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光合细菌Chromatium vinosum可溶性氢酶小亚基基因的克隆 被引量:6
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作者 龙敏南 苏文金 +3 位作者 S P J Albracht 吴健民 张凤章 许良树 《厦门大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期247-252,共6页
光合细菌 C.vinosum可溶性氢酶由 52 k Da和 2 1.5k Da两个亚基组成 .该酶大亚基 N-末端氨基酸序列为 :SRTITIEPVTRXEGHAR,小亚基 N末端氨基酸序列为 :STQPKITVATXL DG.根椐大、小亚基 N-末端氨基酸序列设计两套引物 ,Primer1:5′g AT(g... 光合细菌 C.vinosum可溶性氢酶由 52 k Da和 2 1.5k Da两个亚基组成 .该酶大亚基 N-末端氨基酸序列为 :SRTITIEPVTRXEGHAR,小亚基 N末端氨基酸序列为 :STQPKITVATXL DG.根椐大、小亚基 N-末端氨基酸序列设计两套引物 ,Primer1:5′g AT(g/ C) g T g AT(g/ C) g T(g/ A) Cg3′和 Primer2 :5′A g C AC(C/ g) CAg CC(C/ g) AA(g/ A) ATC3′,通过 PCR扩增获得 0 .6 kb的扩增片段 .克隆并对该片段序列进行分析 ,结果表明 ,该片段包含小亚基基因的全序列 .可溶性氢酶小亚基由 179个氨基酸残基组成 ,分子量为 2 1.8k Da,含有 Ni Fe-氢酶保守的序列框 :Cxx C......Gx Cxxx G...... 展开更多
关键词 VINOSUM 可溶性氢酶 基因克隆 光合细菌 小亚基
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光合细菌Chromatium vinosum可溶性氢酶的分离提纯及特性 被引量:3
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作者 龙敏南 苏文金 +2 位作者 S.P.J.ALBRACHT 张凤章 许良树 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 2000年第6期710-715,共6页
光合细菌 Chromatium vinosum可溶性氢酶经 4次柱层析 (Whatman DE- 52 ,TSK- DEAE,Ultragel Ac A- 44 ,Mono Q)分离提纯后被纯化 630倍 ,得率为 33.5% .可溶性氢酶催化放氢比活性为 7.5μmol· min-1· mg-1.SDS- PAGE结果显... 光合细菌 Chromatium vinosum可溶性氢酶经 4次柱层析 (Whatman DE- 52 ,TSK- DEAE,Ultragel Ac A- 44 ,Mono Q)分离提纯后被纯化 630倍 ,得率为 33.5% .可溶性氢酶催化放氢比活性为 7.5μmol· min-1· mg-1.SDS- PAGE结果显示 ,可溶性氢酶由 52 k D和 2 1 .5k D两个亚基组成 .大亚基 N端氨基酸序列为 :SRTITIEPVTRXEGHAR;小亚基 N端氨基酸序列为 :STQPKIT-VATXLDG.氧化态可溶性氢酶在 54K时产生了典型的 Ni( )电子顺磁共振 (EPR)信号 (gxyz=2 .37、2 .1 6、2 .0 1 6和 gxyz=2 .30、2 .2 3、2 .0 1 6) .研究结果表明 ,C.vinosum可溶性氢酶是一种新的催化放氢的 Ni Fe-氢酶 . 展开更多
关键词 可溶性氢酶 纯化 特性 光合细菌
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光合细菌Chromatium vinosum可溶性氢酶的EPR研究 被引量:2
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作者 龙敏南 苏文金 +2 位作者 Albracht S.P.J 张凤章 许良树 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2001年第7期1137-1140,共4页
光合细菌 Chromatium vinosum可溶性氢酶经 5次柱层析 ( DE-2 3,TSK-DEAE( ) ,Ultragel Ac A-4 4 ,TSK-DEAE( ) ,Superdex TM75 )分离后被纯化 365倍 ,得率为 32 % ,其催化放氢的活性为 8.4μmol H2 /( min· mg prot) .氧化态可... 光合细菌 Chromatium vinosum可溶性氢酶经 5次柱层析 ( DE-2 3,TSK-DEAE( ) ,Ultragel Ac A-4 4 ,TSK-DEAE( ) ,Superdex TM75 )分离后被纯化 365倍 ,得率为 32 % ,其催化放氢的活性为 8.4μmol H2 /( min· mg prot) .氧化态可溶性氢酶在 4 5 K下 ,产生了 Ni( )的典型 EPR信号 ( gx,y,z=2 .37,2 .1 6,2 .0 1 6和 gx,y,z=2 .30 ,2 .2 3,2 .0 1 6) ;在 1 0 K下 ,没有出现膜结合态氢酶中存在的 [3Fe-4 S]簇特征 EPR信号 .可溶性氢酶被 H2 还原后 ,Ni( )的特征 EPR信号消失 ,同时出现一个 [4 Fe-4 S]簇的特征 EPR信号 ( gx,y,z=1 .88,1 .90 ,2 .0 4 5 ) .研究结果表明 ,C.vinosum可溶性氢酶在结构和功能上不同于膜结合态氢酶 ,是一种新的催化放氢的 Ni 展开更多
关键词 CHROMATIUM VINOSUM 可溶性氢酶 EPR谱 光合细菌 催化效
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光合细菌Chromatium vinosum可溶性氢酶的某些理化性质
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作者 龙敏南 苏文金 +2 位作者 S P J A lbracht 张凤章 许良树 《厦门大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期1283-1288,共6页
光合细菌 Chromatium vinosum含有一种可溶性氢酶和一种膜结合态氢酶 .在培养基中加入终浓度为 1μmol/ L的 Se,细胞中可溶性氢酶的含量增加 1.7倍 .C.vinosum可溶性氢酶可以利用甲基紫精、苄基紫精和细胞色素 C为电子载体催化吸氢与放... 光合细菌 Chromatium vinosum含有一种可溶性氢酶和一种膜结合态氢酶 .在培养基中加入终浓度为 1μmol/ L的 Se,细胞中可溶性氢酶的含量增加 1.7倍 .C.vinosum可溶性氢酶可以利用甲基紫精、苄基紫精和细胞色素 C为电子载体催化吸氢与放氢 ,但不能利用 NAD,NADH,NADP和NADPH等进行催化放氢和吸氢 .可溶性氢酶易被 CO所抑制 ,在反应系统中加入终浓度为 2 .5μmol/ L的 CO时 ,可抑制氢酶最大放氢活性的一半 .与 C.vinosum膜结合态氢酶相比 ,可溶性氢酶较易被胰蛋白酶降解而使氢酶催化吸氢和放氢的活性降低 . 展开更多
关键词 CHROMATIUM VINOSUM 可溶性氢酶 理化特性 光合细菌 最大放活性 催化吸
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产酸克雷伯氏菌氢酶分离提纯与特性的初步研究 被引量:1
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作者 徐云玲 龙传南 +2 位作者 徐惠娟 邬小兵 张凤章 《厦门大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期709-712,共4页
采用硫酸铵沉淀和柱层析(DEAE-Sepharose F.F.,Sephacryl S-200,TSK-DEAE)初步分离纯化了产酸克雷伯氏菌(Klebsiella oxytoca)HP1可溶性氢酶,研究了温度、pH值、电子载体等对氢酶催化放氢活性的影响.研究表明,可溶性氢酶催化放氢的最适... 采用硫酸铵沉淀和柱层析(DEAE-Sepharose F.F.,Sephacryl S-200,TSK-DEAE)初步分离纯化了产酸克雷伯氏菌(Klebsiella oxytoca)HP1可溶性氢酶,研究了温度、pH值、电子载体等对氢酶催化放氢活性的影响.研究表明,可溶性氢酶催化放氢的最适温度为30℃,催化放氢的最适pH值为7.5,甲基紫晶(MV)是氢酶催化放氢的最适人工电子载体,氧对氢酶催化活性有较大的抑制作用. 展开更多
关键词 产酸克雷伯氏菌 可溶性氢酶 分离纯化 催化放
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