GeneScan试剂盒法快速定量检测玉米中CaMV35S启动子

1

作者 朱飞宇 黄宇飞 +3 位作者 高梅莹 刘佳 刘丹 铁晓威 《现代农业科技》 2025年第14期121-124,130,共5页

针对玉米中转入的CaMV35S启动子,开展了一种新型试剂盒[GMO Quant(LR)35S Screen corn]荧光定量PCR检测方法试验,建立新的转基因玉米中含有CaMV35S启动子标记基因的定量检测方法。选用3个玉米品种先玉1321、裕丰303和先玉335进行了CaMV... 针对玉米中转入的CaMV35S启动子,开展了一种新型试剂盒[GMO Quant(LR)35S Screen corn]荧光定量PCR检测方法试验,建立新的转基因玉米中含有CaMV35S启动子标记基因的定量检测方法。选用3个玉米品种先玉1321、裕丰303和先玉335进行了CaMV35S启动子荧光定量PCR检测,标准偏差分别为0.15%、0.39%和0.61%,标准曲线相关系数均在0.98以上,扩增效率为90%~110%,试剂盒中配有1%MON863玉米基因组DNA(已知CaMV35S启动子含量在0.5%左右)作为对照材料,试验结果符合荧光定量PCR检测试验要求,确认此方法准确有效。此方法具有高度的特异性、高效性,是一种新型高效定量检测CaMV35S启动子的方法。 展开更多

关键词 荧光定量PCR camv35s启动子 转基因玉米 定量检测 Genescan试剂盒法

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花椰菜花叶病毒(CaMV)35S启动子在转基因棉花中的表达 被引量：17

2

作者 焦改丽 孟钊红 +7 位作者 聂安全 南芝润 张换样 李俊峰 王娇娟 赵俊侠 李燕娥 郭三堆 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第11期1135-1139,共5页

利用GUS作为报告基因 ,通过GUS组织化学定位法检测棉花转化愈伤组织、体细胞胚 ,R0 代棉花根、茎、叶、花器官以及正在发育的胚GUS基因表达情况 ,详细阐述了CaMV 3 5S启动子在棉花细胞中的表达轮廓。结果表明 ,在愈伤组织细胞有丝分裂... 利用GUS作为报告基因 ,通过GUS组织化学定位法检测棉花转化愈伤组织、体细胞胚 ,R0 代棉花根、茎、叶、花器官以及正在发育的胚GUS基因表达情况 ,详细阐述了CaMV 3 5S启动子在棉花细胞中的表达轮廓。结果表明 ,在愈伤组织细胞有丝分裂和增殖过程中GUS基因能稳定表达并遗传给后代细胞 ;在根、茎、叶细胞中检测到GUS表达活性。在胚胎发育过程中 ,最早检测到GUS表达活性的为开花 1 1d的鱼雷胚和胚乳。随着胚胎的发育 ,GUS表达活性逐渐增强并扩展到子叶微管组织 ,表明CaMV 3 5S启动子是随着胚胎发育进程被逐渐调节的。在花粉和特殊的纤维细胞中 ,也检测到GUS的表达活性。资料证明 ,该启动子在棉花不同发育时期的大部分组织和细胞中都是表达的。 展开更多

关键词 GUs基因 花椰菜花叶病毒(camv)35s启动子 转基因棉花 胚胎发育 表皮细胞

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转基因大豆外源基因CaMV35S启动子测定不确定度分析 被引量：5

3

作者 王东 宋君 +5 位作者 郭灵安 雷绍荣 刘文娟 常丽娟 尹全 张富丽 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2014年第1期40-45,共6页

为了了解转基因成分定量分析结果不确定度的主要贡献因素,提高转基因成分定量检测质量,本文对转基因大豆GTS40-3-2粉末样品进行了CaMV35S启动子(参数)含量测定,对其测量不确定度进行了初步估算。CaMV35S启动子测量不确定度评定结果:A类... 为了了解转基因成分定量分析结果不确定度的主要贡献因素,提高转基因成分定量检测质量,本文对转基因大豆GTS40-3-2粉末样品进行了CaMV35S启动子(参数)含量测定,对其测量不确定度进行了初步估算。CaMV35S启动子测量不确定度评定结果:A类不确定度(uA)为0.0004,B类不确定度(uB)为0.002,合成不确定度(uc)为0.002;在置信水准(p)95%时,包含因子(k)取1.96,扩展不确定度(U)为0.004。本次测量结果(C)为0.028±0.004,接近约定真值(0.03),测量不确定度相对较小,检测质量较高。不确定度评估表明试验中的微量液体转移偏差是本次测量不确定度的主要贡献者,在以后的检测中应重点注意降低微量液体转移的偏差,提高检测质量。 展开更多

关键词 转基因大豆 camv35s启动子含量 不确定度 评估

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CaMV35S启动子驱动的FT基因调控杨树早期开花的初步研究 被引量：4

4

作者 贾小明 张焕玲 《浙江农林大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期404-409,共6页

为了研究CaMV35S启动子驱动的FT基因对转基因杨树Populus早期开花的影响,利用Gateway技术构建了35S∷FT基因表达载体,并对杨树进行了遗传转化,从转基因杨树花的发育、花器官变异等方面初步探讨了35S∷FT促进杨树早期开花性能.结果表明：... 为了研究CaMV35S启动子驱动的FT基因对转基因杨树Populus早期开花的影响,利用Gateway技术构建了35S∷FT基因表达载体,并对杨树进行了遗传转化,从转基因杨树花的发育、花器官变异等方面初步探讨了35S∷FT促进杨树早期开花性能.结果表明：35S∷FT转基因杨树分生组织属性的改变及初始花结构的形成发生于试管培养阶段;花开始发育后如不及时把开花植株继代培养或转至土壤温室培养,初始花结构会凋谢枯萎,不能继续发育.转基因植株花器官的分化与发育发生于温室培养阶段的3～5周内,能够分化出典型的花器官,但发育不完全,具雌雄蕊、花盘结构,无成熟苞片结构,雄蕊不能成熟发育.35S∷FT诱导的花均为单朵花,而非野生型的柔荑花序;多数花属于单性花,但转基因雄性无性系中会出现两性花.转基因植株的开花率随着试管苗继代次数的增加而急剧下降,但两性花比例会上升. 展开更多

关键词 林木育种学 35s启动子 FT基因 杨树 早期开花

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CaMV35S启动子及其在转基因作物中的应用和检测 被引量：10

5

作者 汤婷 谢实龙 +3 位作者 祝旋 徐俊锋 唐俊 汪小福 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2019年第1期161-170,共10页

花椰菜花叶病毒35S启动子(CaMV35S)是植物基因工程中应用最广泛的启动子之一,它在转基因植物的安全评价及检测研究中具有重要意义。了解CaMV35S启动子的起源及其发展情况,是开展转基因安全评价和检测的前提。文章对CaMV35S启动子的发展... 花椰菜花叶病毒35S启动子(CaMV35S)是植物基因工程中应用最广泛的启动子之一,它在转基因植物的安全评价及检测研究中具有重要意义。了解CaMV35S启动子的起源及其发展情况,是开展转基因安全评价和检测的前提。文章对CaMV35S启动子的发展历史及其结构、功能作了简要描述,分析总结了CaMV35S启动子在转基因作物中的应用情况和目前对其相应的检测方法。针对目前在转基因作物中检测CaMV35S启动子存在的问题,认为今后转基因相关作物的序列信息及检测数据需要交流和共享,同时各个检测机构或实验室之间需要展开数据共享与共同验证,从而建立针对CaMV35S启动子的相对统一的标准检测方法。 展开更多

关键词 camv35s启动子 转基因作物 增强子 PCR

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CaMV 35S启动子在菊花中驱动GUS外源基因的表达分析 被引量：5

6

作者 阳淑金 宋爱萍 +6 位作者 何深颖 朱晓晨 孙静 高姣姣 王银杰 陈发棣 蒋甲福 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期554-559,共6页

[目的]由于CaMV 35S启动子转化菊花存在外源基因表达量低、基因沉默等问题,本研究对35S启动子、2×35S启动子在菊花中驱动GUS外源基因的表达进行了分析,以期为高效菊花转化提供理论指导。[方法]通过设计引物,利用PCR从p CAMBIA1301 ... [目的]由于CaMV 35S启动子转化菊花存在外源基因表达量低、基因沉默等问题,本研究对35S启动子、2×35S启动子在菊花中驱动GUS外源基因的表达进行了分析,以期为高效菊花转化提供理论指导。[方法]通过设计引物,利用PCR从p CAMBIA1301 Vector中克隆了35S启动子、2×35S启动子的序列并插入pORE R2载体中,分别获得了重组载体p ORE R2-35S:GUS和p ORE R2-2×35S:GUS,通过农杆菌介导法将构建的遗传转化载体分别导入切花菊品种‘神马’中。[结果]试验共转化2 296个菊花叶盘,经过筛选共得到16个过量表达的转基因株系。经PCR验证,目标片段已经成功插入转基因株系基因组。荧光定量PCR分析和染色分析显示,在转基因菊花中2×35S比35S启动子表现出驱动GUS基因高量表达的特性。[结论]在选择合适菊花品种的基础上,2×35S比35S启动子可以更加高效地促进基因表达。 展开更多

关键词 菊花 转基因 35s启动子 GUs表达

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转基因产品CaMV 35S启动子基因实时荧光PCR检测方法中引物探针序列特征及影响 被引量：2

7

作者 杨杰 李兰 +3 位作者 戴莉 张江国 莫善明 徐新龙 《安徽农业科学》 CAS 2019年第24期192-195,共4页

[目的]分析不同标准方法中CaMV 35S启动子基因筛查方法中引物探针位置关系,讨论以引物探针序列重组为阳性对照样品的可行性。[方法]收集国内标准方法中CaMV 35S启动子基因检测引物探针序列与CaMV参考序列比较,确定其引物探针位置特点。... [目的]分析不同标准方法中CaMV 35S启动子基因筛查方法中引物探针位置关系,讨论以引物探针序列重组为阳性对照样品的可行性。[方法]收集国内标准方法中CaMV 35S启动子基因检测引物探针序列与CaMV参考序列比较,确定其引物探针位置特点。设计不同长度间隔序列的串联引物探针重组序列,检测其结果差别。[结果]CaMV 35S启动子基因实时荧光PCR检测方法中引物与探针区间隔序列对扩增结果影响甚微。[结论]通过将引物探针序列顺序串联合成重组序列可以作为特定实时荧光PCR检测方法的阳性对照。 展开更多

关键词 转基因 camv 35s启动子 实时荧光PCR 阳性样品

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35S启动子甲基化引起棉花转基因沉默(英文) 被引量：15

8

作者 王海海 吴慎杰 +7 位作者 李飞飞 陈天子 蒋彦婕 琚铭 赵君 吕艳辉 张天真 郭旺珍 《棉花学报》 CSCD 北大核心 2008年第4期274-280,共7页

用带PBI121质粒的农杆菌LBA4404菌株转化泗棉3号胚性愈伤组织,获得的再生植株进一步对gus和nptⅡ基因进行PCR跟踪检测,共得到97株阳性转基因植株。GUS组织化学检测发现,97株转基因幼苗中有10株GUS检测阴性,嫁接后,只成活一株。利用来源... 用带PBI121质粒的农杆菌LBA4404菌株转化泗棉3号胚性愈伤组织,获得的再生植株进一步对gus和nptⅡ基因进行PCR跟踪检测,共得到97株阳性转基因植株。GUS组织化学检测发现,97株转基因幼苗中有10株GUS检测阴性,嫁接后,只成活一株。利用来源于同一愈伤系的GUS检测阳性植株作为对照,对这一GUS检测阴性的植株进行gus基因沉默机理研究。Southern分析表明,该GUS检测阴性植株与GUS检测阳性植株有相同拷贝数。GUS组织化学检测和RT-PCR分析显示,gus基因在GUS检测阴性植株中没有表达,而nptⅡ基因在这两株转基因棉花中都表达。用限制性内切酶-PCR法分析35S启动子区甲基化发现:GUS检测阴性植株35S启动子区TATA box的HapII/MspI酶切位点发生甲基化,而GUS检测阳性植株该位点没有甲基化。以上研究表明,这株gus沉默的转基因棉花可能是由于其35S启动子区甲基化引起的。 展开更多

关键词 甲基化 转基因沉默 转基因棉花 35s启动子

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含35S启动子的粟酒裂殖酵母表达载体的构建及功能鉴定 被引量：3

9

作者 王贺 王丕武 +1 位作者 洪洋 宋冰 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期191-196,共6页

利用PCR技术从植物表达载体pBI121上先后克隆出GUS基因和35S-GUS-NOS基因序列,分别构建粟酒裂殖酵母重组表达载体pESP-2-GUS和pESP-2-35S.GUS.NOS,并将它们转化到粟酒裂殖酵母菌体中。通过对不同液体培养基中两种转化子的不同启动子启动... 利用PCR技术从植物表达载体pBI121上先后克隆出GUS基因和35S-GUS-NOS基因序列,分别构建粟酒裂殖酵母重组表达载体pESP-2-GUS和pESP-2-35S.GUS.NOS,并将它们转化到粟酒裂殖酵母菌体中。通过对不同液体培养基中两种转化子的不同启动子启动GUS基因表达产物的GUS染色分析与比较,证明连入的35S启动子能够替代pESP-2自身受维生素B1浓度调控的启动子,从而降低了培养基的成本,为今后工业上利用粟酒裂殖酵母发酵生产产品,提高经济效益,奠定了基础。 展开更多

关键词 粟酒裂殖酵母 35s启动子 载体改造 GUs染色

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35S启动子组入蓝藻质粒载体pUC13－pbl

10

作者 楼士林 郭奕斌 吴巧娟 《厦门大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 1995年第6期1025-1027,共3页

３５Ｓ启动子组入蓝藻质粒载体ｐＵＣ１３－ｐｂｌ楼士林，郭奕斌，吴巧娟（生物学系）近年来构建了一些含３５Ｓ启动子的质粒载体￣［１］，但未见含３５Ｓ启动子的蓝藻质粒载体．因此本研究拟把ＣａＭＶ的３５Ｓ启动子组入由孙立春等... ３５Ｓ启动子组入蓝藻质粒载体ｐＵＣ１３－ｐｂｌ楼士林，郭奕斌，吴巧娟（生物学系）近年来构建了一些含３５Ｓ启动子的质粒载体￣［１］，但未见含３５Ｓ启动子的蓝藻质粒载体．因此本研究拟把ＣａＭＶ的３５Ｓ启动子组入由孙立春等人构建的蓝藻质粒载体ｐＵＣ１３－ｐ... 展开更多

关键词 蓝藻 质粒载体 35s启动子

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电化学DNA传感器制备及用于花椰菜花叶病毒35S启动子快速检测

11

作者 刘亚倩 刘克勤 +2 位作者 高娇娜 操小栋 叶永康 《安徽农业科学》 CAS 2018年第17期183-186,共4页

[目的]构建一种新型DNA电化学传感器,并用于花椰菜花叶病毒35S启动子片段检测。[方法]通过使用氨基化多壁碳纳米管对玻碳电极进行修饰,利用氨基化多壁碳纳米管对硫堇-金纳米粒子-DNA纳米复合物的吸附固定得到用于识别目标DNA的捕获界面... [目的]构建一种新型DNA电化学传感器,并用于花椰菜花叶病毒35S启动子片段检测。[方法]通过使用氨基化多壁碳纳米管对玻碳电极进行修饰,利用氨基化多壁碳纳米管对硫堇-金纳米粒子-DNA纳米复合物的吸附固定得到用于识别目标DNA的捕获界面,并将亲和素-辣根过氧化物酶修饰的金纳米粒子作为结构末端的信号分子,完成夹心结构传感器组装。试验采用循环伏安法对辣根过氧化物酶催化过氧化氢得到的还原电流进行测试。[结果]该传感器可实现对目标DNA定量检测,线性范围为1×10-18~1×10^(-11)mol/L,检测限低至6.95×10^(-20)mol/L,可特异性识别错配序列,并且表现出良好的重现性和稳定性。[结论]该传感器在转基因食品的检测方面有良好的应用前景。 展开更多

关键词 电化学DNA生物传感 花椰菜花叶病毒35s启动子 多壁碳纳米管 硫堇 辣根过氧化物酶

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不同启动子驱动下acdS基因转化烟草及耐盐性研究 被引量：3

12

作者 秦智慧 刘艳昆 +4 位作者 孙彦 康俊梅 王凭青 Margaret Gruber 白永琴 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期120-125,共6页

acdS基因编码产生ACC脱氨酶,该酶属于脱巯基家族,可以降低逆境乙烯的合成量。利用农杆菌介导的叶盘法将CaMV35S-2启动子和rolD启动子驱动下的acdS基因转入烟草NC89叶片中。在含有卡那霉素的MS培养基上筛选得到Kanr转化烟草。通过PCR、So... acdS基因编码产生ACC脱氨酶,该酶属于脱巯基家族,可以降低逆境乙烯的合成量。利用农杆菌介导的叶盘法将CaMV35S-2启动子和rolD启动子驱动下的acdS基因转入烟草NC89叶片中。在含有卡那霉素的MS培养基上筛选得到Kanr转化烟草。通过PCR、Southern blotting对得到的Kanr转基因烟草进行分析,结果表明,acdS基因已经整合到了烟草的基因组中。对转基因烟草的RT-PCR及cDNA进行测序分析表明,acdS基因能够正确转录。对转基因烟草进行耐盐性测定,结果显示,与对照相比,两种启动子驱动下的转基因烟草耐盐性均有增强。但是rolD启动子驱动下的转基因植株的耐盐性最强。 展开更多

关键词 转基因 acds基因 camv35s-2启动子 rolD启动子

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SV40启动子在烟草体内的驱动特性研究 被引量：1

13

作者 宝力德 邸娜 +2 位作者 于秀敏 刘福军 王瑞刚 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期90-94,99,共6页

根据SV40启动子序列设计引物,PCR扩增该启动子后,成功构建了具有SV40启动子和GUS报告基因的植物表达载体pLpPSG,并将重组质粒转化到烟草叶片中.通过SV40启动子驱动的GUS基因在烟草叶片内的瞬时性表达,研究了该启动子在植物基因表达中的... 根据SV40启动子序列设计引物,PCR扩增该启动子后,成功构建了具有SV40启动子和GUS报告基因的植物表达载体pLpPSG,并将重组质粒转化到烟草叶片中.通过SV40启动子驱动的GUS基因在烟草叶片内的瞬时性表达,研究了该启动子在植物基因表达中的驱动特性.结果表明:SV40启动子可启动GUS基因在烟草体内的表达,其提高基因表达水平达到2×35S启动子的(88.5±19.2)%. 展开更多

关键词 烟草 sV40启动子 GUs基因 瞬时表达 2×35s启动子

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基于碳量子点-银纳米簇荧光共振能量转移纳米探针的荧光传感器检测转基因成分CaMV35S 被引量：2

14

作者 翟应惠 王婷婷 +5 位作者 唐家璇 张鸿雁 操小栋 叶永康 郑海松 李云飞 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期550-558,共9页

利用荧光共振能量转移(FRET)纳米探针结合催化发夹组装(CHA)无酶扩增信号放大途径建立了一种可用于转基因成分的荧光检测方法。首先为CaMV35S目标序列(tDNA)设计了可诱导的CHA循环的两个发夹结构序列HP1和HP2。当单链DNA标记碳点(sDNA-C... 利用荧光共振能量转移(FRET)纳米探针结合催化发夹组装(CHA)无酶扩增信号放大途径建立了一种可用于转基因成分的荧光检测方法。首先为CaMV35S目标序列(tDNA)设计了可诱导的CHA循环的两个发夹结构序列HP1和HP2。当单链DNA标记碳点(sDNA-CDs)和DNA模板化银纳米团簇(Ts-AgNCs)杂交后,AgNCs和碳量子点(CDs)靠近,形成FRET效应,得到sDNA-CDs/Ts-AgNCs荧光猝灭的比率荧光探针。当tDNA存在时,通过杂交反应打开HP1发夹,形成HP1-tDNA双链结构;该结构可将HP2的发夹结构打开,从而形成HP1-HP2双链结构,同时释放出tDNA进入下一轮杂交,触发CHA循环。由于HP1-HP2中HP1的部分序列与Ts部分序列间的亲和性较sDNA强,因此,加入sDNA-CDs/Ts-AgNCs后,sDNA-CDs从探针中释放,使CDs(λem=464 nm)的荧光得以增强。而AgNCs仍在双链结构中,其荧光强度(λem=560 nm)基本保持不变。以IF464/IF560为检测信号,在最优条件下,该比率荧光传感器对CaMV35S检测的线性范围为0.1~50 nmol/L,检出限(LOD,S/N=3)为0.02 nmol/L。制备的传感器具有良好的选择性,将该传感器用于转基因番茄叶中CaMV35S成分的检测,结果可靠。 展开更多

关键词 催化发夹组装 碳量子点 银纳米簇 camv35s序列 比率荧光检测

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小鼠液胞H^+-ATPase 15 K启动子(M15 K)的克隆及其在植物体内的表达特性研究

15

作者 岳文冉 于秀敏 王瑞刚 《河南师范大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2014年第2期119-123,共5页

PCR克隆了小鼠液胞H+-ATPase 15K启动子,构建具有Kan抗性和GUS intron报告基因的植物表达载体LpPMG.通过M15K启动子指导的GUS intron基因在烟草叶片内的瞬时性表达,比较了其植物表达特性.结果表明:M15K启动子可启动GUS在植物体内的表达... PCR克隆了小鼠液胞H+-ATPase 15K启动子,构建具有Kan抗性和GUS intron报告基因的植物表达载体LpPMG.通过M15K启动子指导的GUS intron基因在烟草叶片内的瞬时性表达,比较了其植物表达特性.结果表明:M15K启动子可启动GUS在植物体内的表达.其表达活性相当于2×35S启动子的87.0%±17.3%. 展开更多

关键词 植物 M15 K启动子 GUs 瞬时表达 增强型35s启动子

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多重荧光PCR同时检测转基因成分35S和Nos方法的建立 被引量：33

16

作者 刘光明 李庆阁 +4 位作者 王群力 梁基选 陈伟铃 栾国彦 苏文金 《厦门大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期493-497,共5页

根据商品化转基因作物中常用的花椰菜花叶病毒启动子 (CaMV 35S)和根癌农杆菌终止子 (Nos)的序列特点 ,设计并合成了两对引物和相对应的荧光双链探针 ,建立一种应用荧光双链探针的多重荧光PCR同时检测转基因成分 35S启动子和Nos终止子... 根据商品化转基因作物中常用的花椰菜花叶病毒启动子 (CaMV 35S)和根癌农杆菌终止子 (Nos)的序列特点 ,设计并合成了两对引物和相对应的荧光双链探针 ,建立一种应用荧光双链探针的多重荧光PCR同时检测转基因成分 35S启动子和Nos终止子的方法 .并利用该方法对马铃薯、大豆、玉米、甜椒、番茄等 11份实物样品进行了检测 ,其中有 5份样品结果阳性 .结果表明所建立的多重荧光PCR方法能同时检测出 35S和Nos双组分 ,较常规PCR技术更为简便、快速、准确 ,有很好的应用前景 . 展开更多

关键词 多重荧光PCR 35s NOs 转基因作物 荧光双链探针 花椰菜花叶病毒启动子 极癌农杆菌终止子 检测方法

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CMV启动子克隆及其在植物体内的表达 被引量：1

17

作者 于秀敏 岳文冉 王瑞刚 《河北大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2014年第2期187-192,共6页

根据细胞肥大病毒CMV启动子基因序列设计引物,PCR扩增目的基因后,利用基因重组技术成功构建具有Kan抗性和GUS intron报告基因的植物表达载体LpPCG,并将重组质粒转化到烟草叶片中.通过CMV启动子指导的GUS intron基因在烟草叶片内的瞬时... 根据细胞肥大病毒CMV启动子基因序列设计引物,PCR扩增目的基因后,利用基因重组技术成功构建具有Kan抗性和GUS intron报告基因的植物表达载体LpPCG,并将重组质粒转化到烟草叶片中.通过CMV启动子指导的GUS intron基因在烟草叶片内的瞬时性表达,比较了其植物表达特性.结果表明:CMV启动子可启动GUS在植物体内的表达,其表达活性相当于2×35S启动子的(80.4±26.6)%. 展开更多

关键词 植物 CMV启动子 GUs 瞬时表达 增强型35s启动子

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2种启动子驱动下的VaCBF3基因植物表达载体构建 被引量：2

18

作者 冯连荣 王占斌 宋立志 《沈阳农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期559-564,共6页

为了探索山葡萄CBF3基因(VaCBF3)对杨树的遗传转化的影响,及组成型启动子和诱导型启动子对转基因植株生长的影响,分别构建由2种类型启动子调控的植物表达载体。根据GenBank上公布的rd29A基因序列设计特异性引物,利用PCR方法从拟南芥基因... 为了探索山葡萄CBF3基因(VaCBF3)对杨树的遗传转化的影响,及组成型启动子和诱导型启动子对转基因植株生长的影响,分别构建由2种类型启动子调控的植物表达载体。根据GenBank上公布的rd29A基因序列设计特异性引物,利用PCR方法从拟南芥基因组DNA中克隆rd29A基因启动子片段,利用限制性内切酶通过酶切、连接构建由组成型启动子35S和诱导型启动子rd29A基因启动子驱动的VaCBF3基因植物表达载体,利用冻融法完成重组质粒对根癌农杆菌LBA4404的转化。试验结果表明,所克隆的rd29A基因启动子片段序列分析表明该启动子片段长度为945bp,与GenBank中基因序列同源性达99%,具有DRE、ABRE、TATA box和CAAT box4个完整的顺式作用元件,具有启动子功能。经过酶切、连接成功地将目的基因与载体质粒连接,并将重组质粒导入至根癌农杆菌LBA4404中,为下一步利用农杆菌介导法对杨树的遗传转化及研究2种启动子的启动效率奠定了一定的基础。 展开更多

关键词 启动子 RD29A 35s VaCBF3基因 植物表达载体

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进口转基因抗Basta^(TM)除草剂油菜籽检测方法研究 被引量：23

19

作者 潘良文 沈禹飞 +2 位作者 陈家华 胡永强 陶军 《粮食与油脂》 2001年第5期36-37,共2页

建立了从油菜籽中提取总ＤＮＡ和用ＰＣＲ技术检测外源基因的方法，用该方法从进口油 菜籽中检出外源的草丁膦乙酰转移酶基因（ＰＡＴ）、新霉素磷酸转移酶基因（ＮｐｔＩＩ）、花椰 菜花叶病毒３５Ｓ启动子（ＣａＭＶ ３５Ｓ）。

关键词 油菜籽 草丁膦乙酰转移酶基因 新霉素磷酸转移酶基因 camv35s启动子 外源基因 检测方法 进口农产品

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大豆抗病相关基因SR1正反义植物表达载体的构建及遗传转化研究 被引量：3

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作者 林世锋 张淑珍 +3 位作者 杨秀红 陈庆山 杨庆凯 李文滨 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期90-94,共5页

实验构建了CaMV35S启动子控制下的大豆抗病相关基因SR1的正反义植物双元表达载体pBISR1(+)和pBISR1(-)。通过根癌农杆菌叶盘转化法,将正义和反义SR1 基因导入烟草Ha vana 425,经卡那霉素筛选,获得了抗性植株。经PCR和PCR-Southern印迹分... 实验构建了CaMV35S启动子控制下的大豆抗病相关基因SR1的正反义植物双元表达载体pBISR1(+)和pBISR1(-)。通过根癌农杆菌叶盘转化法,将正义和反义SR1 基因导入烟草Ha vana 425,经卡那霉素筛选,获得了抗性植株。经PCR和PCR-Southern印迹分析,证明抗性植株中整和了SR1基因,RT-PCR分析进一步表明正义和反义基因皆能转录为完整的mRNA,经疫霉根腐接种及抗病性鉴定表明,转反义基因株系和未转基因株系均轻微感病,而转正义基因株系始终没有出现感病症状。 展开更多

关键词 抗病相关基因 反义植物表达载体 遗传转化 构建 大豆 双元表达载体 35s启动子 抗性植株 反义基因 PCR分析 抗病性鉴定 camv 基因导入 卡那霉素 mRNA 正义基因 转化法 株系 转基因 感病 根癌 烟草 接种 根腐 疫霉

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