可溶性环氧化物水解酶抑制剂对暴露于HEMA的人牙髓干细胞细胞迁移及成牙分化的影响

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作者 罗加欣 黄旌 +2 位作者 王渝灵 冯燕 党海霞 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期166-171,共6页

目的:探讨在树脂单体甲基丙烯酸羟乙酯(2-hydroxyethyl methacrylate, HEMA)暴露环境下,可溶性环氧化物水解酶抑制剂(TPPU)对人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells, hDPSCs)迁移及成牙分化的影响。方法:分离提取hDPSCs,并利用茜... 目的:探讨在树脂单体甲基丙烯酸羟乙酯(2-hydroxyethyl methacrylate, HEMA)暴露环境下,可溶性环氧化物水解酶抑制剂(TPPU)对人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells, hDPSCs)迁移及成牙分化的影响。方法:分离提取hDPSCs,并利用茜素红染色和流式细胞仪鉴定其干性。以无添加药物的诱导培养基为对照组,以HEMA、HEMA+TPPU为实验组,利用CCK-8检测细胞活性;利用细胞划痕实验检测细胞迁移;利用碱性磷酸酶染色法进行染色,并检测碱性磷酸酶(ALP)活性;利用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测成牙分化相关基因Runt相关转录因子2(Runx2)、牙本质基质蛋白-1(DMP-1)和牙本质涎磷蛋白(DSPP)的相对表达;利用茜素红染色检测矿化结节形成情况。结果:HEMA组细胞活性较对照组显著降低(P<0.05),HEMA+TPPU组较HEMA组增加(P<0.05)。HEMA组细胞迁移率较对照组显著降低(P<0.05),HEMA+TPPU组较HEMA组增加(P<0.05)。在成牙诱导分化过程中,用2 mmol/L的HEMA处理细胞后,ALP活性较对照组降低(P<0.05),相关成牙分化基因表达也显著降低(P<0.05)。而HEMA+TPPU组ALP活性较HEMA组显著升高(P<0.05),且基因Runx2、DMP-1、DSPP表达也显著增加(P<0.05)。此外茜素红染色结果也显示HEMA+TPPU组和对照组的相对钙含量均较HEMA组显著升高(P<0.05)。结论:HEMA可在一定程度上抑制hDPSCs的细胞迁移和成牙分化能力,而TPPU可部分逆转HEMA对细胞迁移和成牙分化能力的抑制作用。 展开更多

关键词 可溶性环氧化物水解酶抑制剂 HEMA 牙髓干细胞 细胞迁移 成牙分化

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可溶性环氧化物水解酶抑制剂在TGF-β1诱导的人脐静脉内皮细胞内皮-间质转化中的作用 被引量：1

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作者 郭亚男 杨海波 +3 位作者 赵荫涛 刘源 李凌 周岩强 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2017年第2期163-167,共5页

目的:观察可溶性环氧化物水解酶抑制剂t-AUCB对TGF-β1诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)内皮-间质转化(End MT)的影响。方法:采用t-AUCB(50μmol/L)预处理HUVEC 40 min后,用TGF-β1(10μg/L)诱导HUVEC 24 h,采用Western blot法检测Smad2/... 目的:观察可溶性环氧化物水解酶抑制剂t-AUCB对TGF-β1诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)内皮-间质转化(End MT)的影响。方法:采用t-AUCB(50μmol/L)预处理HUVEC 40 min后,用TGF-β1(10μg/L)诱导HUVEC 24 h,采用Western blot法检测Smad2/3的磷酸化水平;诱导72 h后,光镜观察细胞形态的变化,采用CCK-8试剂盒检测细胞活性,采用实时荧光定量PCR检测内皮细胞标记物(CD31)、间质细胞标记物(collagenⅠ、collagenⅢ、vimentin)及End MT中重要的下游转录因子(snail1、twist1、twist2、ZEB1)mRNA的表达。同时设TGF-β1和tAUCB单独作用组。结果:光镜下,TGF-β1组细胞转变为狭长形,细胞间隙疏松,TGF-β1+t-AUCB组、t-AUCB组细胞形态正常。TGF-β1组细胞CD31 mRNA表达下调,collagenⅠ、collagenⅢ、vimentin mRNA表达上调,snail1、twist1、twist2、ZEB1 mRNA表达上调,Smad2及Smad3蛋白磷酸化水平升高(P<0.05)。与TGF-β1组比较,TGF-β1+t-AUCB组、t-AUCB组上述指标的表达均有一定程度的逆转(P<0.05)。结论:t-AUCB可通过抑制内皮细胞的End MT而发挥抗纤维化作用。 展开更多

关键词 可溶性环氧化物水解酶抑制剂 内皮-间质转化 脐静脉内皮细胞 心肌纤维化

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可溶性环氧化物水解酶与肝脏疾病 被引量：1

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作者 周露萍 陈露露 欧阳冬生 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期1525-1530,共6页

可溶性环氧化物水解酶(soluble epoxide hydrolase,sEH)是一种双功能同型二聚体酶,于1973年被Gill等[1]在研究类似昆虫保幼激素萜类环氧化物的代谢时发现,因其主要定位于细胞可溶性组分而得名。近年来大量研究表明,sEH在心血管疾病、神... 可溶性环氧化物水解酶(soluble epoxide hydrolase,sEH)是一种双功能同型二聚体酶,于1973年被Gill等[1]在研究类似昆虫保幼激素萜类环氧化物的代谢时发现,因其主要定位于细胞可溶性组分而得名。近年来大量研究表明,sEH在心血管疾病、神经系统疾病和代谢性疾病等多种疾病中发挥着重要作用[2-4],已被作为疾病治疗的新靶点而进行研究,且已有sEH抑制剂进入了人体临床试验。本文综述了sEH与肝脏疾病之间的关系,以期为sEH作为肝脏疾病治疗新靶点的研究提供参考。 展开更多

关键词 可溶性环氧化物水解酶 非酒精性脂肪性肝病 酒精性肝病 药物性肝损伤

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可溶性环氧化物水解酶2基因与中国汉族人群非综合征型唇腭裂的关联研究 被引量：3

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作者 杨梦夕 王艺儒 +3 位作者 殷斌 郑谦 石冰 贾仲林 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期279-284,共6页

目的探究可溶性环氧化物水解酶2基因(EPHX2)的遗传变异位点与中国汉族人群非综合征型唇腭裂(NSCL/P)的相关性。方法本研究以159个中国汉族NSCL/P患者作为研究对象,对EPHX2基因区域开展了目标区域捕获测序,更全面地检测了EPHX2基因区域... 目的探究可溶性环氧化物水解酶2基因(EPHX2)的遗传变异位点与中国汉族人群非综合征型唇腭裂(NSCL/P)的相关性。方法本研究以159个中国汉族NSCL/P患者作为研究对象,对EPHX2基因区域开展了目标区域捕获测序,更全面地检测了EPHX2基因区域的遗传变异位点。以诺禾致源基因数据库的542名中国汉族健康人的全基因组测序数据作为对照,进行常见变异位点关联分析和针对罕见变异位点的负荷分析。结果在中国汉族人群NSCL/P的关联分析中发现,rs57699806的差异具有统计学意义(P=0.00013,OR=2.849,95%CI:1.691~4.800),其次为rs4732723(P=0.00650,OR=0.662,95%CI:0.491~0.892),rs7829267(P=0.00920,OR=1.496,95%CI:1.117~2.005),rs721619(P=0.01100,OR=1.474,95%CI:1.098~1.980)和rs7816586(P=0.04000,OR=1.310,95%CI:1.015~1.691)。其中rs4732723的C等位基因可能具有保护作用,而其他4个单核苷酸多态性位点的参考等位基因均可能增加NSCL/P的发生风险。罕见变异负荷分析2组差异无统计学意义(P>0.05)。结论本研究发现,EPHX2基因的5个单核苷酸多态性位rs57699806、rs4732723、rs7829267、rs721619和rs7816586与中国汉族人群NSCL/P的发生密切相关,其中rs57699806、rs4732723、rs7829267和rs7816586为新发现的易感位点。 展开更多

关键词 目标区域捕获测序 单核苷酸多态性 可溶性环氧化物水解酶2基因 非综合征型唇腭裂

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可溶性环氧化物水解酶在疾病中的作用 被引量：2

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作者 高婉婷 何静 吉日木图 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期128-132,共5页

花生四烯酸经过细胞色素P450(cytochrome P450,CYP)表氧化酶途径生成环氧二十碳三烯酸(epoxy eicosatrienoic acid,EETs),具有扩张血管、降低血压、抗炎等多种生物学功能。在哺乳动物系统中的可溶性环氧化物水解酶(soluble epoxide hydr... 花生四烯酸经过细胞色素P450(cytochrome P450,CYP)表氧化酶途径生成环氧二十碳三烯酸(epoxy eicosatrienoic acid,EETs),具有扩张血管、降低血压、抗炎等多种生物学功能。在哺乳动物系统中的可溶性环氧化物水解酶(soluble epoxide hydrolase,s EH)具有α/β水解酶折叠结构,对环氧脂肪酸具有高度的选择性。s EH能够快速水解EETs,增加患心血管疾病的风险。目前,研究发现s EH抑制剂具有抑制s EH活性、提高EETs的含量的重要功能。在多种疾病动物模型中应用s EH抑制剂或s EH基因敲除,证实s EH在心肌肥厚、糖尿病、高血压和肾病等疾病中发挥重要的生理作用。因此,s EH已被作为疾病治疗的新靶点而进行研究。本文就s EH的分布、作用机制以及s EH与疾病的关系等方面进行了讨论。 展开更多

关键词 可溶性环氧化物水解酶 环氧二十碳三烯酸 治疗靶点 sEH抑制剂 基因敲除

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可溶性环氧化物水解酶抑制剂的降血糖功效研究

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作者 高婉婷 明亮 +4 位作者 何静 白娜 郭雁 伊日贵 吉日木图 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第11期3149-3155,共7页

为探究可溶性环氧化物水解酶抑制剂(soluble epoxide hydrolase inhibitors,sEHI)的降血糖功效,试验以高脂饲料与链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)联合诱导的Ⅱ型糖尿病小鼠为研究对象,将C57BL/6J小鼠随机分为:正常对照组、糖尿病模型组... 为探究可溶性环氧化物水解酶抑制剂(soluble epoxide hydrolase inhibitors,sEHI)的降血糖功效,试验以高脂饲料与链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)联合诱导的Ⅱ型糖尿病小鼠为研究对象,将C57BL/6J小鼠随机分为:正常对照组、糖尿病模型组和sEHI组,sEHI组饲喂高脂饲料,每日灌胃sEHI(t-AUCB)1 mg/kg,连续灌胃4周;糖尿病模型组饲喂高脂饲料,每日灌胃同等计量的生理盐水;正常对照组饲喂普通饲料,每日灌胃同等体积的生理盐水。期间各组小鼠均自由采食及饮水,记录小鼠体重、血糖并进行口服葡萄糖耐量试验。试验结束后,测定血清血脂指标、肝脏过氧化指标并对小鼠胰岛组织进行病理学分析。结果显示,与糖尿病模型组相比,采用sEHI干预后糖尿病小鼠的空腹血糖显著降低(P<0.05),而葡萄糖耐量水平升高;小鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)水平明显降低,其中TC、TG水平与糖尿病模型组相比差异显著(P<0.05),而高密度脂蛋白与胆固醇比值(HDL/TC)水平则显著升高(P<0.05);与糖尿病模型组相比,sEHI干预组小鼠肝脏的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性显著提高(P<0.05),丙二醛(MDA)活性显著降低(P<0.05);小鼠的胰岛组织切片分析结果表明,sEHI对小鼠胰岛组织有明显的修复作用。综上所述,sEHI具有降血糖、减轻自由基损伤、抑制脂质过氧化、修复受损胰岛组织的作用。 展开更多

关键词 Ⅱ型糖尿病 可溶性环氧化物水解酶抑制剂 降血糖 血脂指标

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基于药效团模型筛选鳕鱼源可溶性环氧化物水解酶抑制肽及其作用机制 被引量：2

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作者 刘攀 涂茂林 +3 位作者 刘汉雄 程述震 徐献兵 杜明 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2023年第6期220-226,共7页

以可溶性环氧化物水解酶(soluble epoxide hydrolase,sEH)为靶点的生理性抑制剂在治疗高血压、炎症、心血管疾病及糖尿病等方面具有显著的疗效。以大西洋真鳕鱼多肽粉为原料,构建Hypogen药效团,结合分子对接法筛选含有色氨酸且抑制sEH... 以可溶性环氧化物水解酶(soluble epoxide hydrolase,sEH)为靶点的生理性抑制剂在治疗高血压、炎症、心血管疾病及糖尿病等方面具有显著的疗效。以大西洋真鳕鱼多肽粉为原料,构建Hypogen药效团,结合分子对接法筛选含有色氨酸且抑制sEH活性的生物活性肽,通过固相合成技术制备生物活性肽序列,并采用高效液相色谱法测定其sEH体外抑制活性。结果表明,利用最佳药效团模型(1号药效团)筛选出的四肽(PLLW)具备最优的Fit值(9.053)和LibDock评分(147.807),其半抑制浓度(IC_(50))为506.66μmol/L。分子对接结果表明,PLLW通过氢键和疏水相互作用与生理性底物竞争结合sEH活性位点,起到抑制活性。本研究为食源性混合体系中sEH抑制剂的筛选及机制研究提供了一种新思路,为sEH抑制剂产品的开发提供了一个合适的模型。 展开更多

关键词 鳕鱼 多肽 可溶性环氧化物水解酶 抑制剂 分子对接

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可溶性环氧化物水解酶在病理性心脏重构中的意义及研究进展 被引量：1

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作者 周洋 杨沁 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期2079-2085,共7页

心血管疾病是严重危害人类健康的重要疾病,其发病率一直居高不下,是导致城乡居民死亡的首要原因。心力衰竭(简称心衰)是多种心血管疾病的最终临床转归,而心脏重构是心衰的重要病理基础,其特征为伴有胚胎基因再表达的病理性心肌细胞肥大... 心血管疾病是严重危害人类健康的重要疾病,其发病率一直居高不下,是导致城乡居民死亡的首要原因。心力衰竭(简称心衰)是多种心血管疾病的最终临床转归,而心脏重构是心衰的重要病理基础,其特征为伴有胚胎基因再表达的病理性心肌细胞肥大和心肌细胞外基质过度纤维化或降解增加[1]。目前临床上缺乏对病理性心脏重构的特异性干预方法,因而对心衰的治疗仍面临未能从根本上阻断其发展进程的现状。 展开更多

关键词 可溶性环氧化物水解酶 心脏重构 多不饱和脂肪酸 细胞色素P450 环氧脂肪酸

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芽孢杆菌环氧化物水解酶的生信分析、异源表达及催化活性研究

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作者 吴燕红 陈妮 +2 位作者 徐婧然 郝昳昕 彭仁 《江西师范大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2024年第3期240-246,共7页

环氧化物水解酶是一类能催化环氧化物水解生成相应邻位二醇的酶,环氧化物水解酶不需辅酶与金属离子,具有底物专一性,在药物中间体的制备方面具有广泛的利用价值.在Bacillus sp.V3-13中的环氧化物水解酶含有383个氨基酸残基,理论分子量为... 环氧化物水解酶是一类能催化环氧化物水解生成相应邻位二醇的酶,环氧化物水解酶不需辅酶与金属离子,具有底物专一性,在药物中间体的制备方面具有广泛的利用价值.在Bacillus sp.V3-13中的环氧化物水解酶含有383个氨基酸残基,理论分子量为44119.61 Da,理论等电点为5.33,不稳定系数为39.25,总平均亲水性为-0.493,属于稳定的亲水蛋白.该酶无信号肽、二硫键、跨膜区,含有EHN(pfam06441)和MenH(COG0596)保守结构域.该文利用pET-28a(+)作为载体、E.coli BL21(DE3)作为宿主,对该酶在30℃、0.4 mmol·L^(-1) IPTG、诱导10 h的条件下成功进行了表达.经镍柱亲和层析纯化后,获得了电泳纯的重组环氧化物水解酶.重组环氧化物水解酶在20 min内对苄基缩水甘油醚、3-(1-萘氧基)-1,2-环氧丙烷和氧化苯乙烯的水解率分别为14.40%、11.05%和8.17%. 展开更多

关键词 环氧化物水解酶 表达与纯化 环氧化物 生信分析

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环氧化物水解酶基因多态与肝癌的遗传易感性 被引量：8

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作者 曹燕燕 边建超 +4 位作者 江峰 张竹梅 王启敏 王其军 汤伯明 《复旦学报（医学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第4期363-367,共5页

目的　探讨环氧化物水解酶基因 (EPHX1)多态与肝癌遗传易感性的关系。方法　应用PCR RFLP技术检测 88例肝癌患者和 10 4例人群对照的EPHX1基因型。结果　病例组和对照组EPHX1第 3外显子第 113密码子的Tyr/Tyr、Tyr/His和His/His基因型... 目的　探讨环氧化物水解酶基因 (EPHX1)多态与肝癌遗传易感性的关系。方法　应用PCR RFLP技术检测 88例肝癌患者和 10 4例人群对照的EPHX1基因型。结果　病例组和对照组EPHX1第 3外显子第 113密码子的Tyr/Tyr、Tyr/His和His/His基因型的频率分别为 0 .195、0 .4 0 2、0 .4 0 2和 0 .317、0 .4 2 3、0 .2 6 0 ,两组差异无显著性 ( χ2 =5 .17,P =0 .0 75 ) ;第 4外显子第 139密码子的His/His、His/Arg和Arg/Arg基因型的频率分别为 0 .85 2、0 .136、0 .0 12和 0 .6 83、0 .30 8、0 .0 0 9,两组差异有显著性 ( χ2 =7.92 ,P =0 .0 19)。具有 113His/His基因型者发生肝癌的危险性增加 ,OR值为 2 .38( 95 %CI :1.0 4～ 5 .4 9) ;具有 139His/Arg基因型者发生肝癌的危险性降低 ,OR值为 0 .36 ( 95 %CI:0 .16～ 0 .78)。将EPHX1第 3外显子基因型Tyr/His和His/His视为易感基因型 ,则吸烟与之在肝癌发生中存在交互作用 ,OR值为 3.90 ( 95 %CI :1.31～ 12 .0 2 ) ;将第 4外显子基因型His/His视为易感基因型 ,则吸烟和职业暴露与之在肝癌发生中均存在交互作用 ,其OR值分别为 4 .5 3( 95 %CI:1.5 6～ 13.6 1)和 8.4 4 ( 95 %CI :2 .36～ 31.90 )。结论　EPHX1可能为肝癌的易感基因之一。 展开更多

关键词 肝癌 环氧化物水解酶 基因多态 危险因素

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环氧化物水解酶的研究进展 被引量：3

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作者 娄文勇 赵莹 +1 位作者 彭飞 宗敏华 《华南师范大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2017年第6期1-6,共6页

环氧化物水解酶可高效率、高选择性地水解环氧化物生成手性邻二醇,对光学活性的邻二醇的合成和光学活性的环氧化物的制备具有重要意义.文章阐述了环氧化物水解酶的作用、来源、结构及其催化机制,进一步综述了环氧化物水解酶催化环氧化... 环氧化物水解酶可高效率、高选择性地水解环氧化物生成手性邻二醇,对光学活性的邻二醇的合成和光学活性的环氧化物的制备具有重要意义.文章阐述了环氧化物水解酶的作用、来源、结构及其催化机制,进一步综述了环氧化物水解酶催化环氧化物水解、环氧化物水解酶的克隆表达等研究进展. 展开更多

关键词 水解酶 环氧化物 邻二醇 催化

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微生物发酵法产环氧化物水解酶的研究 被引量：4

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作者 沈佳佳 张晓军 +1 位作者 汪圣华 周晓云 《浙江工业大学学报》 CAS 2006年第2期131-136,共6页

从土壤中筛选出一株能将模型底物缩水甘油苯基醚水解为3-苯氧基-1，2-一丙二醇的环氧化物水解酶的芽孢杆菌H-14-1．此茵培养的最佳碳源为1％的葡萄糖，最佳的氮源为1％的NH4Cl和1％牛肉膏，培养基的初始pH为6．5，培养的最佳温度和时问... 从土壤中筛选出一株能将模型底物缩水甘油苯基醚水解为3-苯氧基-1，2-一丙二醇的环氧化物水解酶的芽孢杆菌H-14-1．此茵培养的最佳碳源为1％的葡萄糖，最佳的氮源为1％的NH4Cl和1％牛肉膏，培养基的初始pH为6．5，培养的最佳温度和时问是30℃下培养36h，低浓度底物缩水甘油苯基醚对该酶具有诱导作用，同时培养基中金属Cu外离子对产酶有促进作用．酶学性质的试验表明，该酶的最适反应温度为35℃，最适pH为7．5，40℃以下酶具有较好的热稳定性，pH6．5～8．0范围内酶的稳定性较佳，Mg^2＋和Ca^2＋离子对酶的活性有促进作用． 展开更多

关键词 环氧化物水解酶 缩水甘油苯基醚 产酶条件 酶学性质

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宇佐美曲霉环氧化物水解酶基因的克隆与生物信息学分析 被引量：1

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作者 胡蝶 朱利娟 +4 位作者 邬敏辰 汪俊卿 唐存多 冯峰 余涛 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1244-1252,共9页

环氧化物水解酶(Epoxide hydrolase,EH)是酶法拆分消旋体环氧化物,制备光学活性环氧化物和邻二醇的重要酶之一。通过RT-PCR和新构建的THSO-PCR侧翼未知DNA序列扩增技术,克隆了一种来源于宇佐美曲霉(Aspergillus usamii)E001的EH基因,命... 环氧化物水解酶(Epoxide hydrolase,EH)是酶法拆分消旋体环氧化物,制备光学活性环氧化物和邻二醇的重要酶之一。通过RT-PCR和新构建的THSO-PCR侧翼未知DNA序列扩增技术,克隆了一种来源于宇佐美曲霉(Aspergillus usamii)E001的EH基因,命名为Aueh2(GenBank No.KF061095),并对该基因进行了相关生物信息学分析。Aueh2的DNA序列长度为2 481 bp,其中包含了5′端和3′端侧翼调控序列,6个内含子序列和编码cDNA序列。开放阅读框序列长度为1 188 bp,编码395个氨基酸,对应的蛋白质命名为AuEH2;该蛋白质为无信号肽的亲水蛋白质,其理论相对分子质量44.6 kD;其三维结构包含EH典型的"α/β"核心催化结构域和"帽子"结构域,活性中心由催化三联体Asp191、His369和Glu343组成。本课题研究成果为深入研究AuEH2及其应用奠定了基础。 展开更多

关键词 宇佐美曲霉 环氧化物水解酶 侧翼未知DNA序列 基因克隆 生物信息学分析

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环氧化物水解酶PvEH3的表达及手性邻二醇的合成 被引量：5

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作者 王瑞 许耀辉 +1 位作者 王克伟 邬敏辰 《化工进展》 EI CAS CSCD 北大核心 2018年第5期1933-1939,共7页

基于环氧化物水解酶(EHs)一级结构的计算机辅助分析,以菜豆(Phaseolus vulgaris)总RNA为模板,采用逆转录PCR和巢式PCR技术扩增了一种新型环氧化物水解酶(PvEH3)的编码基因pveh3。借助表达载体pET-28a(+)将pveh3导入大肠杆菌BL21(DE3)中... 基于环氧化物水解酶(EHs)一级结构的计算机辅助分析,以菜豆(Phaseolus vulgaris)总RNA为模板,采用逆转录PCR和巢式PCR技术扩增了一种新型环氧化物水解酶(PvEH3)的编码基因pveh3。借助表达载体pET-28a(+)将pveh3导入大肠杆菌BL21(DE3)中进行了异源表达。一级和三级结构表明,PvEH3属于α/β水解酶超家族,其催化三联体为Asp^(101)-His^(297)-Asp^(262),两个保守质子供体为Tyr^(150)和Tyr^(232)。在20℃、pH7.0的反应条件下,PvEH3能催化环氧苯乙烷及其4种衍生物的对映会聚水解。实验结果表明,PvEH3对环氧苯乙烷及其对位取代环氧底物(93.2%、86.6%和85.1%ee_p)的对映会聚性优于其间位取代环氧底物(37.1%和53.3%ee_p);PvEH3针对5种环氧底物中的环氧苯乙烷具有最高的区域选择性,区域选择性系数α_S和β_R分别为93.9%和99.0%。PvEH3的发现增加了区域选择性高且互补的EHs数目,为单酶催化环氧化物的对映会聚水解提供了更多的选择余地。 展开更多

关键词 环氧化物水解酶 生物催化 表达 区域选择性 对映会聚水解

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原发性肝癌人群中环氧化物水解酶基因多态性的研究

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作者 唐耘天 李辛平 +3 位作者 刘天奇 杨建荣 罗建强 梁中骁 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2012年第11期1798-1800,共3页

目的:探讨原发性肝癌人群中环氧化物水解酶基因多态性与肝癌发生发展的关系。方法:以广西壮族自治区人民医院2008年10月至2010年10月收治的肝癌患者与健康体检者各150名为研究对象,利用限制性片段长度多态性检测法检测研究对象该酶的基... 目的:探讨原发性肝癌人群中环氧化物水解酶基因多态性与肝癌发生发展的关系。方法:以广西壮族自治区人民医院2008年10月至2010年10月收治的肝癌患者与健康体检者各150名为研究对象,利用限制性片段长度多态性检测法检测研究对象该酶的基因多态性,进行对比分析。结果:环氧化物水解酶基因多态性型别在两组研究对象中出现的频率差异无显著性(P>0.05);变异等位基因出现频率与以往结果相一致。结论:环氧化物水解酶基因多态性与肝癌的发生发展无明确的相关关系。 展开更多

关键词 肝肿瘤 环氧化物水解酶 基因多态性

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以甘油为碳源分批补料高密度发酵产环氧化物水解酶 被引量：4

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作者 陈冠宇 袁建锋 +2 位作者 吴绵斌 林建平 杨立荣 《高校化学工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第3期600-605,共6页

环氧化物水解酶能够立体选择性地催化环氧化合物生成相应的二醇,具有重要的工业应用价值。通过摇瓶实验研究了不同甘油浓度对重组大肠杆菌Rosetta(DE3)/pET28(a)-CESH生长的影响,确定了IPTG最佳诱导时机、诱导浓度和诱导后培养温度。在1... 环氧化物水解酶能够立体选择性地催化环氧化合物生成相应的二醇,具有重要的工业应用价值。通过摇瓶实验研究了不同甘油浓度对重组大肠杆菌Rosetta(DE3)/pET28(a)-CESH生长的影响,确定了IPTG最佳诱导时机、诱导浓度和诱导后培养温度。在15 L发酵罐进行放大培养,对比分批补料和批次发酵,前者生产率达6.71×105 U·(L·h)-1,比批次发酵提高了33.3%,酶活达到2.0×107 U·L-1,所用的时间,比批次发酵缩短了10 h,适合于工业应用。 展开更多

关键词 重组大肠杆菌 环氧化物水解酶 高密度发酵 甘油抑制

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底物诱导和分批补料对巨大芽孢杆菌环氧化物水解酶生物合成的影响 被引量：2

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作者 朱智东 唐燕发 +2 位作者 许建和 叶勤 储炬 《华东理工大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期243-246,共4页

从土壤中筛选得到的巨大芽孢杆菌 ( Bacillus megaterium) ECU1 0 0 1所产环氧化物水解酶能高度对映选择性地水解外消旋缩水甘油苯基醚。在摇瓶和 5L发酵罐中培养时初始产酶水平分别为 1 1 .0 U/L和 31 .0 U/L。通过添加底物诱导 ,可使... 从土壤中筛选得到的巨大芽孢杆菌 ( Bacillus megaterium) ECU1 0 0 1所产环氧化物水解酶能高度对映选择性地水解外消旋缩水甘油苯基醚。在摇瓶和 5L发酵罐中培养时初始产酶水平分别为 1 1 .0 U/L和 31 .0 U/L。通过添加底物诱导 ,可使摇瓶培养中酶量达到 61 .0 U/L;在 5L发酵罐中通过补料分批发酵 ,酶活可进一步提高到 96. 展开更多

关键词 缩水甘油苯基醚 环氧化物水解酶 巨大芽孢杆菌 底物诱导 分批补料发酵 产酶水平 生物合成

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桃内酯芳香物质合成相关的环氧化物水解酶候选基因的鉴别 被引量：1

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作者 张圆圆 刘文敬 +2 位作者 张斌斌 马瑞娟 俞明亮 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2023年第1期178-186,共9页

环氧化物水解酶(EH)因其重要的生物学功能而在哺乳动物以及诸多植物中被广泛关注,更是果实典型“桃香”气味——内酯芳香物质生物合成的一个重要酶,但在桃等果实中的研究较少且鲜有该家族成员的系统报道或生物学功能的解析。为鉴别桃果... 环氧化物水解酶(EH)因其重要的生物学功能而在哺乳动物以及诸多植物中被广泛关注,更是果实典型“桃香”气味——内酯芳香物质生物合成的一个重要酶,但在桃等果实中的研究较少且鲜有该家族成员的系统报道或生物学功能的解析。为鉴别桃果实中与内酯芳香物质合成相关的环氧化物水解酶家族成员,本研究使用了同源序列比对和关键词搜索等方法,在桃中共筛选获得7个环氧化物水解酶家族成员。序列比对分析结果表明,这7个成员均有典型的α/β水解酶折叠结构和环氧化物水解酶保守的序列片段。进化树分析结果显示,桃的环氧化物水解酶成员与拟南芥、烟草等其他物种中已被鉴别的环氧化物水解酶成员的亲缘关系很近。基因表达分析结果显示,在桃的发育成熟进程中7个EH基因均在果实的中果皮表达,在果实发育前期均呈现较高的表达水平,转录模式包括3种类型。综合已报道的内酯芳香物质的生物合成通路以及前人指出的内酯芳香物质含量在果实成熟期开始显著增加的变化规律,推测桃环氧化物水解酶成员的表达量可能与内酯芳香物质的积累负相关。本研究结果为后续深入挖掘桃或者其他果实环氧化物水解酶家族成员的生物学功能尤其是参与内酯芳香物质合成的分子机理提供了参考。 展开更多

关键词 桃 内酯芳香物质 环氧化物水解酶

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环氧化物水解酶2在肝细胞癌中的表达水平与功能作用 被引量：1

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作者 张文桃 胡艳芬 +4 位作者 吴昊 刘铭 李莉 杜根来 朱剑军 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期505-514,共10页

本研究通过公共数据和实验数据,全面分析环氧化物水解酶2(epoxide hydrolase 2,EPHX2)在肝细胞癌中的表达情况、功能作用以及预后意义。利用GEO和MitoCarta数据集,筛选肝细胞癌中呈差异表达的线粒体相关基因;利用TCGA数据库分析EPHX2及... 本研究通过公共数据和实验数据,全面分析环氧化物水解酶2(epoxide hydrolase 2,EPHX2)在肝细胞癌中的表达情况、功能作用以及预后意义。利用GEO和MitoCarta数据集,筛选肝细胞癌中呈差异表达的线粒体相关基因;利用TCGA数据库分析EPHX2及其相关基因在肝细胞癌中的表达水平;运行R包绘制Kaplan-Meier生存曲线和功能富集分析;基于STRING和GSEA构建蛋白质互作网络和基因集富集分析;荧光定量PCR和GEO数据集验证EPHX2在肝细胞癌中的表达水平。本研究共筛选得到15个在肝细胞癌中呈差异表达的线粒体相关基因。EPHX2在肝细胞癌组织中的表达水平显著降低(P<0.01)。EPHX2表达水平与肝癌患者性别、分期和级别有关,而与年龄、T分期等因素无关。与EPHX2低表达组肝癌患者相比,EPHX2高表达组肝癌患者预后较好。功能富集结果显示,EPHX2与补体途径、脂肪酸降解等信号通路有关。蛋白质互作网络结果显示,EPHX2与HAO1、AGXT、ACOX1、GSTκ1、SCP-2、CAT、CYP2C8,CYP2C9,CYP2B6,和CYP2J2等密切相关。GSEA结果显示,EPHX2低表达组与肝癌细胞增殖、肝癌复发等基因集正相关。荧光定量PCR和GEO数据集验证结果显示,EPHX2在肝细胞癌组织和肝癌细胞株中呈显著低表达。EPHX2在肝细胞癌中呈显著低表达,提示其可能在肝细胞癌发生发展过程中发挥抑癌基因作用,但具体作用机制还需进一步验证。 展开更多

关键词 肝细胞癌 环氧化物水解酶2 公共数据库

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绿豆环氧化物水解酶基因的克隆、分析及表达 被引量：2

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作者 姚瑶 胡蝶 +1 位作者 邬敏辰 叶慧华 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期138-145,共8页

环氧化物水解酶可催化制备高光学纯度的环氧化物及邻二醇等高价值手性药物中间体。本研究采用RT-PCR和THSO-PCR扩增侧翼未知DNA序列技术从绿豆(Vigna radiata)中克隆了一种新型环氧化物水解酶Vr EH3的基因Vreh3,Vreh3编码区DNA序列长度... 环氧化物水解酶可催化制备高光学纯度的环氧化物及邻二醇等高价值手性药物中间体。本研究采用RT-PCR和THSO-PCR扩增侧翼未知DNA序列技术从绿豆(Vigna radiata)中克隆了一种新型环氧化物水解酶Vr EH3的基因Vreh3,Vreh3编码区DNA序列长度为1 178 bp,包含2个142 bp和79 bp的内含子,以及957 bp的开放阅读框,编码318个氨基酸。Vr EH3的理论相对分子质量和等电点分别为36.2×103和5.59;保守的催化三联体为Asp101-Asp262-His297。将Vreh3与表达载体p ET-28a(+)连接,转化大肠杆菌BL21(DE3)获得重组Vr EH3。该酶可对映归一性水解外消旋环氧苯乙烷((R,S)-SO)产生(R)-苯基乙二醇,得率高达79.4%,对映体过量值(e.e.值)为94.7%。 展开更多

关键词 绿豆 环氧化物水解酶 基因克隆 对映归一性水解 (R)-苯基乙二醇

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