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同种异型抗原激活并套式PCR法克隆人颗粒溶素Mr 15000与Mr 9000活性片段
被引量:
1
1
作者
伊正君
朱道银
+2 位作者
杨春
何永林
刘晔华
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
2005年第6期777-780,共4页
目的:采用套式PCR克隆经同种异型抗原激活后的人细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表达的颗粒溶素(Granulysin, GLS)Mr 15000与Mr 9000活性片段的编码序列并进行序列测定与分析,为进一步表达纯化该活性片段和研究GLS的免疫杀伤机制奠定基础。办法...
目的:采用套式PCR克隆经同种异型抗原激活后的人细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表达的颗粒溶素(Granulysin, GLS)Mr 15000与Mr 9000活性片段的编码序列并进行序列测定与分析,为进一步表达纯化该活性片段和研究GLS的免疫杀伤机制奠定基础。办法:抽提经过培养并激活的健康人CTL淋巴细胞总RNA,经逆转录后以套式PCR方法扩增出GLS的Mr 15000 与Mr 9000活性片段的编码序列,插入pET32a(+)载体,转化大肠杆菌TOP10,阳性克隆经PCR及酶切鉴定后进行测序分析。结果:成功扩增出了包含GLSMr 15000与Mr9000活性片段完整编码序列的cDNA,与预期大小相同,PCR、酶切及测序鉴定证明得到了读码框正确的pET32a-Mr 15000与pET32a-Mr 9000重组子。序列分析表明GLS基因编码产物在第119 位存在氨基酸多态性。结论:人天然颗粒溶素Mr 15000与Mr 9000活性片段编码序列能够通过以上方法获得和克隆并用于后续研究。
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关键词
同种异型抗原
颗粒溶素
细胞毒性T淋巴细胞
套式PCR
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职称材料
T细胞识别同种异型移植抗原的研究进展
被引量:
6
2
作者
曾耀英
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第3期149-152,共4页
关键词
T细胞
同种
异型
移植
抗原
免疫应答
T细胞受体
TCR
移植物
基因编码
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职称材料
当归多糖及当归内酯对小鼠细胞免疫功能的影响
被引量:
47
3
作者
冯景奇
柳钟勋
+2 位作者
左增艳
李健蕊
张慧芳
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
1998年第4期279-282,共4页
利用混合淋巴细胞培养反应(MixedLymphocyteReaction,MLR)研究了传统中药当归(AngelicaSinensisDiels,ASD)来源的两种免疫调节剂当归多糖(ASDP)、当归内酯(ASDE3...
利用混合淋巴细胞培养反应(MixedLymphocyteReaction,MLR)研究了传统中药当归(AngelicaSinensisDiels,ASD)来源的两种免疫调节剂当归多糖(ASDP)、当归内酯(ASDE3)的免疫作用机理。结果表明:两者均能明显促进由同种异型抗原刺激的正常小鼠及S180荷瘤小鼠脾细胞增殖(P<0.01),其促进作用与剂量之间呈依赖关系。在一定浓度范围内(16~500μg/ml)对未经活化的脾细胞无诱导增殖作用。选择促进效应较大的药物剂量,培养96h,对活化的T淋巴细胞亚群的变化标记检测,结果显示:ASDP可明显增加L3T+4细胞比例,ASDE3可明显增加L3T+4和Lyt+2细胞的数量。在浓度为250μg/ml时,ASDE3增强细胞毒T细胞的功能,其杀伤活性增加80%。
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关键词
当归多糖
当归内酯
同种异型抗原
细胞免疫功能
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职称材料
供体特异性细胞免疫抑制的诱导
4
作者
叶建平
谢蜀生
+2 位作者
刘方
巩平
龙振洲
《北京医科大学学报》
CSCD
1991年第3期173-175,共3页
本实验通过门静脉注射C_(57)BL/6J小鼠脾细胞,在成年BALB/c小鼠体内诱导出供体特异的细胞免疫反应抑制,BALB/c小鼠对C_(57)BL/6J小鼠的迟发型过敏反应(DTH)和单向混合淋巴细胞反应(MLR)均受明显抑制,但对第三者的DTH和MLR反应均保持正...
本实验通过门静脉注射C_(57)BL/6J小鼠脾细胞,在成年BALB/c小鼠体内诱导出供体特异的细胞免疫反应抑制,BALB/c小鼠对C_(57)BL/6J小鼠的迟发型过敏反应(DTH)和单向混合淋巴细胞反应(MLR)均受明显抑制,但对第三者的DTH和MLR反应均保持正常。机制研究表明,这种供体特异的免疫抑制与抗原特异性抑制细胞的产生有关,该抑制细胞的作用受MHC限制。
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关键词
门静脉注射
同种异型抗原
免疫抑制
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职称材料
题名
同种异型抗原激活并套式PCR法克隆人颗粒溶素Mr 15000与Mr 9000活性片段
被引量:
1
1
作者
伊正君
朱道银
杨春
何永林
刘晔华
机构
重庆医科大学基础医学院微生物学与免疫学教研室
出处
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
2005年第6期777-780,共4页
基金
国家自然基金项目资助(30400375)。
文摘
目的:采用套式PCR克隆经同种异型抗原激活后的人细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表达的颗粒溶素(Granulysin, GLS)Mr 15000与Mr 9000活性片段的编码序列并进行序列测定与分析,为进一步表达纯化该活性片段和研究GLS的免疫杀伤机制奠定基础。办法:抽提经过培养并激活的健康人CTL淋巴细胞总RNA,经逆转录后以套式PCR方法扩增出GLS的Mr 15000 与Mr 9000活性片段的编码序列,插入pET32a(+)载体,转化大肠杆菌TOP10,阳性克隆经PCR及酶切鉴定后进行测序分析。结果:成功扩增出了包含GLSMr 15000与Mr9000活性片段完整编码序列的cDNA,与预期大小相同,PCR、酶切及测序鉴定证明得到了读码框正确的pET32a-Mr 15000与pET32a-Mr 9000重组子。序列分析表明GLS基因编码产物在第119 位存在氨基酸多态性。结论:人天然颗粒溶素Mr 15000与Mr 9000活性片段编码序列能够通过以上方法获得和克隆并用于后续研究。
关键词
同种异型抗原
颗粒溶素
细胞毒性T淋巴细胞
套式PCR
Keywords
Allogenic antigen
Granulysin
CTL
Nested - PC R
分类号
R378.91 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
T细胞识别同种异型移植抗原的研究进展
被引量:
6
2
作者
曾耀英
机构
暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第3期149-152,共4页
关键词
T细胞
同种
异型
移植
抗原
免疫应答
T细胞受体
TCR
移植物
基因编码
分类号
R392.4 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
当归多糖及当归内酯对小鼠细胞免疫功能的影响
被引量:
47
3
作者
冯景奇
柳钟勋
左增艳
李健蕊
张慧芳
机构
中国医学科学院中国协和医科大学医药生物技术研究所
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
1998年第4期279-282,共4页
文摘
利用混合淋巴细胞培养反应(MixedLymphocyteReaction,MLR)研究了传统中药当归(AngelicaSinensisDiels,ASD)来源的两种免疫调节剂当归多糖(ASDP)、当归内酯(ASDE3)的免疫作用机理。结果表明:两者均能明显促进由同种异型抗原刺激的正常小鼠及S180荷瘤小鼠脾细胞增殖(P<0.01),其促进作用与剂量之间呈依赖关系。在一定浓度范围内(16~500μg/ml)对未经活化的脾细胞无诱导增殖作用。选择促进效应较大的药物剂量,培养96h,对活化的T淋巴细胞亚群的变化标记检测,结果显示:ASDP可明显增加L3T+4细胞比例,ASDE3可明显增加L3T+4和Lyt+2细胞的数量。在浓度为250μg/ml时,ASDE3增强细胞毒T细胞的功能,其杀伤活性增加80%。
关键词
当归多糖
当归内酯
同种异型抗原
细胞免疫功能
Keywords
Dang Gui polysaccharide Dang Gui lactone AlloantigenMLR CTL T cell subpopulations
分类号
R285.5 [医药卫生—中药学]
R286.95 [医药卫生—中药学]
在线阅读
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职称材料
题名
供体特异性细胞免疫抑制的诱导
4
作者
叶建平
谢蜀生
刘方
巩平
龙振洲
机构
北京医科大学免疫学教研室
北京医科大学人民医院儿科
石河子医学院微生物教研室
出处
《北京医科大学学报》
CSCD
1991年第3期173-175,共3页
文摘
本实验通过门静脉注射C_(57)BL/6J小鼠脾细胞,在成年BALB/c小鼠体内诱导出供体特异的细胞免疫反应抑制,BALB/c小鼠对C_(57)BL/6J小鼠的迟发型过敏反应(DTH)和单向混合淋巴细胞反应(MLR)均受明显抑制,但对第三者的DTH和MLR反应均保持正常。机制研究表明,这种供体特异的免疫抑制与抗原特异性抑制细胞的产生有关,该抑制细胞的作用受MHC限制。
关键词
门静脉注射
同种异型抗原
免疫抑制
Keywords
Portal veinous injection
Alloantigen
Immunosuppression
分类号
R392.12 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
同种异型抗原激活并套式PCR法克隆人颗粒溶素Mr 15000与Mr 9000活性片段
伊正君
朱道银
杨春
何永林
刘晔华
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
2005
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
T细胞识别同种异型移植抗原的研究进展
曾耀英
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2004
6
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
当归多糖及当归内酯对小鼠细胞免疫功能的影响
冯景奇
柳钟勋
左增艳
李健蕊
张慧芳
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
1998
47
在线阅读
下载PDF
职称材料
4
供体特异性细胞免疫抑制的诱导
叶建平
谢蜀生
刘方
巩平
龙振洲
《北京医科大学学报》
CSCD
1991
0
在线阅读
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职称材料
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