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腺病毒介导的可溶性Ⅰ型补体受体基因转染对急性心肌缺血的保护作用的实验研究
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作者 黄盛东 崔勇 +4 位作者 陆方林 陈和忠 徐静 龚德军 徐志云 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期237-239,共3页
目的:探讨腺病毒介导的可溶性Ⅰ型补体受体(solub le comp lem ent receptor type 1,sCR1)基因转染对急性心肌缺血的保护作用。方法:开胸阻断小鼠左冠状动脉前降支起始部30 m in后开放,实验组(14只)在开放冠状动脉前5 m in于缺血区注射... 目的:探讨腺病毒介导的可溶性Ⅰ型补体受体(solub le comp lem ent receptor type 1,sCR1)基因转染对急性心肌缺血的保护作用。方法:开胸阻断小鼠左冠状动脉前降支起始部30 m in后开放,实验组(14只)在开放冠状动脉前5 m in于缺血区注射携带sCR1和LacZ的混合腺病毒液(100μl,1010噬斑形成单位);对照组(13只)注射LacZ腺病毒液(100μl,1010噬斑形成单位)。术后2周时利用超声心动图检查心功能,并于检查后立即取标本行病理检查。结果:术后2周时,各项超声指标实验组都明显优于对照组(P<0.05);尤其是反映梗死范围大小的梗死范围率,差异非常显著(P<0.01)。病理检查见实验组动物心肌梗死区域小于对照组,H-E染色显示实验组注射sCR1腺病毒的范围内存活心肌细胞明显多于对照组。结论:缺血心肌再灌注前注射sCR1腺病毒可以明显减小梗死范围,提高远期心脏功能。 展开更多
关键词 心肌缺血 可溶性补体受体 腺病毒 转染
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人sCR1结合C3b结构域基因的克隆及在大肠杆菌中高效表达 被引量:7
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作者 罗雪 汪正清 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第15期1551-1554,共4页
目的克隆表达人可溶性补体受体1型(sCR1)结合C3b结构域基因。方法从外周血单核细胞中提取总RNA,RT-PCR克隆编码sCR1-SCR15-18的cDNA,连接pMD-18T载体进行DNA序列分析,再亚克隆pET32原核表达载体,构建pET32-sCR1-SCR15-18重组表达载体,转... 目的克隆表达人可溶性补体受体1型(sCR1)结合C3b结构域基因。方法从外周血单核细胞中提取总RNA,RT-PCR克隆编码sCR1-SCR15-18的cDNA,连接pMD-18T载体进行DNA序列分析,再亚克隆pET32原核表达载体,构建pET32-sCR1-SCR15-18重组表达载体,转化BL21菌,用IPTG诱导表达,表达产物通过免疫印迹实验鉴定。结果获得了预期的扩增目的片段,成功构建了pMD-18T重组克隆载体,核苷酸测序结果与GenBank登录的人sCR1-SCR15-18 cD-NA序列一致。成功的构建了原核表达载体pET32-sCR1-SCR15-18,目的蛋白的表达量占菌体总蛋白的40%,并在菌体内形成包涵体。免疫印迹实验显示,在分子量约43×103处出现单一条带的阳性结果。结论从单核细胞中克隆出sCR1-SCR15-18片段基因,人sCR1-SCR15-18在大肠杆菌中得到高效表达。 展开更多
关键词 可溶性补体ⅰ型受体 反转录多聚酶链式反应 互补DNA克隆 蛋白质表达
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