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题名重组N-乙酰鸟氨酸脱酰基酶的表达条件优化
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作者
李环
朱大伟
陈悦
任真
韦萍
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机构
南京工业大学制药与生命科学学院
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出处
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2008年第4期239-243,共5页
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基金
"973"计划项目(2003CB7160004)
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文摘
N-乙酰鸟氨酸脱酰基酶(N-acetylornithine deacetylase,NAOase)为新型氨基酸拆分酶,可在重组菌BL21(DE3)-pET22b-argE中胞内诱导表达。为降低生产成本并提高酶活,优化了培养基成分及诱导条件。结果表明,进口的蛋白胨和酵母膏明显优于国产原料。5.0g/L的乳糖可以代替昂贵的IPTG(isopropy1β-D-1-Thiogalacto pyranoside,异丙基β-D硫代半乳糖苷)起到有效的诱导效果。最佳碳源为1.0g/L甘油,氮源为15.0ml/L玉米浆和5.0g/L蛋白胨。NAOase大多以不可溶的包涵体形式表达,少量为可溶的活性表达。降低诱导温度可增大活性表达的比例,而整菌表达量也随之降低。22℃诱导10h为活性表达的最适条件,生物量为6.91,酶活为392.65U/ml,分别为优化前的1.65倍和5.72倍。
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关键词
N-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶
表达优化
包涵体
可溶性部分酶活
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Keywords
N-acetylomithine decatylase（NAOase）
expression optimization
inclusion bodies
soluble NAOas activity
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分类号
Q93
[生物学—微生物学]
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