目的观察经孕鼠尾静脉注射合体滋养细胞微粒(syncytiotrophoblast microparticles STBM)后,小鼠肾功能及肾脏病理改变。方法收集孕18 d C57小鼠的胎盘,制备小鼠合体滋养细胞微粒,利用电镜观察C57小鼠STBM的形态结构,BCA法测定C57小鼠STB...目的观察经孕鼠尾静脉注射合体滋养细胞微粒(syncytiotrophoblast microparticles STBM)后,小鼠肾功能及肾脏病理改变。方法收集孕18 d C57小鼠的胎盘,制备小鼠合体滋养细胞微粒,利用电镜观察C57小鼠STBM的形态结构,BCA法测定C57小鼠STBM的蛋白水平;将C57孕鼠分为STBM组、对照组和PBS组,STBM组:自C57小鼠孕8 d起,每天以蛋白浓度为0.15 mg/m L的STBM(0.2 m L)经鼠尾静脉回输至小鼠体内,至孕18 d时收集小鼠24 h尿液测定尿微量蛋白(M-TP)、尿肌酐(U-Crea)、尿蛋白肌酐比(M-TP/Cr)、尿酸(U-Uric)、24 h尿蛋白(24 h U-TP),采集全血测定血清尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)、胱抑素C(Cys-C),取肾脏标本切片后行HE染色观察肾组织结构变化;对照组:正常孕18 d小鼠收集尿液、采集全血、取肾脏进行检测;PBS组:自孕8 d起每天经鼠尾静脉注射PBS 0.2 m L,余处理同STBM组。结果 STBM组孕鼠尿液M-TP、M-TP/Cr、24 h U-TP明显高于对照组和PBS组(P<0.01),与对照组比较,PBS组U-Uric未见明显变化(P>0.05),而STBM组U-Uric显著降低(P<0.01);STBM组血清BUN、Scr、Cys-C含量显著升高(P<0.01);STBM组肾脏HE染色可见肾小球内皮细胞增生、肿胀、变形,肾小管云雾状变性。结论类子痫前期模型鼠有肾损伤,STBM可能在子痫前期肾损害中起重要作用。展开更多
文摘目的观察经孕鼠尾静脉注射合体滋养细胞微粒(syncytiotrophoblast microparticles STBM)后,小鼠肾功能及肾脏病理改变。方法收集孕18 d C57小鼠的胎盘,制备小鼠合体滋养细胞微粒,利用电镜观察C57小鼠STBM的形态结构,BCA法测定C57小鼠STBM的蛋白水平;将C57孕鼠分为STBM组、对照组和PBS组,STBM组:自C57小鼠孕8 d起,每天以蛋白浓度为0.15 mg/m L的STBM(0.2 m L)经鼠尾静脉回输至小鼠体内,至孕18 d时收集小鼠24 h尿液测定尿微量蛋白(M-TP)、尿肌酐(U-Crea)、尿蛋白肌酐比(M-TP/Cr)、尿酸(U-Uric)、24 h尿蛋白(24 h U-TP),采集全血测定血清尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)、胱抑素C(Cys-C),取肾脏标本切片后行HE染色观察肾组织结构变化;对照组:正常孕18 d小鼠收集尿液、采集全血、取肾脏进行检测;PBS组:自孕8 d起每天经鼠尾静脉注射PBS 0.2 m L,余处理同STBM组。结果 STBM组孕鼠尿液M-TP、M-TP/Cr、24 h U-TP明显高于对照组和PBS组(P<0.01),与对照组比较,PBS组U-Uric未见明显变化(P>0.05),而STBM组U-Uric显著降低(P<0.01);STBM组血清BUN、Scr、Cys-C含量显著升高(P<0.01);STBM组肾脏HE染色可见肾小球内皮细胞增生、肿胀、变形,肾小管云雾状变性。结论类子痫前期模型鼠有肾损伤,STBM可能在子痫前期肾损害中起重要作用。
文摘目的:观察妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)孕妇胎盘滋养细胞超微结构,探讨铁死亡在GDM发生发展中的作用。方法:选取2020年9月—2022年12月在常州妇幼保健院分娩的孕妇,孕24~28周行口服葡萄糖耐量试验。以确诊GDM的孕产妇为研究对象,分为通过饮食治疗控制血糖满意组(G1组)、口服二甲双胍控制血糖组(G2组)、胰岛素控制血糖组(G3组)、血糖控制不满意但拒用药组(G4组)各30例,正常健康孕妇为对照组(N组)。通过透射电镜观察各组胎盘滋养细胞超微结构;普鲁士蓝染色检查胎盘铁沉积情况;免疫组化检测胎盘长链脂酰辅酶A合成酶4(acyl-CoA synthetase long chain family member 4,ACSL4)、谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)在合体滋养细胞层的定位和表达;Western blot和q RT-PCR分别检测胎盘ACSL4、GPX4蛋白和mRNA转录水平。结果:透射电镜下G1、G2、G3、G4组GDM产妇胎盘均可见不同程度的线粒体形态学改变,其中G1、G2、G3组线粒体改变较轻,G4组见典型的铁死亡萎缩线粒体。普鲁士蓝染色显示5组胎盘均见含铁颗粒,G1、G2、G3、G4组胎盘中含铁颗粒较N组明显增多,G1、G2、G3组胎盘中的含铁颗粒较G4组明显减少。Western blot结果显示,与N组相比,G1、G2、G3、G4组产妇胎盘中ACSL4蛋白表达增加而GPX4蛋白表达下降,qRT-PCR结果显示各组间ACSL4、GPX4的mRNA转录水平无显著性差异。结论:GDM孕妇胎盘滋养细胞中存在铁死亡,且与病情严重程度和用药相关。GDM孕妇胎盘中ACSL4、GPX4表达异常,二甲双胍和胰岛素有改善胎盘滋养细胞铁死亡的作用。
