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在大肠杆菌中高效表达人粒-巨噬细胞集落刺激因子可溶性融合蛋白的研究
1
作者
王宇光
符少萍
+1 位作者
赵志英
郑学勤
《热带作物学报》
CSCD
1999年第3期49-53,共5页
通过人粒－巨噬细胞集落刺激因子与疏氧还蛋白融合的形式，利用ＰＴｘＦｕｓ表达载体，高效地表达了其可溶性融合蛋白，该融合蛋白具有较高的热稳定性。
关键词
硫氧还
蛋白
可溶性融合蛋白
大肠杆菌表达
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职称材料
基于枯草芽孢杆菌重组菌株构建技术制备海洋源金属硫蛋白
被引量：
1
2
作者
阎光宇
孙继鹏
+1 位作者
易瑞灶
苏永全
《渔业研究》
2018年第2期89-97,共9页
为构建安全高效表达海洋源金属硫蛋白的益生菌重组菌株,以海洋源褶牡蛎内脏团为模板,PCR克隆得到褶牡蛎金属硫蛋白基因(Op-MT),大小为324 bp,经pMD19-T载体亚克隆到融合表达载体pHT43-SUMO中,然后通过电转化法将重组质粒转入八种蛋白酶...
为构建安全高效表达海洋源金属硫蛋白的益生菌重组菌株,以海洋源褶牡蛎内脏团为模板,PCR克隆得到褶牡蛎金属硫蛋白基因(Op-MT),大小为324 bp,经pMD19-T载体亚克隆到融合表达载体pHT43-SUMO中,然后通过电转化法将重组质粒转入八种蛋白酶缺陷的宿主枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)WB800N中。SDS-PAGE电泳显示诱导表达的融合蛋白SUMO-Op-MT分子量约为23 kD,与预期一致,说明可溶性融合蛋白SUMO-Op-MT在宿主菌中得到了表达,且通过Western blotting进一步得到验证。同时,HPLC检测重组枯草芽孢杆菌发酵液,结果也表明重组枯草芽孢杆菌成功表达了可溶性目的蛋白Op-MT。通过对重组工程菌中MT活性检测发现,其对重金属镉耐受力增强,说明重组工程菌成功表达出有活性的金属硫蛋白。这为以后开发天然、高效海洋源重金属解毒剂提供理论基础。
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关键词
枯草芽孢杆菌
海洋源金属硫
蛋白
可溶性融合蛋白
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职称材料
题名
在大肠杆菌中高效表达人粒-巨噬细胞集落刺激因子可溶性融合蛋白的研究
1
作者
王宇光
符少萍
赵志英
郑学勤
机构
中国热带农业科学院热带作物生物技术国家重点实验室
出处
《热带作物学报》
CSCD
1999年第3期49-53,共5页
文摘
通过人粒－巨噬细胞集落刺激因子与疏氧还蛋白融合的形式，利用ＰＴｘＦｕｓ表达载体，高效地表达了其可溶性融合蛋白，该融合蛋白具有较高的热稳定性。
关键词
硫氧还
蛋白
可溶性融合蛋白
大肠杆菌表达
Keywords
HGM-CSF
thioredoxin
soluble fusion protein
expression in E.coli
分类号
Q782 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
基于枯草芽孢杆菌重组菌株构建技术制备海洋源金属硫蛋白
被引量：
1
2
作者
阎光宇
孙继鹏
易瑞灶
苏永全
机构
厦门海洋职业技术学院
东山出入境检验检疫局综合技术服务中心
国家海洋局第三海洋研究所
国家海洋局海洋生物资源综合利用工程技术研究中心
厦门大学
出处
《渔业研究》
2018年第2期89-97,共9页
基金
福建省科技计划项目(2017N0016)
国家海洋局第三海洋研究所基本科研业务费专项资金资助项目(海三科2016031)共同资助
文摘
为构建安全高效表达海洋源金属硫蛋白的益生菌重组菌株,以海洋源褶牡蛎内脏团为模板,PCR克隆得到褶牡蛎金属硫蛋白基因(Op-MT),大小为324 bp,经pMD19-T载体亚克隆到融合表达载体pHT43-SUMO中,然后通过电转化法将重组质粒转入八种蛋白酶缺陷的宿主枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)WB800N中。SDS-PAGE电泳显示诱导表达的融合蛋白SUMO-Op-MT分子量约为23 kD,与预期一致,说明可溶性融合蛋白SUMO-Op-MT在宿主菌中得到了表达,且通过Western blotting进一步得到验证。同时,HPLC检测重组枯草芽孢杆菌发酵液,结果也表明重组枯草芽孢杆菌成功表达了可溶性目的蛋白Op-MT。通过对重组工程菌中MT活性检测发现,其对重金属镉耐受力增强,说明重组工程菌成功表达出有活性的金属硫蛋白。这为以后开发天然、高效海洋源重金属解毒剂提供理论基础。
关键词
枯草芽孢杆菌
海洋源金属硫
蛋白
可溶性融合蛋白
Keywords
Bacillus subtilis
marine sources metallothionein
soluble fusion protein
分类号
S986.2 [农业科学—捕捞与储运]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
在大肠杆菌中高效表达人粒-巨噬细胞集落刺激因子可溶性融合蛋白的研究
王宇光
符少萍
赵志英
郑学勤
《热带作物学报》
CSCD
1999
0
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职称材料
2
基于枯草芽孢杆菌重组菌株构建技术制备海洋源金属硫蛋白
阎光宇
孙继鹏
易瑞灶
苏永全
《渔业研究》
2018
1
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职称材料
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