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共刺激分子CD28单克隆抗体制备的新策略
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作者 车小燕 林来兴妹 +2 位作者 陈伟平 聂飚 邱庆林 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2001年第6期411-413,共3页
目的发展一种制备抗人CD28单克隆抗体的新方法。方法构建编码人CD28基因的逆转录病毒表达系统,感染 BALB/c小鼠骨髓瘤细胞NS-l,使其细胞膜表达CD28抗原并用于免疫小鼠,制备单克隆抗体。结果获得分泌抗人 CD... 目的发展一种制备抗人CD28单克隆抗体的新方法。方法构建编码人CD28基因的逆转录病毒表达系统,感染 BALB/c小鼠骨髓瘤细胞NS-l,使其细胞膜表达CD28抗原并用于免疫小鼠,制备单克隆抗体。结果获得分泌抗人 CD28单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为E66-3S,IgG亚类鉴定为IgG1。该株单抗能够特异性识别CD28阳性的T细 胞,并完全阻断标准CD28抗体与细胞表面CD28抗原结合。在亚剂量分裂原的共刺激下,具有促进T淋巴细胞活化和 增殖作用。结论E66-3S具有高度特异性和共刺激活性,为临床免疫治疗奠定了基础,同时,也为进一步制备其它膜抗 原的单克隆抗体提供了一种新途径. 展开更多
关键词 抗原 CD28 单克隆抗体 多发性骨髓瘤 逆转录病毒体 刺激分子
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诱导性共刺激分子靶点用于小鼠佐剂诱导型关节炎模型的可行性
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作者 汪嘉晨 邵帅铭 +2 位作者 荆承玮 陈枫涛 闫峰 《中国医学影像技术》 CSCD 北大核心 2024年第7期986-991,共6页
目的观察诱导性共刺激分子(ICOS)靶点用于小鼠佐剂诱导型关节炎(AIA)模型的可行性。方法选取20只BALB/c小鼠,于右后爪分别注射等剂量完全弗氏佐剂(AIA组,n=10)或磷酸盐缓冲液(对照组,n=10),之后经尾静脉分别注射ICOS-IRD680 mAb探针(AIA... 目的观察诱导性共刺激分子(ICOS)靶点用于小鼠佐剂诱导型关节炎(AIA)模型的可行性。方法选取20只BALB/c小鼠,于右后爪分别注射等剂量完全弗氏佐剂(AIA组,n=10)或磷酸盐缓冲液(对照组,n=10),之后经尾静脉分别注射ICOS-IRD680 mAb探针(AIA组)或IgG-IRD680 mAb探针对照组,比较24及48 h后2组近红外荧光成像右爪与左爪荧光强度比值;提取小鼠总RNA行转录组测序,筛选并分析差异表达基因。针对对照组提取脾脏原代T细胞并分选磁珠阴性T细胞,以佛波酯/离子霉素刺激、诱导活化T细胞形成,检测其表面ICOS蛋白表达水平,并进行安全性评价。结果相比对照组,AIA组ICOS基因表达显著上调、T细胞占比增高,FoxP3+调节性T细胞、CD8+T细胞及CD4+T细胞中ICOS分布较多。对照组分选磁珠阴性T细胞前、后CD3+T细胞纯度分别为65.31%和90.14%;其中,ICOS蛋白阳性小鼠CD4+T细胞在活化前、后占比分别为7.14%及31.20%,且活化CD4+T细胞ICOS蛋白平均荧光强度(586±25)显著高于未活化者(161±31)(t=25.390,P<0.001)。注射探针后24及48 h,AIA组右爪/左爪荧光强度比值均高于对照组(t=34.600、P<0.001;t=23.380、P<0.001)。相比对照组,AIA组小鼠心、肝、肾组织未见明显病理改变,且组间血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶及肌酐无明显差异(P均>0.05)。结论ICOS靶点用于小鼠AIA模型安全、可行。 展开更多
关键词 关节炎 类风湿 光学成像 诱导刺激分子
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T细胞可诱导共刺激分子配体胞外段基因的克隆与表达 被引量:1
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作者 汲翔 郭勋 +2 位作者 范丹丹 康巧珍 袁维堂 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2020年第2期233-236,共4页
目的:克隆T细胞可诱导共刺激分子配体胞外段(ICOSL-N)基因,构建pET22b-ICOSL-N-Ig原核表达载体,实现ICOSL-N与IgG4体外融合表达。方法:设计并合成T细胞ICOSL-N和IgG4基因特异性引物,RT-PCR法从小鼠脾脏中克隆出ICOSL-N,PCR重叠延伸技术... 目的:克隆T细胞可诱导共刺激分子配体胞外段(ICOSL-N)基因,构建pET22b-ICOSL-N-Ig原核表达载体,实现ICOSL-N与IgG4体外融合表达。方法:设计并合成T细胞ICOSL-N和IgG4基因特异性引物,RT-PCR法从小鼠脾脏中克隆出ICOSL-N,PCR重叠延伸技术将ICOSL-N与IgG4基因融合,构建原核表达载体pET22b-ICOSL-N-Ig,转化E.coli BL21(DE3)工程菌,筛选鉴定阳性克隆,IPTG诱导阳性重组子,SDS-PAGE法鉴定融合蛋白ICOSL-N-Ig的表达。结果:融合基因ICOSL-N-Ig的PCR扩增产物大小约1425 bp,符合理论值;原核表达载体pET22b-ICOSL-N-Ig经酶切、PCR和测序鉴定结果符合预期;在诱导后的菌体中检测出大小为53800的蛋白诱导条带,且与目标蛋白的大小一致。结论:成功克隆ICOSL-N基因,实现ICOSL-N在E.coli BL21(DE3)工程菌中与IgG4的融合表达。 展开更多
关键词 T细胞可诱导刺激分子 可诱导刺激分子配体
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鼠抗人CD28分子单克隆抗体的研制及生物学特性研究 被引量:22
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作者 邱玉华 张学光 +2 位作者 季玉红 居颂光 王廷 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期368-370,共3页
目的制备鼠抗人CD28分子的单克隆抗体(mAb),研究其在T细胞的活化、增殖及信号传导中的作用。方法以小鼠淋巴瘤细胞转染人CD28基因的细胞株(CD28-T)为免疫原,采用B淋巴细胞杂交瘤技术,获取分泌特异性mAb的杂交瘤细胞株。以体内诱生法... 目的制备鼠抗人CD28分子的单克隆抗体(mAb),研究其在T细胞的活化、增殖及信号传导中的作用。方法以小鼠淋巴瘤细胞转染人CD28基因的细胞株(CD28-T)为免疫原,采用B淋巴细胞杂交瘤技术,获取分泌特异性mAb的杂交瘤细胞株。以体内诱生法生产腹水,并以免疫亲和层析法对其纯化。以快速定性试纸法鉴定mAb的Ig亚类,竞争抑制法分析mAb识别的抗原表位,3H-TdR掺入法研究mAb对T细胞的刺激效应。结果成功地获得了5株分泌特异性抗人CD28 mAb的杂交瘤细胞株,鉴定的1株(克隆18G8)属IgG2a,腹水效价(流式细胞仪分析)达1:2 400以上。该mAb能60%阻断标准鼠抗人CD28抗体与相应抗原的结合,提示其识别的抗原表位与标准mAb不完全相同。mAb 18G8可取代B7-1分子介导的协同刺激信号,促进人外周血T细胞增殖(SI=7)。结论18G8是1株功能性mAb,具有重要的研究和应用价值。 展开更多
关键词 CD28分子 协同刺激信号 杂交瘤 单克隆抗体 增殖效应
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鼠抗人B7-1分子功能性单克隆抗体的制备及生物学特性 被引量:27
5
作者 邱玉华 季玉红 +4 位作者 郭玲 周照华 王月丹 傅晋翔 张学光 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第11期589-593,共5页
目的 :制备鼠抗人B7 1分子的功能性单克隆抗体 ,研究其对高表达相应配基分子细胞的生物学效应。方法 :用两株转人B7 1基因细胞株XG7 B7和L B7分别作为免疫原及检测细胞株 ,利用B淋巴细胞杂交瘤技术制备单克隆抗体。以快速定性试纸分析... 目的 :制备鼠抗人B7 1分子的功能性单克隆抗体 ,研究其对高表达相应配基分子细胞的生物学效应。方法 :用两株转人B7 1基因细胞株XG7 B7和L B7分别作为免疫原及检测细胞株 ,利用B淋巴细胞杂交瘤技术制备单克隆抗体。以快速定性试纸分析法鉴定单抗所属的小鼠IgG亚类 ,采用竞争抑制及间接免疫荧光法分析单抗的特异性和亲和力 ,以高表达B7 1分子的恶性淋巴瘤细胞Raji和Daudi为靶细胞 ,分析单抗对其生长的影响。以人多发性骨髓瘤细胞转入B7 1基因细胞株XG1 B7为刺激细胞 ,以人外周血单个核细胞 (PBLs)为反应细胞 ,用MTT法分析单抗的中和活性。结果 :成功地获得了 1株鼠抗人B7 1的功能性单克隆抗体 (克隆 4E5 ) ,属于小鼠IgG1亚类 ,经流式细胞仪分析 ,4E5与PBLs、体外人工诱导的树突状细胞(DCs)、Raji和Daudi的阳性结合率分别为 10 2 %、95 1%、92 7%及 89 2 % ;能完全阻断标准抗人B7 1单抗与相应抗原的结合。同时还发现 ,单抗 4E5能显著地抑制恶性淋巴瘤细胞Raji和Daudi的生长繁殖 ,并能阻断B7分子介导的协同刺激信号的传导。结论 :单克隆抗体 4E5是一株抗人B7 1分子的功能性单抗 ,具有重要的研究和应用价值。 展开更多
关键词 B7-1 协同刺激分子 单克隆抗体 恶性淋巴瘤
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特发性血小板减少性紫癜患者外周血共刺激分子的表达及与血小板抗体关系的临床研究 被引量:8
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作者 马肖容 陈银霞 +4 位作者 张王刚 田玮 刘捷 曹星梅 何爱丽 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2009年第2期483-486,共4页
本研究检测特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者外周血共刺激分子CD80、CD86和CD137的表达及血清血小板抗体(PAIgG)含量并探讨二者相关性及与血小板数量等疾病表现的关系,以期阐明共刺激分子在特发性血小板减少性紫癜发病及病情判断中的作... 本研究检测特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者外周血共刺激分子CD80、CD86和CD137的表达及血清血小板抗体(PAIgG)含量并探讨二者相关性及与血小板数量等疾病表现的关系,以期阐明共刺激分子在特发性血小板减少性紫癜发病及病情判断中的作用。分别应用免疫荧光法和流式细胞术检测48例ITP患者及40名正常人外周血单个核细胞(PBMNC)表面共刺激分子CD80、CD86和CD137的表达;应用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清PAIgG含量。结果表明:ITP患者CD80、CD86和CD137的表达水平分别为(4.92±2.02)%,(8.68±4.25)%,(5.32±2.67)%,PAIgG平均含量为210±3.02ng/107PA,均明显高于正常对照组(2.01±0.75)%,(4.56±2.06)%,(1.37±1.25)%和20±1.13ng/107PA(p<0.01)。共刺激分子表达水平与PAIgG含量呈正相关(r=0.302,p<0.05),与患者血小板数量呈负相关(r=-0.369,p<0.05)。结论:共刺激分子CD80、CD86和CD137是参与ITP发病和免疫反应的重要共刺激分子,其过度表达与ITP发病及临床病情密切相关。纠正其异常表达、调节免疫状态可能是ITP的治疗策略之一,具有重要的临床研究意义。 展开更多
关键词 特发性血小板减少性紫癜 外周血 刺激分子 血小板抗体
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携带可诱导共刺激分子基因的重组腺病毒载体构建及其在小鼠间充质干细胞中的表达 被引量:4
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作者 王利平 包晓辰 +4 位作者 魏玮 陈洁 邵宇 王健民 钱其军 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2012年第9期909-914,共6页
目的阻断可诱导共刺激途径协同骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)可能能增强急性移植物抗宿主病(acute graft versus host disease,aGVHD)的防治作用。文中旨在构建携带小鼠可诱导共刺激分子(inducible costimula-tor,ICOS... 目的阻断可诱导共刺激途径协同骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)可能能增强急性移植物抗宿主病(acute graft versus host disease,aGVHD)的防治作用。文中旨在构建携带小鼠可诱导共刺激分子(inducible costimula-tor,ICOS)基因的重组腺病毒载体,转染小鼠骨髓MSCs,为转基因治疗提供实验基础。方法设计含有EcoRⅠ、SalⅠ酶切位点的引物,PCR扩增ICOS,将扩增产物克隆到穿梭质粒PDC318上,筛选阳性克隆,测序鉴定正确,将其与含有5型腺病毒右臂的质粒pPE3-F11B-EGFP在293细胞中同源重组,筛选获得含有ICOS基因的重组腺病毒质粒,行PCR鉴定。重组腺病毒质粒转染293细胞,扩增后用氯化铯密度梯度离心纯化病毒,用50%组织培养感染剂量法测定病毒滴度,并转染小鼠MSCs。结果重组腺病毒质粒经鉴定,证实含有ICOS基因,病毒滴度为6.54×109pfu/ml。转染小鼠MSCs,荧光显微镜下可见较多绿色荧光蛋白表达,流式细胞仪检测ICOS表达率为90.16%。结论成功构建了携带小鼠ICOS基因的重组腺病毒载体,并获得高滴度的病毒,能高效转染小鼠MSCs,为后续研究奠定了基础。 展开更多
关键词 腺病毒载体 可诱导刺激分子 间充质干细胞 基因治疗
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稳定表达可诱导共刺激分子CHO细胞株的筛选及其生物学活性鉴定 被引量:2
8
作者 丁庆莉 刘梦蕾 +1 位作者 龙宪连 沈茜 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期254-258,共5页
目的:构建携带人可诱导共刺激分子(inducible costimulator molecule,ICOS)基因的重组逆转录病毒载体,筛选稳定表达ICOS蛋白的CHO细胞株,并对其生物学活性进行鉴定。方法:RT-PCR法从人PBMC中获取ICOScDNA,定向克隆到逆转录病毒载体上,... 目的:构建携带人可诱导共刺激分子(inducible costimulator molecule,ICOS)基因的重组逆转录病毒载体,筛选稳定表达ICOS蛋白的CHO细胞株,并对其生物学活性进行鉴定。方法:RT-PCR法从人PBMC中获取ICOScDNA,定向克隆到逆转录病毒载体上,制备逆转录病毒重组体pMSCV-ICOS;经病毒包装细胞包装后抗性筛选出产高滴度病毒的细胞株,用高滴度病毒上清感染CHO细胞,抗性筛选出稳定表达细胞株。将CHO-ICOS细胞和PBMC以不同比例(1:1、1:2、1:5、1:10)共培养,加入亚刺激剂量(200ng/ml)的抗人CD3抗体,采用3H-TdR掺入法检测PBMC的增殖,流式细胞仪检测T细胞表面活化分子CD25表达情况,并以CHO-pMSCV细胞和PBMC以1:1比例共培养作为阴性对照以及未处理的PBMC作为空白对照。结果:成功构建逆转录病毒重组体pMSCV-ICOS,筛选出稳定表达ICOS蛋白的CHO细胞株。3H-TdR掺入法和流式细胞仪检测结果表明,与阴性对照及空白对照相比,CHO-ICOS细胞与PBMC共培养能抑制CD3抗体诱导的PBMC增殖及活化(P<0.05或P<0.01),细胞比例为1:1时抑制率最大,分别为(68±5.9)%、(44.08±3.26)%。结论:成功建立具有生物学活性的膜稳定表达人ICOS蛋白的CHO细胞株,为今后研究奠定了基础。 展开更多
关键词 可诱导刺激分子 重组逆转录病毒载体 转染
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日本血吸虫感染可诱导共刺激分子配体基因敲除小鼠CD154和CD40动态变化及对Th1/Th2偏移的影响 被引量:4
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作者 王瑜 夏超明 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期898-904,共7页
目的:探讨可诱导共刺激分子(inducible costimulator,ICOS)-ICOS配体(ICOS ligand,ICOSL)信号通路对感染日本血吸虫小鼠的CD154、CD40表达及Th1/Th2偏移的影响。方法:建立ICOSL基因敲除(ICOSL knockout,ICOSL-KO)小鼠及野生型C57BL/6J... 目的:探讨可诱导共刺激分子(inducible costimulator,ICOS)-ICOS配体(ICOS ligand,ICOSL)信号通路对感染日本血吸虫小鼠的CD154、CD40表达及Th1/Th2偏移的影响。方法:建立ICOSL基因敲除(ICOSL knockout,ICOSL-KO)小鼠及野生型C57BL/6J小鼠感染日本血吸虫疾病模型,于感染前和感染后4、7、12、16、20周,应用流式细胞术、免疫组织化学法分别检测小鼠脾细胞与肝虫卵肉芽肿周围炎性浸润细胞CD154、CD40的水平;应用酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测小鼠脾细胞经可溶性虫卵抗原(soluble egg antigen,SEA)诱导72 h后培养的上清液中γ-干扰素(interferon gamma,IFN-γ)、白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)水平及小鼠血清中SEA特异性抗体Ig G、Ig G1、Ig G2a的水平;应用HE染色观察小鼠肝虫卵肉芽肿病变动态变化。结果:感染后4、7、12、16、20周,ICOSL-KO小鼠脾细胞CD154、CD40水平与野生型小鼠相比,显著降低[CD154为(18.62±4.76)%vs.(27.91±3.94)%、(22.44±4.67)%vs.(40.86±5.21)%、(25.50±6.81)%vs.(43.81±8.41)%、(20.22±5.28)%vs.(40.95±7.34)%、(17.87±4.59)%vs.(33.16±6.31)%,皆P<0.01;CD40为(19.43±3.26)%vs.(24.37±3.59)%、(23.00±4.47)%vs.(31.80±5.86)%、(24.46±5.01)%vs.(35.85±5.32)%、(23.42±4.69)%vs.(33.30±6.14)%、(22.85±3.78)%vs.(30.88±5.94)%,皆P<0.05]。感染后7、12、16、20周,ICOSL-KO小鼠肝虫卵肉芽肿炎性浸润细胞CD154、CD40水平与野生型小鼠相比,亦显著降低[CD154为(0.319±0.066)vs.(0.488±0.086)、(0.389±0.067)vs.(0.596±0.082)、(0.378±0.064)vs.(0.543±0.072)、(0.348±0.069)vs.(0.523±0.076),皆P<0.01;CD40为(0.398±0.066)vs.(0.546±0.079)、(0.461±0.085)vs.(0.618±0.076)、(0.453±0.087)vs.(0.587±0.074)、(0.449±0.065)vs.(0.565±0.082),皆P<0.05]。感染后,ICOSL-KO小鼠IFN-γ表达显著高于野生型小鼠(P<0.05),而IL-4表达水平则显著低于野生型小鼠(P<0.05),其Th2分化指数亦显著低于野生型小鼠(P<0.01)。ICOSL-KO小鼠血清SEA特异性抗体Ig G、Ig G1、Ig G2a的水平与Ig G1/Ig G2a的比值亦显著低于野生型小鼠(P<0.01),且ICOSL-KO小鼠的肝虫卵肉芽肿体积显著小于野生型小鼠(P<0.01)。结论:ICOS-ICOSL信号通路在血吸虫病免疫病理中起重要调控作用,其对Th1/Th2偏移的影响可能是通过调控CD154-CD40信号通路来实现的。 展开更多
关键词 可诱导刺激分子 CD40配体 TH1/TH2平衡 日本血吸虫 小鼠 基因敲除
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可诱导共刺激分子和小鼠免疫球蛋白融合基因的分泌表达及生物学活性 被引量:1
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作者 王健 张军 沈茜 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期411-415,共5页
目的:为获得重组可诱导共刺激分子胞外段与小鼠免疫球蛋白的融合蛋白(ICOS-Ig)并研究其生物学活性,以探讨它作为免疫拮抗剂阻断ICOS/B7RP-1共刺激通路的作用。方法:克隆编码人可诱导共刺激分子(ICOS)胞外片段,与编码小鼠免疫... 目的:为获得重组可诱导共刺激分子胞外段与小鼠免疫球蛋白的融合蛋白(ICOS-Ig)并研究其生物学活性,以探讨它作为免疫拮抗剂阻断ICOS/B7RP-1共刺激通路的作用。方法:克隆编码人可诱导共刺激分子(ICOS)胞外片段,与编码小鼠免疫球蛋白IgG恒定片段(Ig)的基因融合,构建ICOS-Ig融合基因及其分泌型真核表达载体pSecTag2/Hygro A-ICOS-Ig;构建融合蛋白的稳定真核表达细胞株,用Western blot和ELISA法检测其表达、流式细胞仪(FACS)检测其配体结合活性、混合淋巴细胞反应(MLR)及细胞因子检测测定其生物学活性。结果:核苷酸序列测定显示克隆基因的核苷酸与Genebank序列一致:ELISA和Western blot检测表明转染细胞有分泌型重组蛋白的表达,其含量可达5~25μg/ml;该重组蛋白有配体结合活性,可体外抑制淋巴细胞增殖、减少IL-2、IFN-γ的分泌。结论:重组ICOS-Ig融合基因及其真核表达载体的构建完成并获得高效表达,该重组蛋白具有配体结合活性,可在体外通过抑制ICOS/B7RP-1共刺激通路抑制淋巴细胞增殖及细胞因子分泌。 展开更多
关键词 可诱导刺激分子 pSecTag2/Hygro A 融合蛋白 真核表达
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可诱导共刺激分子在川崎病患儿外周血T淋巴细胞的表达 被引量:1
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作者 马颐姣 李永柏 +1 位作者 杨军 王国兵 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期749-751,共3页
目的探讨可诱导共刺激分子(ICOS)在川崎病(KD)及KD伴有冠状动脉损害,IVIG非敏感型KD发病机制中的作用。方法应用荧光定量PCR检测48例KD组和30例KD IVIG治疗组ICOSmRNA表达的变化。同时以25例同龄健康儿童和20例急性支气管肺炎患儿作为... 目的探讨可诱导共刺激分子(ICOS)在川崎病(KD)及KD伴有冠状动脉损害,IVIG非敏感型KD发病机制中的作用。方法应用荧光定量PCR检测48例KD组和30例KD IVIG治疗组ICOSmRNA表达的变化。同时以25例同龄健康儿童和20例急性支气管肺炎患儿作为对照。结果 KD组与对照相比,ICOSmRNA表达显著升高(17.97±7.22对8.01±5.15,P<0.01)。其中冠状动脉损害组较无冠状动脉损害组ICOS表达异常升高(29.09±10.55对11.68±5.11,P<0.01)。KD IVIG组与KD组比较,ICOSmRNA表达降低(13.03±5.15对17.97±7.22,P<0.05)。其中IVIG不敏感组与IVIG敏感组比较,ICOS表达显著升高(21.57±6.22对9.85±5.89,P<0.05)。结论 B7/CD28家族分子中正性调节因子ICOS过度表达可能是导致KD免疫失衡的原因之一,正性调节因子过度表达可能与KD冠状动脉损害有关。IVIG治疗在纠正KD淋巴细胞过度活化中发挥作用,同时可能有下调正性调控因子表达的作用。 展开更多
关键词 川崎病 可诱导刺激分子 B7/CD28家族
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抗APO-1单克隆抗体诱导HL-60抗药株细胞凋亡
12
作者 陈俊 郭坤元 +2 位作者 陈国强 王薇 尹家强 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1995年第4期260-260,共1页
肿瘤细胞对化疗药物的抗性,包括抵制药物诱导的凋亡,是临床肿瘤化疗效果差的主要原因之一。Fas/APO-1(CD95)是一个接收特异细胞凋亡信号(apoptotic signal)的受体分子。位于细胞膜表面。属于TNFR/NGFR家族,国外学者报道Fas/APO-... 肿瘤细胞对化疗药物的抗性,包括抵制药物诱导的凋亡,是临床肿瘤化疗效果差的主要原因之一。Fas/APO-1(CD95)是一个接收特异细胞凋亡信号(apoptotic signal)的受体分子。位于细胞膜表面。属于TNFR/NGFR家族,国外学者报道Fas/APO-1的天然配体FasL和识别Fas/APO-1的单克隆抗体均可激发表达该分子的正常T、B细胞和多种肿瘤细胞凋亡(apoptosis), 展开更多
关键词 细胞凋亡 单克隆抗体 FAS/APO-1 HL-60 诱导 CD95 肿瘤化疗 细胞膜 分子 配体
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人可诱导共刺激分子胞外片段和小鼠免疫球蛋白Ig融合基因的表达及生物学活性鉴定
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作者 王健 张军 +1 位作者 张燕 沈茜 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期305-309,共5页
目的:探讨用基因工程方法表达的人可诱导共刺激分子(ICOS)与小鼠免疫球蛋白的融合蛋白竞争抑制ICOS B7RP1共刺激通路的作用。方法:以RT PCR方法克隆编码人ICOS胞外片段,与编码小鼠免疫球蛋白IgG恒定片段(Ig)的基因融合,构建携带融合基... 目的:探讨用基因工程方法表达的人可诱导共刺激分子(ICOS)与小鼠免疫球蛋白的融合蛋白竞争抑制ICOS B7RP1共刺激通路的作用。方法:以RT PCR方法克隆编码人ICOS胞外片段,与编码小鼠免疫球蛋白IgG恒定片段(Ig)的基因融合,构建携带融合基因的高效真核表达载体pcDNA4/HisMAX A ICOS Ig。采用脂质体法转染CHO细胞,用Western印迹法检测稳定表达细胞中融合基因的表达,流式细胞术检测重组蛋白的配体结合活性。以适当浓度的重组融合蛋白作为拮抗剂与BALB/c和C57BL小鼠脾单个核细胞进行混合培养,观察重组蛋白在体外抑制淋巴细胞增殖的效果。结果:构建了携带融合基因的高效真核表达载体pcDNA4/HisMAX A ICOS Ig; Western印迹法检测表明转染细胞有重组蛋白的表达;流式细胞术分析显示重组蛋白有配体表达细胞的结合活性;该重组融合蛋白作为拮抗剂可体外抑制混合淋巴细胞增殖。结论:构建并成功表达了ICOS Ig融合基因高效真核表达载体;该重组蛋白具有配体结合活性,可在体外通过抑制ICOS B7RP 1共刺激通路抑制淋巴细胞增殖。 展开更多
关键词 可诱导刺激分子 龟疫球蛋白 融合基因 基因表达
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可诱导共刺激分子诱导骨髓来源不成熟树突状细胞特异性分泌IL-6
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作者 唐古生 吴君 +1 位作者 丁庆莉 沈茜 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期220-227,共8页
目的:分析可诱导共刺激分子(ICOS)可溶性融合蛋白(ICOSIg)能否向不成熟DCs传递逆向信号及其性质。方法:以流式细胞仪结合特异性抗体检测DCs表型分子改变;以ELISA检测培养上清细胞因子变化;以RT-PCR检测各组DCs细胞内细胞因子及受体、趋... 目的:分析可诱导共刺激分子(ICOS)可溶性融合蛋白(ICOSIg)能否向不成熟DCs传递逆向信号及其性质。方法:以流式细胞仪结合特异性抗体检测DCs表型分子改变;以ELISA检测培养上清细胞因子变化;以RT-PCR检测各组DCs细胞内细胞因子及受体、趋化因子等mRNA表达水平。结果:ICOSIg或膜锚定ICOS作用于不成熟DCs,均可诱导其高表达MHC-Ⅱ、CD80、CD86和CD83等表型分子;促进DCs特异性分泌IL-6。结论:ICOS作用于不成熟DCs表面的ICOSL可以向DCs细胞传递逆向信号,诱导DCs细胞高分泌IL-6,同时其表面重要的表型分子也上调,可能参与了DCs细胞免疫功能的调节,其信号转导机制可能涉及p38-MAPK通路。 展开更多
关键词 可诱导刺激分子 不成熟树突状细胞 逆向信号 IL-6
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大鼠角膜移植后颌下淋巴结中可诱导共刺激分子的表达
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作者 陈晓敏 张明昌 胡燕华 《眼科新进展》 CAS 2008年第8期569-572,577,共5页
目的探讨可诱导的共刺激分子(inducible costimulatory,ICOS)在大鼠角膜移植后颌下淋巴结(submandibular lymph nodes,SMLN)中的表达和意义。方法采用RT-PCR、蛋白免疫印迹分析检测大鼠角膜移植后SMLN中ICOS mRNA和蛋白的表达;免疫组织... 目的探讨可诱导的共刺激分子(inducible costimulatory,ICOS)在大鼠角膜移植后颌下淋巴结(submandibular lymph nodes,SMLN)中的表达和意义。方法采用RT-PCR、蛋白免疫印迹分析检测大鼠角膜移植后SMLN中ICOS mRNA和蛋白的表达;免疫组织化学法检测ICOS蛋白在SMLN中的表达部位。结果ICOS在正常的SMLN中无表达;同种异体角膜移植组术后SMLN中的ICOS mRNA转录及蛋白的表达从第1天起即呈明显上升趋势,第7天达到高峰,分别从第5天和第3天开始,同一时间点上的表达水平在同种异体移植组明显高于自体移植组,自体移植组和异体移植组术后第5天、7天、14天SMLN中ICOS mRNA的相对表达量分别为0.2419和0.4907、0.2022和0.7348、0.1339和0.3190;术后第3天、7天、14天ICOS蛋白的相对表达量分别为0.2308和0.3957、0.1028和0.8366、0.0476和0.3966,差异有显著统计学意义(P<0.01);免疫组织化学显示同种异体角膜移植术后ICOS阳性表达见于SMLN的副皮质区,位于细胞胞浆中,表现为胞浆和胞膜呈棕黄色。结论同种异体角膜移植术后ICOS在SMLN中表达较对照组明显升高,可能在同种异体角膜术后的排斥反应中起到重要作用。 展开更多
关键词 颌下淋巴结 同种异体移植 自体移植 可诱导刺激分子
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负性共刺激分子阻断抗体用于肿瘤治疗的研究进展 被引量:5
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作者 徐悦蓉 杨安钢 温伟红 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期125-128,133,共5页
在免疫系统中,负性共刺激分子可通过受体-配体的结合而抑制免疫应答,避免免疫造成的组织损伤,在维持自身免疫耐受方面发挥重要作用。负性共刺激分子也参与调节肿瘤的发生发展,细胞毒性T细胞相关抗原4(CTLA-4)和程序性死亡分子1(PD-1)主... 在免疫系统中,负性共刺激分子可通过受体-配体的结合而抑制免疫应答,避免免疫造成的组织损伤,在维持自身免疫耐受方面发挥重要作用。负性共刺激分子也参与调节肿瘤的发生发展,细胞毒性T细胞相关抗原4(CTLA-4)和程序性死亡分子1(PD-1)主要表达于活化的T细胞,它们与相应配体结合后可传递抑制性信号,从而抑制机体的抗肿瘤免疫,导致肿瘤免疫逃逸的发生。在肿瘤患者中,利用特异性的抗体阻断这些负性共刺激分子,可消除它们的免疫抑制功能,从而促进机体的抗肿瘤免疫应答,实现对肿瘤生长的有效抑制。现针对负性共刺激分子的阻断抗体在肿瘤治疗中的研究进展进行综述。 展开更多
关键词 负性刺激分子 细胞毒性T细胞相关抗原4 程序性死亡分子1 程序性死亡分子1配体 阻断抗体 肿瘤治疗 综述
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诱导性共刺激分子表达与原因不明复发性流产的相关性研究 被引量:3
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作者 魏嘉 赵爱民 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期642-645,共4页
目的探讨诱导性共刺激分子(ICOS)的表达与原因不明复发性流产(URSA)的关系。方法采集10例诊断为难免流产的URSA患者(URSA组)和10例正常早孕妇女(正常对照组)的部分蜕膜组织和外周血,采用流式细胞术检测蜕膜组织和外周血CD3+和CD4+T细胞... 目的探讨诱导性共刺激分子(ICOS)的表达与原因不明复发性流产(URSA)的关系。方法采集10例诊断为难免流产的URSA患者(URSA组)和10例正常早孕妇女(正常对照组)的部分蜕膜组织和外周血,采用流式细胞术检测蜕膜组织和外周血CD3+和CD4+T细胞中ICOS的表达;Real-Time PCR检测蜕膜组织中ICOS mRNA的表达情况。结果 URSA组蜕膜组织中ICOS+CD3+T淋巴细胞亚群所占百分比为(0.612±0.693)%,显著高于正常对照组的(0.056±0.103)%,差异有统计学意义(P<0.001)。URSA组外周血ICOS+CD4+T淋巴细胞亚群所占百分比为(1.943±0.762)%,显著高于正常对照组的(0.221±0.127)%,差异有统计学意义(P<0.001)。URSA组蜕膜组织中ICOS mRNA的相对表达量较正常对照组显著升高[(9.875±1.464)vs(2.701±1.737)],差异有统计学意义(P<0.05)。结论蜕膜组织中ICOS的表达异常与URSA的发病具有密切关系。 展开更多
关键词 诱导刺激分子 原因不明复发性流产 蜕膜 外周血
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可诱导共刺激分子参与自发性高血压大鼠肠系膜血管内皮-间质转化及硬化
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作者 都昌乐 王瑜 +3 位作者 付计锋 曹冬黎 梅仁彪 张奇 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期308-316,共9页
目的 探究可诱导共刺激分子(ICOS)与自发性高血压大鼠(SHR)肠系膜血管内皮-间质转化(EndMT)及硬化的相关性。方法4周龄SHR大鼠(观察组)及同品系WKY大鼠(对照组)各20只,各组再随机分为4组,5只/组。无创血压测量仪动态监测各组大鼠血压情... 目的 探究可诱导共刺激分子(ICOS)与自发性高血压大鼠(SHR)肠系膜血管内皮-间质转化(EndMT)及硬化的相关性。方法4周龄SHR大鼠(观察组)及同品系WKY大鼠(对照组)各20只,各组再随机分为4组,5只/组。无创血压测量仪动态监测各组大鼠血压情况,并于4、6、10、30周龄进行实验。采用流式细胞术检测大鼠脾脏CD4+T细胞的ICOS表达频数;RT-PCR法检测大鼠肠系膜中ICOS、VE-cad、α-SMA、Col3 m RNA表达;免疫组化技术检测大鼠肠系膜血管VE-cad、α-SMA、Col3及淋巴组织中ICOS、IL-17A、TGF-β的分布情况;ELISA法检测大鼠血浆中IL-17A、TGF-β含量水平;Masson染色观察大鼠肠系膜血管形态变化;Spearman和Pearson相关分析评价ICOS与VE-cad、α-SMA、Col3及胶原容积分数的相关性。结果 SHR大鼠自6周龄开始,与对照组相比收缩压增高(P<0.05);CD4+T细胞ICOS的表达频数高于同期对照组(P<0.05);肠系膜组织中ICOS、α-SMA、Col3、IL-17A和TGF-β的mRNA及蛋白表达相较于对照组均升高(P<0.05),VE-cad mRNA及蛋白则在10周龄时表达下降(P<0.05);自6周龄始SHR大鼠血浆中IL-17A、TGF-β含量水平提升(P<0.05);肠系膜血管硬化程度不断加剧(P<0.05);肠系膜组织中ICOS mRNA及蛋白表达水平与α-SMA、Col3表达水平和血管硬化程度自6周龄始均呈正相关(P<0.05),与VE-cad表达水平自10周龄始呈负相关(P<0.05)。结论 ICOS可能通过介导相关免疫反应在高血压肠系膜血管EndMT及硬化过程中发挥重要作用。 展开更多
关键词 可诱导刺激分子 高血压 内皮-间质转化 血管硬化
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可诱导共刺激分子介导的Th17细胞极化对自发性高血压大鼠肾纤维化的影响 被引量:4
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作者 王瑜 王博士 +3 位作者 惠旭 乔君 李委振 孙楠 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期534-540,共7页
目的探讨可诱导共刺激分子(ICOS)介导的Th17细胞极化在原发性高血压肾损害中的作用。方法 4周龄的自发性高血压大鼠(SHR)随机分为SHR-C组及SHR-I组,分别用0.01 mol/L磷酸缓冲盐溶液(PBS)、ICOS阻断型单克隆抗体干预2周。采用无创尾动脉... 目的探讨可诱导共刺激分子(ICOS)介导的Th17细胞极化在原发性高血压肾损害中的作用。方法 4周龄的自发性高血压大鼠(SHR)随机分为SHR-C组及SHR-I组,分别用0.01 mol/L磷酸缓冲盐溶液(PBS)、ICOS阻断型单克隆抗体干预2周。采用无创尾动脉血压测量仪动态监测大鼠的血压。采用流式细胞技术分析大鼠脾淋巴细胞中Th17细胞的频数变化。RT-PCR法动态检测大鼠肾脏中IL-17A m RNA的表达水平。采用免疫组化技术及ELISA法动态检测大鼠肾脏及血浆中IL-17A和TGF-β1的表达水平。采用Masson染色检测大鼠肾脏病理改变情况。结果 SHR-C组大鼠从第10周始血压显著高于同期的SHR-I组大鼠(P<0.05或P<0.01)。从6周始SHR-C组的大鼠Th17细胞频数显著高于同期SHR-I组(P<0.05)。SHR-C组的大鼠肾脏中IL-17A m RNA表达亦显著高于同期SHR-I组(P<0.05),且其血浆和肾脏中IL-17A、TGF-β1的表达显著高于同期SHR-I组(P<0.05)。与SHR-C组相比,SHR-I组的大鼠肾脏纤维化程度降低,在30周两者差异具有显著性(P<0.05)。结论由ICOS介导的Th17细胞极化在高血压导致的肾纤维化中起重要作用。 展开更多
关键词 可诱导刺激分子 TH17细胞 自发性高血压大鼠 肾纤维化
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可诱导共刺激分子与自身免疫性葡萄膜炎
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作者 杨乐(综述) 邢琳(审校) 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期682-686,共5页
可诱导共刺激分子(ICOS)是共刺激分子CD28超家族的一员,大量表达于活化后的T细胞表面,与相应配体(ICOSL)结合后产生共刺激信号,促进活化后的T细胞增生、分化以及细胞因子的产生。临床研究和实验研究均表明,ICOS在多种自身免疫... 可诱导共刺激分子(ICOS)是共刺激分子CD28超家族的一员,大量表达于活化后的T细胞表面,与相应配体(ICOSL)结合后产生共刺激信号,促进活化后的T细胞增生、分化以及细胞因子的产生。临床研究和实验研究均表明,ICOS在多种自身免疫性疾病中发挥重要作用,在自身免疫性葡萄膜炎(AIU)和Behcet病的发病和转归过程中,ICOS/ICOSL共刺激通路通过调节T淋巴细胞的效应因子影响病变的严重程度。因此进一步研究ICOS/ICOSL共刺激通路在AIU中的作用机制对于寻找新的AIU治疗途径有重要意义。就ICOS的基本概念、ICOS/ICOSL共刺激通路与效应细胞的关系及其在AIU治疗中的展望进行综述。 展开更多
关键词 自身免疫性葡萄膜炎 可诱导刺激分子 辅助性T细胞 调节性T细胞
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