目的:比较不同长度的hTERT启动子以及Survivin启动子在肺癌A549细胞中的启动活性,为肺癌靶向性基因治疗提供依据。方法:用PCR法扩增1084 bp hTERT启动子、980 bp Survivin启动子和红色荧光蛋白基因;在真核表达质粒pGL3-hTERT基础上分别...目的:比较不同长度的hTERT启动子以及Survivin启动子在肺癌A549细胞中的启动活性,为肺癌靶向性基因治疗提供依据。方法:用PCR法扩增1084 bp hTERT启动子、980 bp Survivin启动子和红色荧光蛋白基因;在真核表达质粒pGL3-hTERT基础上分别构建3种启动子调控的、以红色荧光蛋白CDS为目的基因的真核表达质粒pGL-H-RED、pGL-LH-RED和pGL-S-RED。将重组质粒用脂质体分别转染A549和MRC-5细胞,72h后用Imagepro-Plus6.0分析3种启动子在相同时间内启动红色荧光蛋白的表达水平。结果:重组质粒在A549细胞中观察到了红色荧光,在MRC-5细胞中无红色荧光。pGL-S-RED质粒在A549细胞中表达最强,pGL-LH-RED次之,pGL-H-RED最弱,3种质粒在A549细胞中的荧光强度(IOD)分别为201.17、171.70和136.34。结论:所克隆的hTERT启动子和Survivin启动子均表现出肿瘤特异性,其中Survivin启动子在肺癌A549细胞中具有最好的启动效应,可望开发成为肺癌靶向性基因治疗工具。展开更多
目的研究重庆市汉族人群Klotho基因启动子区域G-395A单核苷酸多态性的分布，探讨该多态性住点与动脉硬化的相关性。方法232倒健康体检者均进行臂踝脉搏波传导速度测定，并记录动脉硬化的传统危险因素，根据测定结果分为动脉硬化组（130...目的研究重庆市汉族人群Klotho基因启动子区域G-395A单核苷酸多态性的分布，探讨该多态性住点与动脉硬化的相关性。方法232倒健康体检者均进行臂踝脉搏波传导速度测定，并记录动脉硬化的传统危险因素，根据测定结果分为动脉硬化组（130例）和对照组（102例）。应用TaqMan探针等位基因特异性杂交分析法对Klotho基因G-395A多态性位点进行分析。结果G-395A多态性住点共检测出GG、GA、AA3种基因型，频率分别为60．3％、34．1％和5．6％，符合Hardy-Weinberg平衡。动脉硬化组-395A等位基因的频率显著低于对照组（33．1％ VS 48.0％，P=0．022）。logistic回归分析，调整传统危险因素后-395A与动脉硬化呈负相关（P=0．042，OR=0．537，95％CI：0．295-0．977）。结论Klotho基因-395A等位基因可能是动脉硬化的遗传学保护因素。展开更多
目的探讨组织型纤溶酶原激活剂及纤溶酶原激活物抑制剂1血浆水平、基因多态性与肺动脉血栓栓塞(肺栓塞)的关系。方法选择肺栓塞患者87例(肺栓塞组),另选健康体检者80例(对照组),采用酶联免疫吸附法检测2组组织型纤溶酶原激活剂及纤溶酶...目的探讨组织型纤溶酶原激活剂及纤溶酶原激活物抑制剂1血浆水平、基因多态性与肺动脉血栓栓塞(肺栓塞)的关系。方法选择肺栓塞患者87例(肺栓塞组),另选健康体检者80例(对照组),采用酶联免疫吸附法检测2组组织型纤溶酶原激活剂及纤溶酶原激活物抑制剂1血浆水平。聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术检测纤溶酶原激活物抑制剂1基因多态性。结果肺栓塞组患者较对照组血浆组织型纤溶酶原激活剂明显下降、纤溶酶原激活物抑制剂1明显升高。肺栓塞组4G/4G基因型频率明显高于对照组(51.7% vs 25.0%,P<0.05)。肺栓塞组和对照组均以4G/4G基因型个体的纤溶酶原激活物抑制剂1血浆水平最高,5G/5G基因型最低,4G/5G基因型居中。结论肺栓塞患者存在纤溶异常,4G/4G基因型患者呈明显低纤溶状态。展开更多
文摘目的:比较不同长度的hTERT启动子以及Survivin启动子在肺癌A549细胞中的启动活性,为肺癌靶向性基因治疗提供依据。方法:用PCR法扩增1084 bp hTERT启动子、980 bp Survivin启动子和红色荧光蛋白基因;在真核表达质粒pGL3-hTERT基础上分别构建3种启动子调控的、以红色荧光蛋白CDS为目的基因的真核表达质粒pGL-H-RED、pGL-LH-RED和pGL-S-RED。将重组质粒用脂质体分别转染A549和MRC-5细胞,72h后用Imagepro-Plus6.0分析3种启动子在相同时间内启动红色荧光蛋白的表达水平。结果:重组质粒在A549细胞中观察到了红色荧光,在MRC-5细胞中无红色荧光。pGL-S-RED质粒在A549细胞中表达最强,pGL-LH-RED次之,pGL-H-RED最弱,3种质粒在A549细胞中的荧光强度(IOD)分别为201.17、171.70和136.34。结论:所克隆的hTERT启动子和Survivin启动子均表现出肿瘤特异性,其中Survivin启动子在肺癌A549细胞中具有最好的启动效应,可望开发成为肺癌靶向性基因治疗工具。
文摘目的研究重庆市汉族人群Klotho基因启动子区域G-395A单核苷酸多态性的分布，探讨该多态性住点与动脉硬化的相关性。方法232倒健康体检者均进行臂踝脉搏波传导速度测定，并记录动脉硬化的传统危险因素，根据测定结果分为动脉硬化组（130例）和对照组（102例）。应用TaqMan探针等位基因特异性杂交分析法对Klotho基因G-395A多态性位点进行分析。结果G-395A多态性住点共检测出GG、GA、AA3种基因型，频率分别为60．3％、34．1％和5．6％，符合Hardy-Weinberg平衡。动脉硬化组-395A等位基因的频率显著低于对照组（33．1％ VS 48.0％，P=0．022）。logistic回归分析，调整传统危险因素后-395A与动脉硬化呈负相关（P=0．042，OR=0．537，95％CI：0．295-0．977）。结论Klotho基因-395A等位基因可能是动脉硬化的遗传学保护因素。
文摘目的探讨组织型纤溶酶原激活剂及纤溶酶原激活物抑制剂1血浆水平、基因多态性与肺动脉血栓栓塞(肺栓塞)的关系。方法选择肺栓塞患者87例(肺栓塞组),另选健康体检者80例(对照组),采用酶联免疫吸附法检测2组组织型纤溶酶原激活剂及纤溶酶原激活物抑制剂1血浆水平。聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术检测纤溶酶原激活物抑制剂1基因多态性。结果肺栓塞组患者较对照组血浆组织型纤溶酶原激活剂明显下降、纤溶酶原激活物抑制剂1明显升高。肺栓塞组4G/4G基因型频率明显高于对照组(51.7% vs 25.0%,P<0.05)。肺栓塞组和对照组均以4G/4G基因型个体的纤溶酶原激活物抑制剂1血浆水平最高,5G/5G基因型最低,4G/5G基因型居中。结论肺栓塞患者存在纤溶异常,4G/4G基因型患者呈明显低纤溶状态。
