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表达含前S的乙肝病毒表面抗原重组CHO细胞株的建立和特性检测
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作者 刘新琼 颜华 王德彬 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期390-393,共4页
为建立表达含前S基因乙肝病毒表面抗原的细胞株,将笔者所在实验室构建的表达含前S基因乙肝病毒表面抗原(HBsAg)的真核表达质粒共转染CHO/dhfr-细胞,通过筛选,获得可表达含前S基因乙肝病毒表面抗原的重组CHO细胞,然后进行亚克隆,用氨甲喋... 为建立表达含前S基因乙肝病毒表面抗原的细胞株,将笔者所在实验室构建的表达含前S基因乙肝病毒表面抗原(HBsAg)的真核表达质粒共转染CHO/dhfr-细胞,通过筛选,获得可表达含前S基因乙肝病毒表面抗原的重组CHO细胞,然后进行亚克隆,用氨甲喋呤(MTX)加压选择,以ELISA法检测目的蛋白表达量,筛选获得稳定表达目的蛋白的细胞株,并对其进行特性鉴定。最终获得了C10和A10两株稳定高表达含前S基因乙肝病毒表面抗原的细胞株。 展开更多
关键词 中国仓鼠卵巢/dhfr-细胞 二氢叶酸还原酶 转染 G-418 氨甲喋呤 含前s乙肝病毒表面抗原
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人乙肝病毒前表面抗原PreS1在家蚕培养细胞中的表达
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作者 夏学春 陈健 张耀洲 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期103-106,共4页
人乙肝病毒前表面抗原PreS1诱导的免疫反应可以克服机体对乙肝病毒S蛋白的无反应状态。将人乙肝病毒adr前表面抗原preS1基因克隆到杆状病毒转移载体pBacPAK8中,获得重组转移载体pBacPAKpreS1。用此转移载体与线性化病毒BmBacPAK6线性化... 人乙肝病毒前表面抗原PreS1诱导的免疫反应可以克服机体对乙肝病毒S蛋白的无反应状态。将人乙肝病毒adr前表面抗原preS1基因克隆到杆状病毒转移载体pBacPAK8中,获得重组转移载体pBacPAKpreS1。用此转移载体与线性化病毒BmBacPAK6线性化基因组DNA共转染单层家蚕细胞(BmN),经细胞内同源重组和空白筛选,获得重组病毒。ELISA结果表明重组蛋白PreS1在家蚕培养细胞中的表达水平为02pg/个细胞,Western印迹证实此蛋白大小约为14kD。 展开更多
关键词 乙肝病毒 表面抗原Pres1 家蚕培养细胞 表达
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双重表达乙肝病毒前S_2抗原的重组质粒的疫苗效应
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作者 周陶友 赵连三 +3 位作者 陈敏 陈守春 刘丽 唐红 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期808-811,共4页
目的:乙肝病毒(HBV)的前S2抗原具有比S抗原更强的免疫原性,可以更有效地诱生特异性免疫应答。文中构建含有前S2抗原编码基因的3种重组质粒,观察接种后诱生特异性体液免疫应答的情况。方法:采用PCR技术扩增HBV的S2-S和S1-S2-S基因;同时... 目的:乙肝病毒(HBV)的前S2抗原具有比S抗原更强的免疫原性,可以更有效地诱生特异性免疫应答。文中构建含有前S2抗原编码基因的3种重组质粒,观察接种后诱生特异性体液免疫应答的情况。方法:采用PCR技术扩增HBV的S2-S和S1-S2-S基因;同时串联拼接产生S2-S-S2片段。继而构建重组表达质粒pcDNA3.1/S2S、pcDNA3.1/S1S2S和pcDNA3.1/S2SS2。后者意在表达S抗原的同时,双重表达前S2抗原。然后将上述3种质粒分别以100μg肌肉接种BALB/c小鼠,于2、4周后各加强1次。初次接种后3、5、8和12周,分别采血检测小鼠的前S2抗体和抗-HBs。结果:初次接种后3周,S2SS2组小鼠血清的前S2抗体检出率为12.5%,低于S1S2S组(25%)和S2S组(37.5%);但5周时则达到87.5%,并持续到12周,优于S1S2S组和S2S组;并且S2SS2组的前S2抗体滴度达到1∶2000,高于S2S组(1∶500)和S1S2S组(1∶50)。不过,S2SS2组同期的抗-HBs检出率和抗-HBs滴度则低于S1S2S组和S2S组。结论:重组质粒pcDNA3.1/S2S-S2以串联拼接方式双重表达前S2抗原,能够诱生较高水平的特异性前S2抗体,但其诱生抗HBs的能力却明显降低,这是在设计改造基因疫苗时需要考虑的一个重要问题。 展开更多
关键词 乙肝病毒 s2抗原 基因疫苗
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Pre-S_2抗原在乙肝病毒隐性感染中的地位与应用研究 被引量:2
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作者 王剑 盘晓娟 +7 位作者 林永富 吴德荣 吴阿阳 刘平娥 唐冬英 彭丽花 蒋光清 陈友元 《临床肝胆病杂志》 CAS 2005年第6期331-332,共2页
探讨Pre-S2抗原在乙型肝炎病毒的各类隐性感染中的地位及科研、临床应用价值。以乙肝病毒隐性感染者作为研究对象,采用ELISA法,同时检测感染者的Pre-S2抗原和“乙肝血清标志物(HBV M)”,然后进行各类感染者之间的比较、分析。在乙肝病... 探讨Pre-S2抗原在乙型肝炎病毒的各类隐性感染中的地位及科研、临床应用价值。以乙肝病毒隐性感染者作为研究对象,采用ELISA法,同时检测感染者的Pre-S2抗原和“乙肝血清标志物(HBV M)”,然后进行各类感染者之间的比较、分析。在乙肝病毒隐性感染者人群中,HBeAg阳性者、HBeAb阳性者的Pre-S2抗原阳性率分别为93.10%、60.00%;“乙肝大三阳”、“小三阳”者的Pre-S2抗原阳性率分别为92.31%、62.50%。Pre-S2抗原在判断乙肝病毒复制、隐性感染者血清的传染性强度方面,有很高使用价值和补缺作用;在判断隐性感染者的发展转化方面,亦有重大参考意义。 展开更多
关键词 s2抗原 乙肝病毒 隐性感染
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乙肝患者血清前S1抗原与HBV DNA的检测及其临床意义 被引量:14
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作者 檀玉芬 辛咏梅 +1 位作者 佟宣 陈洁 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期333-333,共1页
关键词 s1抗原 乙肝病毒DNA 病毒复制
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乙型肝炎病毒前S2基因变异与肝病进展关系的研究进展
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作者 姚佩君 张志波 高建鹏 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2014年第14期2191-2192,共2页
乙型肝炎病毒(hepatitis B virus, HBV)前 S2区全长165 bp,编码前S2蛋白的55个氨基酸。前S2和S基因共同编码中蛋白,前S1、前S2和S基因共同编码大蛋白。有前S/S基因变异的HBV感染者,HBV DNA复制与乙肝表面抗原(hepatitis B surfa... 乙型肝炎病毒(hepatitis B virus, HBV)前 S2区全长165 bp,编码前S2蛋白的55个氨基酸。前S2和S基因共同编码中蛋白,前S1、前S2和S基因共同编码大蛋白。有前S/S基因变异的HBV感染者,HBV DNA复制与乙肝表面抗原(hepatitis B surface antigen, HBsAg)分泌似乎是分离的[1],临床上检测前S2抗原可弥补因病毒变异和其他原因造成的乙肝病毒e抗原(hepatitis B e antigen, HBeAg)阴性的“误寻”,尤其在隐匿性HBV感染者中。 展开更多
关键词 乙肝病毒E抗原 乙型肝炎病毒 s2基因变异 s s基因变异 HBV感染者 s2蛋白 乙肝表面抗原 DNA复制
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HBV-pre-C区段变异患者血清前S_1抗原检测的临床价值分析 被引量:6
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作者 张悦 王惠萱 +1 位作者 陈忠明 吕耀 《实用医学杂志》 CAS 2004年第8期949-951,共3页
目的 :探讨HBV pre C区段 (nt1896)变异阳性患者血清HBV pre S1抗原检测的临床价值。方法 :选取病毒复制为阳性的乙肝血清 76份 ,其中 ,HBeAg( -)且HBV pre C区段 (nt1896)变异阳性的 46份 ;HBV pre C区段(nt1896)变异阴性的 3 0份 ;... 目的 :探讨HBV pre C区段 (nt1896)变异阳性患者血清HBV pre S1抗原检测的临床价值。方法 :选取病毒复制为阳性的乙肝血清 76份 ,其中 ,HBeAg( -)且HBV pre C区段 (nt1896)变异阳性的 46份 ;HBV pre C区段(nt1896)变异阴性的 3 0份 ;体检正常对照 3 0例。以ELISA法检测其血清乙肝病毒前S1抗原 (HBV pre S1) ,同时检测血清中谷氨酸氨基转移酶 (ALT)活性。结果 :HBV pre C区段 (nt1896)变异阳性血清中 82 6% ( 3 8/4 6)HBV pre S1检测为阳性 ,其中 92 1% ( 3 5 /3 8)伴血清ALT活性异常增高 ;HBV pre C区段 (nt1896)变异阴性的血清中 83 3 %( 2 5 /3 0 )HBV pre S1检测为阳性 ,92 0 % ( 2 3 /2 5 )伴血清ALT活性异常增高 ;正常对照组中HBV pre S1检测为阴性 ,血清ALT活性均正常。HBV pre C区段 (nt1896)变异阳性组与阴性组 ,HBV pre S1检出率差异无显著性 (P =2 13 87,P >0 0 5 ) ,HBV pre S1阳性血清中伴ALT异常增高率在两组间差异也无显著性 (P =3 42 11,P >0 0 5 )。结论 :当HBV发生基因变异时 ,HBeAg不能正常表达 ,血清中HBV pre S1抗原的检测可基本避免基因变异的干扰 。 展开更多
关键词 HBV-pre-C区段 基因变异 血清s1抗原 乙肝病毒s1抗原
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乙肝疫苗接种者和隐性HBV感染者血清中和效应的初步研究
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作者 何小敏 邢益平 +6 位作者 陈仁芳 林燕 韩亚萍 刘婷 刘雁雁 李军 黄祖瑚 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期835-838,851,共5页
目的:探讨乙肝疫苗接种者和隐性感染康复者血清体外阻断HBV感染作用的差异。方法:雅培ELISA定量测定乙肝疫苗接种应答者和隐性HBV感染康复者血清乙肝表面抗体,再调整到相同含量,分别和HBV预孵育1 h后感染Hep G2细胞,24 h后巢式PCR检测He... 目的:探讨乙肝疫苗接种者和隐性感染康复者血清体外阻断HBV感染作用的差异。方法:雅培ELISA定量测定乙肝疫苗接种应答者和隐性HBV感染康复者血清乙肝表面抗体,再调整到相同含量,分别和HBV预孵育1 h后感染Hep G2细胞,24 h后巢式PCR检测Hep G2细胞中HBV-DNA,评估其阻断效应。结果:同等浓度下,隐性感染康复者和乙肝疫苗接种者血清对野生株HBV感染阻断作用无差异,但乙肝疫苗接种者血清对变异株无阻断效应,隐性感染康复者对变异株仍有阻断作用,其作用明显弱于野生株。结论:隐性感染康复者血清对野生株和变异株HBV均有阻断作用,而乙肝疫苗接种者血清对变异株无阻断效应,提示新型乙肝疫苗应包含更多抗原成分如前S1/S2抗原,以对HBV变异株产生中和效应,应用多种成分的抗乙肝免疫球蛋白阻断肝移植后变异株HBV再感染十分重要。 展开更多
关键词 中和效应 HEP G2细胞 乙肝病毒表面抗原 s1/s2抗原 乙型肝炎病毒 “a”决定簇变异
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