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吗啡预处理对H9c2心肌细胞缺氧/复氧时microRNA表达的影响 被引量:10
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作者 韩正怡 何淑芳 +3 位作者 程洁 许士进 杨婉 张野 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期1552-1557,共6页
目的探讨吗啡预处理(morphine preconditioning,MPC)对H9c2心肌细胞缺氧/复氧(hypoxia reoxygenation,H/R)时microRNA(miRNA)表达的影响,为明确其机制提供参考。方法培养H9c2心肌细胞,随机分为3组(n=4):1正常对照组(CON):H9c2心肌细胞置... 目的探讨吗啡预处理(morphine preconditioning,MPC)对H9c2心肌细胞缺氧/复氧(hypoxia reoxygenation,H/R)时microRNA(miRNA)表达的影响,为明确其机制提供参考。方法培养H9c2心肌细胞,随机分为3组(n=4):1正常对照组(CON):H9c2心肌细胞置于DMEM/F12细胞培养液常规培养;2缺氧/复氧组(H/R):对心肌细胞行缺氧5h/复氧1h处理;3吗啡预处理组(MPC+H/R):在H/R前,应用1μmol·L^(-1)吗啡预处理10 min。处理结束后,采用CCK-8法检测细胞增殖、化学比色法检测细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活性、Annexin-V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡、Western blot法检测细胞内Fas蛋白表达、荧光定量RT-PCR法检测细胞miRNA表达水平。结果与CON组比,H/R组细胞活力降低,LDH活性升高,细胞凋亡率增加,Fas蛋白水平升高(P<0.01);MPC可明显提高细胞活力,降低LDH活性,抑制细胞凋亡,降低Fas蛋白水平(P<0.01)。qRT-PCR结果显示,与CON组相比,H/R组miR-133a-5p、miR-133b-5p、miR-664-1-5p、miR-6216和let-7e-5p表达明显下调,而MPC能明显地抑制H/R对这些miRNA表达的下调作用(P<0.01)。结论吗啡预处理减轻H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤可能与调控miR-133a-5p、miR-133b-5p、miR-664-1-5p、miR-6216和let7e-5p等miRNA表达有关。 展开更多
关键词 吗啡预处理 H9C2心肌细胞 缺氧/复氧 凋亡 FAS 微小RNA
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ERK信号蛋白在吗啡预处理减轻大鼠全心缺血/再灌注损伤中的作用 被引量:5
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作者 黄俊 杨婉 +4 位作者 金世云 产进中 刘中 张野 何淑芳 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期232-236,共5页
目的探讨细胞外信号调节激酶(extracellular signaling-regulated kinase,ERK)在吗啡预处理减轻大鼠全心缺血/再灌注损伤中的作用。方法健康成年♂SD大鼠,采用随机数字表法分为6组(n=10):对照组(control,CON)、缺血/再灌注组(ischemia/r... 目的探讨细胞外信号调节激酶(extracellular signaling-regulated kinase,ERK)在吗啡预处理减轻大鼠全心缺血/再灌注损伤中的作用。方法健康成年♂SD大鼠,采用随机数字表法分为6组(n=10):对照组(control,CON)、缺血/再灌注组(ischemia/reperfusion,I/R)、缺血预处理组(ischemia preconditioning,IPC)、吗啡1μmol·L^(-1)预处理组(morphine preconditioning,MPC)、MPC+ERK抑制剂PD98059组(MPD)、ERK抑制剂PD98059对照组(PD)。利用Langendorff灌流系统对各组大鼠离体心脏在进行相应处理后,化学比色法检测基线、再灌注5、10 min时冠脉流出液乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活性;同时利用充水球囊置入左心室持续监测左心室发展压(left ventricular developed pressure,LVDP)。2,3,5-氯化三苯基四氮唑(triphenyltetrazolium chloride,TTC)染色测量梗死区(infarct size,IS)、缺血危险区(area at risk,AAR)体积及IS/AAR比值;Western blot检测心肌组织ERK磷酸化水平。结果与I/R组比较,MPC组IS和IS/AAR减小,再灌注5、10 min时LDH活性降低,再灌注结束时LVDP升高,心肌组织磷酸化ERK(p-ERK)相对表达量增加;ERK抑制剂PD98059阻断MPC的保护作用,增加心肌梗死面积,升高再灌注5、10 min时LDH活性,降低再灌注末LVDP,此外,PD98059抑制MPC诱导的ERK磷酸化。结论吗啡预处理可能通过诱导ERK磷酸化水平升高而减轻大鼠全心缺血/再灌注损伤。 展开更多
关键词 细胞外信号调节激酶 吗啡预处理 阿片 受体 全心缺血/再灌注损伤 心肌保护
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吗啡预处理诱导的大鼠血清外泌体对H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤的影响 被引量:6
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作者 刘中 产进中 +4 位作者 潘永露 黄俊 杨婉 张野 何淑芳 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期1600-1605,共6页
目的探讨吗啡预处理(morphine preconditioning,MPC)诱导的大鼠血清外泌体对H9c2心肌细胞缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)损伤的影响。方法大鼠进行MPC或对照处理(CON)后,提取血清中的外泌体,标记为MPC-Exo、CON-Exo。利用透射电... 目的探讨吗啡预处理(morphine preconditioning,MPC)诱导的大鼠血清外泌体对H9c2心肌细胞缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)损伤的影响。方法大鼠进行MPC或对照处理(CON)后,提取血清中的外泌体,标记为MPC-Exo、CON-Exo。利用透射电镜和Western blot进行外泌体鉴定。H9c2心肌细胞随机分为Control组、H/R组、H/R+CON-Exo组和H/R+MPC-Exo组。除Control组细胞常规培养外,其余各组细胞均给予5 h缺氧和1 h复氧处理,H/R+CON-Exo组和H/R+MPC-Exo组细胞在H/R损伤前,分别与相应外泌体共孵育12 h。分别检测细胞活力、乳酸脱氢酶(lactic acid dehydrogenase, LDH)活性和细胞凋亡。结果外泌体提取物电镜下呈直径30~100 nm的圆形囊泡,并表达外泌体标志性蛋白。MPC-Exo与H9c2心肌细胞共孵育,可以明显减轻心肌细胞H/R损伤,增强细胞活力,减少LDH释放,并抑制心肌细胞凋亡;相反,CON-Exo与心肌细胞共孵育后,对H/R损伤无明显影响。结论 MPC诱导的大鼠血清外泌体可减轻H9c2心肌细胞H/R损伤,发挥心肌保护作用。 展开更多
关键词 吗啡预处理 外泌体 心肌细胞 缺氧/复氧损伤 心肌保护 凋亡
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脊髓神经元钾通道在鞘内吗啡预处理减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用 被引量:3
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作者 刘润宇 张野 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2018年第12期1852-1856,共5页
目的评价脊髓神经元钾通道在鞘内吗啡预处理减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用。方法将体质量250~350 g并且鞘内置管成功的70只健康成年雄性SD大鼠,随机分为7组(n=10):假手术组(Sham组)、心肌缺血再灌注组(IRI组)、IRI+非选择性钾通... 目的评价脊髓神经元钾通道在鞘内吗啡预处理减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用。方法将体质量250~350 g并且鞘内置管成功的70只健康成年雄性SD大鼠,随机分为7组(n=10):假手术组(Sham组)、心肌缺血再灌注组(IRI组)、IRI+非选择性钾通道开放剂尼可地尔组(NICO+IRI组)、鞘内吗啡预处理组(ITMP组)、ITMP+非选择性钾通道阻断剂格列苯脲组(ITMP+GLI组)、IRI+尼可地尔组的对照组(Sham+NICO组)、ITMP+格列苯脲组的对照组(IRI+GLI组)。建立SD大鼠心肌缺血再灌注模型,结扎冠状动脉左前降支,缺血30 min后,再恢复灌注120min。ITMP组在心肌缺血前40 min鞘内输注0. 9%Na Cl溶液10μl,缺血前30 min鞘内输注吗啡3μg/kg 10μl,持续5min,再停止5 min,循环3次。IRI+NICO组在缺血前40 min鞘内输注100μg NICO 10μl。ITMP+GLI组在吗啡预处理前10 min鞘内输注GLI。记录各组再灌注30 min内室性心律失常发生次数(包括PVCs、VT/VF)。再灌注结束后留取心肌标本,使用TTC染色,检测梗死区(IS)和缺血危险区(AAR)的体积,计算IS/AAR比值。结果 IRI组室性早搏及室速/室颤的发生次数和IS/AAR比值,较Sham组均增加(P <0. 05)。IRI+NICO组、ITMP组室性早搏及室速/室颤和发生次数和IS/AAR比值,较IRI组均减少(P <0. 05)。ITMP+GLI组室性早搏及室速/室颤的发生次数和IS/AAR比值,较ITMP组均增加(P <0. 05)。结论脊髓神经元钾通道开放能减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤;脊髓神经元钾通道参与了鞘内吗啡预处理减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤作用的过程。 展开更多
关键词 鞘内吗啡预处理 脊髓 钾通道 心肌缺血再灌注损伤
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