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肠毒性大肠埃希菌肠毒素LTa基因特异性EMA-PCR检测方法的建立: 1; 作者赵素君曹冶 +6 位作者谢晶李江凌王秋实叶勇刚罗丹丹叶健强廖党金《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2012年第11期8-11,共4页; 由于传统PCR技术无法区分样品中的死细菌与活细菌,为避免因样品中含有死细菌而造成的假阳性检测结果,本研究根据肠毒性大肠埃希菌(ETEC)不耐热肠毒素LTa基因设计特异性引物,利用叠氮溴乙锭(EMA)处理菌液,沸水浴法制备细菌裂解液,优化PC... 展开更多; 关键词肠毒性大肠埃希菌不耐热肠毒素基因叠氮溴乙锭-聚合酶链反应检测; 在线阅读下载PDF 职称材料

肠炎沙门氏菌EMA-PCR检测方法的建立被引量：6: 2; 作者颜成英汤晓艳 +3 位作者王敏康大成李朋颖郑锌《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第6期90-93,共4页; 将荧光染料叠氮溴化乙锭(ethidium monoazide,EMA)与聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测技术相结合,用于肠炎沙门氏菌活菌的检测。实验参数优化结果表明,当EMA终质量浓度50μg/mL、曝光时间10 min时,可以抑制约107 CFU... 展开更多; 关键词叠氮溴乙锭聚合酶链式反应肠炎沙门氏菌; 在线阅读下载PDF 职称材料

EMA-PCR法快速检测啤酒中腐败短乳杆菌被引量：4: 3; 作者马艳琳徐振波 +2 位作者刘君彦汪东风邓阳《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第8期271-276,共6页; 将叠氮溴乙锭(ethidium bromide monoazide,EMA)与聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术相结合,以酒花耐受基因hor C为靶基因,用啤酒腐败短乳杆菌基因组DNA作为模板进行扩增。结果发现,在前处理过程中加入EMA,当终质量浓... 展开更多; 关键词叠氮溴乙锭聚合酶链式反应啤酒腐败菌短乳杆菌酒花耐受基因; 在线阅读下载PDF 职称材料

PMA与PCR结合的细菌活细胞检测方法被引量：28: 4; 作者罗剑飞林炜铁郭勇《华南理工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第9期142-146,共5页; 基于PCR的分子生物技术在检测过程中不能有效区分样品中细菌的死活状态,这会导致对细菌数量的错误估计.文中用叠氮溴化丙锭(PMA)对样品基因组提取进行前处理,使PMA与样品中死细胞的DNA分子共价交联,并抑制该DNA分子的PCR扩增.结果表明:... 展开更多; 关键词叠氮溴化丙锭脱氧核糖核酸聚合酶链反应活细胞检测; 在线阅读下载PDF 职称材料

荧光染料EMA在实时荧光PCR定量检测海产品中致病性副溶血弧菌活细胞中的应用被引量：7: 5; 作者祝儒刚《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第20期206-210,共5页; 将荧光染料——叠氮溴乙锭(ethidium bromide monoazide,EMA)与实时荧光-聚合酶链式反应(real-time poly-merase chain reaction,RT-PCR)技术相结合,对其在RT-PCR定量检测海产品中致病性副溶血弧菌活细胞中的应用进行研究。纯培养条件下... 展开更多; 关键词叠氮溴乙锭(EMA) 实时荧光聚合酶链式反应(RT-PCR) 海产品活细胞副溶血弧菌检测; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名肠毒性大肠埃希菌肠毒素LTa基因特异性EMA-PCR检测方法的建立: 1; 作者赵素君曹冶谢晶李江凌王秋实叶勇刚罗丹丹叶健强廖党金; 机构四川省畜牧科学研究院; 出处《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2012年第11期8-11,共4页; 基金国家科技支撑计划项目(2006BAD04A17 2012BAD12B03) 四川省科技支撑计划项目(2010NZ0106); 文摘由于传统PCR技术无法区分样品中的死细菌与活细菌,为避免因样品中含有死细菌而造成的假阳性检测结果,本研究根据肠毒性大肠埃希菌(ETEC)不耐热肠毒素LTa基因设计特异性引物,利用叠氮溴乙锭(EMA)处理菌液,沸水浴法制备细菌裂解液,优化PCR条件,建立一种检测肠毒性大肠埃希菌活菌肠毒素基因的EMA-PCR方法。肠毒性大肠埃希菌CVCC196、CVCC197、CVCC200均能扩增出大小为438bp的特异性条带,而其他对照菌株未扩增出条带。经EMA处理,除了完全死菌组外,含有10mL/L～1 000mL/L活菌的混合悬液均可扩增出目的片段。因此,成功建立了一种快速、有效的检测肠毒性大肠埃希菌活菌肠毒素基因的EMA-PCR方法,该方法较传统PCR大大提高了检测的准确性,灵敏度可达19cfu/mL。; 关键词肠毒性大肠埃希菌不耐热肠毒素基因叠氮溴乙锭-聚合酶链反应检测; Keywords ETEC LTa gene EMA-PCR detection; 分类号 S852.612 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名肠炎沙门氏菌EMA-PCR检测方法的建立被引量：6: 2; 作者颜成英汤晓艳王敏康大成李朋颖郑锌; 机构南京农业大学教育部肉品加工与质量控制重点实验室中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所; 出处《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第6期90-93,共4页; 基金 "十二五"国家科技支撑计划项目(2012BAD28B03) 国家自然科学基金青年科学基金项目(31000799) 国家现代农业产业技术体系专项(CARS-42); 文摘将荧光染料叠氮溴化乙锭(ethidium monoazide,EMA)与聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测技术相结合,用于肠炎沙门氏菌活菌的检测。实验参数优化结果表明,当EMA终质量浓度50μg/mL、曝光时间10 min时,可以抑制约107 CFU/mL肠炎沙门氏菌死菌DNA的扩增;活菌灵敏度检测结果显示,EMA-PCR方法检测限与单一PCR方法一样均为27.5 CFU/mL,说明EMA处理既不会影响活菌DNA的扩增也不会影响PCR方法的灵敏度。利用EMA-PCR方法检测死活混合菌液时发现,添加EMA的实验组DNA条带亮度会随着活菌比例的降低而变暗,且当样品中全是死菌时,没有目标条带出现;而不添加EMA的对照组DNA条带亮度没有变化,当样品中全是死菌时,目标条带依然清晰可见。说明添加EMA可以达到区分死活菌的目的,EMA-PCR方法只检测样品中的活菌,避免了死菌DNA造成假阳性的可能性。; 关键词叠氮溴乙锭聚合酶链式反应肠炎沙门氏菌; Keywords ethidium monoazide bromide （EMA） polymerase chain reaction （PCR） Salmonella enteritidis; 分类号 TS251.7 [轻工技术与工程—农产品加工及贮藏工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名EMA-PCR法快速检测啤酒中腐败短乳杆菌被引量：4: 3; 作者马艳琳徐振波刘君彦汪东风邓阳; 机构中国海洋大学食品科学与工程学院啤酒生物发酵工程国家重点实验室华南理工大学食品科学与工程学院; 出处《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第8期271-276,共6页; 基金中国博士后科学基金资助项目(2015M582063 2014T70810) 南昌大学食品科学与技术国家重点实验室开放基金资助项目(SKLF-KF-201415); 文摘将叠氮溴乙锭(ethidium bromide monoazide,EMA)与聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术相结合,以酒花耐受基因hor C为靶基因,用啤酒腐败短乳杆菌基因组DNA作为模板进行扩增。结果发现,在前处理过程中加入EMA,当终质量浓度小于20μg/m L时,对活的短乳杆菌中靶基因的扩增没有明显抑制作用;而当EMA终质量浓度为1.0μg/m L时可有效抑制10~5 CFU/m L短乳杆菌死细胞的扩增。本实验建立的EMA-PCR检测方法的灵敏度为10~4活细胞/m L酒液样品。验证实验结果表明,在13株乳酸菌中,建立的hor C特异性EMA-PCR能有效检测到其中的全部5株啤酒污染菌,同时可区分这5株菌的活/死细胞混合体系,降低检测过程中的假阳性。; 关键词叠氮溴乙锭聚合酶链式反应啤酒腐败菌短乳杆菌酒花耐受基因; Keywords ethidium bromide monoazide (EBM) polymerase chain reaction (PCR) beer spoilage bacteria Lactobacillus brevis horC; 分类号 TS261.1 [轻工技术与工程—发酵工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名PMA与PCR结合的细菌活细胞检测方法被引量：28: 4; 作者罗剑飞林炜铁郭勇; 机构华南理工大学生物科学与工程学院; 出处《华南理工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第9期142-146,共5页; 基金广东省农业科技攻关项目(2008B021000036); 文摘基于PCR的分子生物技术在检测过程中不能有效区分样品中细菌的死活状态,这会导致对细菌数量的错误估计.文中用叠氮溴化丙锭(PMA)对样品基因组提取进行前处理,使PMA与样品中死细胞的DNA分子共价交联,并抑制该DNA分子的PCR扩增.结果表明:当样品中PMA质量浓度大于3μg/mL、曝光时间大于3 min时,PMA可抑制细胞膜破裂的E.coli死细胞DNA的PCR扩增;PMA质量浓度高于50μg/mL时对活细胞DNA的PCR扩增有一定影响;当浊度小于10NTU时,PMA能有效地抑制死细胞DNA的PCR扩增,而当浊度大于100NTU时,PMA失去效果.; 关键词叠氮溴化丙锭脱氧核糖核酸聚合酶链反应活细胞检测; Keywords propidium monoazide deoxyribonucleic acid polymerase chain reaction viable cell detection; 分类号 Q7 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名荧光染料EMA在实时荧光PCR定量检测海产品中致病性副溶血弧菌活细胞中的应用被引量：7: 5; 作者祝儒刚; 机构辽宁大学轻型产业学院; 出处《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第20期206-210,共5页; 基金辽宁大学青年科学基金项目(2009LDQN21); 文摘将荧光染料——叠氮溴乙锭(ethidium bromide monoazide,EMA)与实时荧光-聚合酶链式反应(real-time poly-merase chain reaction,RT-PCR)技术相结合,对其在RT-PCR定量检测海产品中致病性副溶血弧菌活细胞中的应用进行研究。纯培养条件下,在2.2×102～2.2×107CFU范围内细胞数的常用对数值与Ct值之间呈严格的负相关性,并且不添加EMA时的检测灵敏度(22CFU)略大于添加EMA(2.2×102CFU)时的检测灵敏度;人工污染牡蛎样品,利用RT-PCR和EMA RT-PCR以及平板计数法分别进行副溶血弧菌定量检测,结果表明EMA RT-PCR更接近于平板计数的结果,单纯RT-PCR定量的结果偏大;在采集的45份海产品样品中,不经富集培养,利用EMA RT-PCR方法仅有一份牡蛎样品呈阳性,牡蛎样品污染程度为114CFU/g。该方法能够快速、灵敏、准确地进行海产品中致病性副溶血弧菌活细胞的定量检测,具有很好的应用价值。; 关键词叠氮溴乙锭(EMA) 实时荧光聚合酶链式反应(RT-PCR) 海产品活细胞副溶血弧菌检测; Keywords ethidium bromide monoazide（EMA） real-time polymerase chain reaction（RT-PCR） seafood viable cells Vibrio parahaemolyticus detection; 分类号 TS201.6 [轻工技术与工程—食品科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	肠毒性大肠埃希菌肠毒素LTa基因特异性EMA-PCR检测方法的建立	赵素君曹冶谢晶李江凌王秋实叶勇刚罗丹丹叶健强廖党金	《动物医学进展》 CSCD 北大核心	2012	0	在线阅读下载PDF 职称材料
2	肠炎沙门氏菌EMA-PCR检测方法的建立	颜成英汤晓艳王敏康大成李朋颖郑锌	《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心	2014	6	在线阅读下载PDF 职称材料
3	EMA-PCR法快速检测啤酒中腐败短乳杆菌	马艳琳徐振波刘君彦汪东风邓阳	《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心	2017	4	在线阅读下载PDF 职称材料
4	PMA与PCR结合的细菌活细胞检测方法	罗剑飞林炜铁郭勇	《华南理工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心	2010	28	在线阅读下载PDF 职称材料
5	荧光染料EMA在实时荧光PCR定量检测海产品中致病性副溶血弧菌活细胞中的应用	祝儒刚	《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心	2011	7	在线阅读下载PDF 职称材料