernblot... 目的:探讨表没食子儿茶素没食子酸脂(EGCG)对高糖培养的系膜细胞(GMCs)增殖及周期素激酶抑制剂p27蛋白表达的作用。方法:以大鼠肾系膜细胞为实验对象,将GMCs分成6组,分别刺激48h后,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)测定GMCs增殖情况,Westernblot法测定p27蛋白表达。结果:作用48h后,高糖明显诱导GMCs增殖并上调p27蛋白表达,不同浓度的EGCG能抑制高糖诱导的细胞增生,并抑制p27蛋白表达。结论:EGCG能抑制高糖诱导的GMCs增殖,并下调p27蛋白表达,提示EGCG可通过抑制p27表达而减少细胞外基质的积聚,延缓糖尿病肾小球肥大和肾小球硬化。 展开更多

关键词 EGCG 周期素激酶抑制剂 系膜细胞 糖尿病肾病

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过表达BMI-1对HeLa细胞中HOX基因表达和细胞周期的影响 被引量：2

5

作者 陈凤花 李一荣 +1 位作者 王琳 胡丽华 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期2366-2370,共5页

目的:将构建成功的真核表达载体pEGFP-BMI-1转染宫颈癌细胞系HeLa,检测其对同源盒(HOX)基因表达和细胞周期的影响。方法:采用脂质体转染法,将质粒pEGFP-BMI-1DNA瞬时转染HeLa细胞,确定融合蛋白B细胞特异性莫洛尼氏白血病毒插入位点1-加... 目的:将构建成功的真核表达载体pEGFP-BMI-1转染宫颈癌细胞系HeLa,检测其对同源盒(HOX)基因表达和细胞周期的影响。方法:采用脂质体转染法,将质粒pEGFP-BMI-1DNA瞬时转染HeLa细胞,确定融合蛋白B细胞特异性莫洛尼氏白血病毒插入位点1-加强型绿色荧光蛋白(BMI-1-EGFP)表达后,实时荧光定量RT-PCR方法检测转染前后HeLa细胞中周期素依赖性激酶抑制剂P16INK4a、人类端粒酶逆转录酶(hTERT)、同源盒A9(HOXA9)、同源盒B4(HOXB4)和同源盒C13(HOXC13)mRNA的表达变化,PI染色流式细胞仪检测细胞周期。结果:(1)在HeLa细胞中过表达BMI-1显著下调P16INK4a、HOXA9和HOXC13 mRNA的表达,分别平均降低为对照组的9.2%、10.9%和69.7%(P<0.01),而hTERT和HOXB4 mRNA的表达变化无显著差异(P>0.05)。(2)pEGFP-BMI-1转染HeLa细胞后,G1期细胞由65.68%减少至50.53%,S期细胞则由27.17%增加至39.59%(P<0.01)。结论:真核表达载体pEGFP-BMI-1转染HeLa细胞过表达外源性BMI-1,显著下调P16INK4a、HOXA9和HOXC13的表达,同时G1期细胞减少、S期细胞增加,这可能是BMI-1参与肿瘤发生发展的机制之一。 展开更多

关键词 B细胞特异性莫洛尼氏白血病毒插入位点1 周期素依赖性激酶抑制剂P16INK4a 同源盒A9 同源盒C13

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二苯乙烯苷对高糖诱导系膜细胞衰老相关信号的调节作用 被引量：6

6

作者 李彩蓉 蔡飞 +2 位作者 黎荣 赵辛元 杨颖乔 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期272-273,共2页

关键词 二苯乙烯苷 糖尿病 氧化应激 沉默信息调节因子2 叉头转录因子 周期素激酶抑制剂p27kip

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低蛋白饮食对糖尿病肾病大鼠肾脏肥大的影响及其机制探讨 被引量：1

7

作者 梅小斌 袁伟杰 +5 位作者 高从容 陈艳峰 陆军 李保春 于建平 崔若兰 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第8期884-886,共3页

目的 :探讨低蛋白饮食对糖尿病肾病大鼠肾脏肥大的影响及其与肾小球周期素激酶抑制剂 P2 7的关系。方法 :腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病 (DM)模型 ,分别予正常蛋白 (NPD组 ,n=6 )、低蛋白 (L PD组 ,n=6 )饮食 8周 ,同时对正常大鼠(正常... 目的 :探讨低蛋白饮食对糖尿病肾病大鼠肾脏肥大的影响及其与肾小球周期素激酶抑制剂 P2 7的关系。方法 :腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病 (DM)模型 ,分别予正常蛋白 (NPD组 ,n=6 )、低蛋白 (L PD组 ,n=6 )饮食 8周 ,同时对正常大鼠(正常对照组 ,n=6 )予正常蛋白饮食 8周。蛋白印迹方法测定肾小球裂解液 P2 7蛋白水平 ,EL ISA方法测定肾小球裂解液细胞外基质 (ECM)蛋白 ( 型胶原及纤维连接蛋白 )和尿白蛋白 ,氧化酶法测定血糖 ,溴甲酚绿法测定血白蛋白 ,采用图像分析系统测定肾小球面积。 结果 :与正常对照组相比 ,NPD组和 L PD组大鼠肾小球 P2 7水平及 ECM蛋白水平均增高 ,尿白蛋白排泄增多 ,肾质量 /体质量比例增高 ,肾小球面积增大。同 NPD组相比 ,L PD组大鼠肾小球 P2 7水平降低 [(11.1± 3.6 ) vs(19.6± 5 .1) ,P<0 .0 1],纤维连接蛋白水平 [(9.8± 2 .9) vs (17.1± 3.9) pg/m g,P<0 .0 1]及 型胶原水平 [(99.6± 2 3.5 ) vs(15 0 .6± 4 7.1) pg/mg,P<0 .0 1]下降 ,尿白蛋白排泄减少 [(18.13± 3.2 3) vs (4 0 .18± 3.79)μg/2 4 h,P<0 .0 1],大鼠肾质量 /体质量比例下降 [(12 .0 3± 1.85 ) vs (15 .6 2± 2 .13) ,P<0 .0 1],肾小球面积减少 [(72 1± 75 ) vs (815± 97)μm2 ,P<0 .0 1]。 展开更多

关键词 糖尿病肾病 大鼠 肾脏肥大 低蛋白饮食 影响 周期素激酶抑制剂 P27

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CyclinD1、p21^(WAF1)、p53及Ki-67在肝细胞癌中的表达及与预后的关系 被引量：17

8

作者 王玉兰 杜经丽 +3 位作者 石怀银 郭爱桃 韦立新 赵景民 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期20-24,共5页

目的探讨肝细胞癌(HCC)中cyclin D1、p21、p53及Ki-67蛋白的表达及其与HCC预后的关系。方法选择2000年1月-2005年1月在解放军总医院行手术切除的80例HCC患者的肝组织标本,采用EliVision法进行cyclin D1、p21WAF1、p53及Ki-67免疫组化染... 目的探讨肝细胞癌(HCC)中cyclin D1、p21、p53及Ki-67蛋白的表达及其与HCC预后的关系。方法选择2000年1月-2005年1月在解放军总医院行手术切除的80例HCC患者的肝组织标本,采用EliVision法进行cyclin D1、p21WAF1、p53及Ki-67免疫组化染色,分析其表达水平与HCC病理特征的关系,并进行生存分析。结果 Cyclin D1、p21WAF1、p53及Ki-67在HCC中的阳性表达率分别为38.8%、40.5%、65.4%及80.0%,均明显高于癌旁肝组织(分别为19.0%、11.5%、0.0%、6.3%,P<0.005)。相关分析显示,cyclin D1阳性表达与核分级呈正相关(P=0.041),p21WAF1及p53阳性表达与肿瘤分化程度(P=0.032、P=0.031)和血管浸润(P=0.036、P=0.011)呈正相关,Ki-67阳性表达与肿瘤分化程度(P=0.004)、核分级(P=0.045)和血管浸润(P=0.001)呈正相关。生存分析显示,cyclin D1及Ki-67高表达者预后较差。Ki-67阳性表达与p53(P=0.000)及p21WAF1(P=0.047)阳性表达有明显相关性,其他各蛋白之间表达无明显相关。Cox回归模型分析显示,肿瘤大小(P=0.042)、肿瘤数目(P=0.004)及血管浸润(P=0.000)为HCC的独立预后因素。结论 Cyclin D1、p21WAF1、p53及Ki-67可能参与了HCC的生物学进程;cyclin D1及Ki-67阳性表达对HCC预后的判断有一定价值。 展开更多

关键词 癌 肝细胞 细胞周期蛋白D1 周期素依赖激酶抑制剂p21 肿瘤抑制蛋白质P53 KI-67抗原

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水泡状胎块及相关异常妊娠孕早期胎盘组织的病理特点 被引量：4

9

作者 董颖 张爽 +4 位作者 王美玲 郭华 张莹 王颖 李挺 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期194-198,共5页

目的:分析水泡状胎块及相关异常妊娠早期妊娠阶段的胎盘组织学、免疫标记特点,结合荧光原位杂交法分析核型,以提高对该组疾病诊断与分类的认识。方法:收集水泡状胎块、可疑水泡状胎块及水肿性流产共32例(早期妊娠24例,中期妊娠8例),结... 目的:分析水泡状胎块及相关异常妊娠早期妊娠阶段的胎盘组织学、免疫标记特点,结合荧光原位杂交法分析核型,以提高对该组疾病诊断与分类的认识。方法:收集水泡状胎块、可疑水泡状胎块及水肿性流产共32例(早期妊娠24例,中期妊娠8例),结合免疫组织化学p57K IP2和CD31染色,其中2例分析核型,进行重新评估。32例重新评估后分为4组:完全性水泡状胎块17例,部分性水泡状胎块6例,绒毛形态异常4例和水肿性流产5例。结果:(1)17例完全性水泡胎块中12例为早期妊娠阶段,其中25%(3/12)的病例绒毛水肿和空化改变局限;100%存在滋养叶细胞增生,但75%(9/12)增生的滋养叶细胞异型性不显著。(2)p57K IP2阴性与妊娠早期完全性水泡状胎块组织形态改变(包括绒毛血管发育不良及间质细胞凋亡核碎)有显著相关性(Pearson相关系数:0.001,0.003,P<0.05)。(3)重新评估后诊断结果与原诊断对照发现部分性水泡状胎块和绒毛形态异常组漏诊和误诊率高于完全性水泡状胎块和水肿性流产组,但差异无统计学意义(部分性水泡状胎块30%,50%;绒毛形态异常75%,75%;完全性水泡状胎块15.4%,35.3%;水肿性流产20%,20%,P>0.05)。(4)荧光原位杂交技术可辅助于核型分析。结论:绒毛血管发育不良和间质细胞丰富的凋亡核碎是早期妊娠阶段完全性水泡状胎块的突出特点,p57K IP2阴性是妊娠早期完全性水泡状胎块诊断中的重要依据,部分性水泡状胎块和绒毛形态异常的形态改变常常重叠,在早期妊娠阶段难以区分,需要辅助诊断手段提高确诊率。 展开更多

关键词 妊娠初期 胎盘 水泡状胎块 周期素依赖激酶抑制剂p57

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COX-2、CDKN2A在慢性乙型肝炎、肝硬化肝组织中的表达及意义 被引量：2

10

作者 高保华 刘冰 +4 位作者 郑建云 吴方雄 汪雯 李雷 牛春燕 《临床肝胆病杂志》 CAS 2011年第3期273-276,共4页

目的了解慢性乙型肝炎(CHB)、肝硬化肝组织中COX-2、CDKN2A的表达及其与肝脏损伤程度的关系。方法经免疫学及肝穿刺病理学证实为CHB患者46例、乙型肝炎肝硬化17例;正常肝组织10例(来自肝脏良性肿瘤手术切除的标本)。应用病理学判断肝组... 目的了解慢性乙型肝炎(CHB)、肝硬化肝组织中COX-2、CDKN2A的表达及其与肝脏损伤程度的关系。方法经免疫学及肝穿刺病理学证实为CHB患者46例、乙型肝炎肝硬化17例;正常肝组织10例(来自肝脏良性肿瘤手术切除的标本)。应用病理学判断肝组织的炎症及纤维化程度。采用免疫组化方法、半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹分析法检测COX-2、CDKN2A在组织中的表达。结果 (1)CDKN2A mRNA第一、第二外显子在正常肝、CHB及肝硬化组织的表达水平及CDKN2A蛋白的半定量分析差异有统计学意义(F=28.75、24.86、26.43,P=0.036、0.041、0.038)。(2)正常肝、CHB及肝硬化组织中的COX-2、CDKN2A蛋白水平的表达差异有统计学意义(χ2=13.48、15.73,P=0.042、0.021);肝组织炎症不同级别的COX-2、CDKN2A蛋白水平的表达差异具有统计学意义(χ2=22.45、23.67,P=0.038、0.027);肝组织纤维化不同程度的COX-2、CDKN2A蛋白水平的表达差异具有统计学意义(χ2=24.16、22.53,P=0.024、0.037)。结论 COX-2、CDKN2A表达与CHB、肝硬化发生发展过程明显相关,COX-2、CDKN2A可作为反应HBV相关肝病进展程度的良好指标。 展开更多

关键词 环氧化酶2 周期素依赖激酶抑制剂p16 肝炎 乙型 慢性 肝硬化 基因表达

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敲减BMI-1表达诱导HeLa细胞G_1期阻滞 被引量：1

11

作者 陈凤花 李一荣 +1 位作者 王琳 胡丽华 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期134-139,共6页

B细胞特异性莫洛尼氏白血病毒插入位点1(B-cell specific moloney leukemia virus insertionsite1,BMI-1)在多种恶性肿瘤中高表达.为探索BMI-1在宫颈癌发生发展过程中的生物学作用,将构建成功并已鉴定为有效序列的短发夹状RNA(short hai... B细胞特异性莫洛尼氏白血病毒插入位点1(B-cell specific moloney leukemia virus insertionsite1,BMI-1)在多种恶性肿瘤中高表达.为探索BMI-1在宫颈癌发生发展过程中的生物学作用,将构建成功并已鉴定为有效序列的短发夹状RNA(short hairpin RNA,shRNA)真核表达载体BMI-1shRNA2和BMI-1shRNA4,转染人宫颈癌细胞系HeLa并筛选稳定转染细胞株,Western印迹检测BMI-1蛋白表达,实时荧光定量RT-PCR检测周期素依赖性激酶抑制剂p16INK4a(cyclin-dependentkinase inhibitor p16INK4a)、人类端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)、同源盒A9(homeoboxA9,HOXA9)、同源盒B4(homeoboxB4,HOXB4)和同源盒C13(homeoboxC13,HOXC13)基因mRNA的表达变化,PI染色流式细胞仪检测细胞周期变化.结果表明,在稳定转染BMI-1shRNA2、BMI-1shRNA4的HeLa细胞中,显著抑制BMI-1蛋白表达,上调p16INK4a、HOXA9和HOXC13三者mRNA表达,而hTERT和HOXB4两者mRNA的表达水平无明显改变,同时G1期细胞增加、S期细胞减少,提示敲减BMI-1表达诱导HeLa细胞G1期阻滞,BMI-1可能是宫颈癌基因治疗的靶分子. 展开更多

关键词 B细胞特异性莫洛尼氏白血病毒插入位点1(BMI-1) 短发夹状RNA(shRNA) 周期素依赖性激酶抑制剂p16INK4a 同源盒A9 同源盒C13

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Cip/Kip家族的独特成员——p57Kip2的研究进展 被引量：3

12

作者 张也频 章宗籍 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期574-580,共7页

p57Kip2属于细胞周期依赖激酶抑制因子(cyclin dependent kinases inhibitor,CDKI)Cip/Kip家族的成员之一,CKI能竞争性地与细胞周期蛋白依赖性激酶(cyclin dependent kinase,CDK)结合抑制其活性,从而调整细胞周期。与家族其它成员相比,p... p57Kip2属于细胞周期依赖激酶抑制因子(cyclin dependent kinases inhibitor,CDKI)Cip/Kip家族的成员之一,CKI能竞争性地与细胞周期蛋白依赖性激酶(cyclin dependent kinase,CDK)结合抑制其活性,从而调整细胞周期。与家族其它成员相比,p57Kip2在结构和功能有其特殊性。p57Kip2通过多种机制参与肿瘤的发生、侵袭和转移过程,Cip/Kip蛋白能在不同水平抑制Rho/ROCK/LIM/coffilin信号通路而参与肿瘤的形成、侵袭和转移,但在不同的细胞定位和调控下,p57Kip2在肿瘤的侵袭和转移中扮演双重角色。p57Kip2在细胞分化、凋亡上也具有重要作用,p57Kip2的表达异常使细胞不分化和过度增殖而形成肿瘤,p57Kip2在细胞凋亡中的作用也许可以作为肿瘤治疗的靶点。多功能的p57Kip2通过印记丢失、杂合性缺失、启动子甲基化、组蛋白去乙酰化和microRNA的调控等参与肿瘤形成的多个过程。本文就p57Kip2在以上几个方面的研究进展做一综述。 展开更多

关键词 周期素依赖激酶抑制剂 肿瘤 P57KIP2

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