高粱微卫星非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳条件的优化 被引量：7

1

作者 许丽 李玥莹 +3 位作者 邹剑秋 林凤 许昕 陶思源 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2007年第2期328-329,共2页

以高粱抗、感丝黑穗病3号生理小种部分品种(S95062B、7050B、2381R、LR625;622A、622B、矮4)为材料,利用微卫星标记结合非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术进行抗病基因的引物筛选。通过比较各因子对电泳体系的影响,建立了一个高粱微卫星非... 以高粱抗、感丝黑穗病3号生理小种部分品种(S95062B、7050B、2381R、LR625;622A、622B、矮4)为材料,利用微卫星标记结合非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术进行抗病基因的引物筛选。通过比较各因子对电泳体系的影响,建立了一个高粱微卫星非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的优化体系:电泳时间为92～105min;银染温度为27.8～29.0℃;显色温度为32℃左右。 展开更多

关键词 高粱 微卫星 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 银染

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香菇微卫星标记变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的应用及正交优化 被引量：2

2

作者 张丹 颜梦秋 +3 位作者 张美彦 谭琦 宋春艳 尚晓冬 《江苏农业科学》 北大核心 2021年第5期57-61,共5页

变性聚丙烯酰胺凝胶电泳是一种高效鉴定微卫星分子标记的方法,广泛应用于种质鉴定、遗传连锁图谱构建及分子标记辅助育种等研究中。该方法由于操作繁琐,目前在食用菌领域的应用尚不广泛。以香菇为研究对象,建立变性聚丙烯酰胺凝胶电泳... 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳是一种高效鉴定微卫星分子标记的方法,广泛应用于种质鉴定、遗传连锁图谱构建及分子标记辅助育种等研究中。该方法由于操作繁琐,目前在食用菌领域的应用尚不广泛。以香菇为研究对象,建立变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的检测流程,并利用正交试验对检测流程中涉及的加样缓冲液与PCR反应液的体积比、95℃变性时间、置于冰上冷却时间、银染时间、银染后胶板去离子水洗时间等5个操作节点进行优化。结果表明,加样缓冲液与PCR反应液体积比为1∶2,95℃变性2~5min,置于冰上冷却15~20min,银染7min,银染后胶板用去离子水洗5~10s是正交试验的较优处理组合。试验建立了香菇微卫星标记变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测操作规程,该操作规程具有成本低、效率高、易批量化操作等优点,对其他食用菌微卫星标记的应用具有重要的参考价值。 展开更多

关键词 香菇 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 微卫星标记 正交试验设计 银染试验

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癸基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析非变性蛋白质分子量的适用性鉴定

3

作者 臧家涛 徐竞 +2 位作者 李东红 刘建仓 刘良明 《实验技术与管理》 CAS 北大核心 2012年第4期55-58,61,共5页

目的:鉴定癸基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDecS-PAGE)是否适于分析非变性蛋白质的分子量。方法:以不同SDecS-PAGE凝胶、电泳缓冲液分析5种非变性标准分子量蛋白质,观察蛋白质亚基解离情况,测定分子量对数值(log Mr)与迁移率x之间的相... 目的:鉴定癸基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDecS-PAGE)是否适于分析非变性蛋白质的分子量。方法:以不同SDecS-PAGE凝胶、电泳缓冲液分析5种非变性标准分子量蛋白质,观察蛋白质亚基解离情况,测定分子量对数值(log Mr)与迁移率x之间的相关性。结果:5种标准分子量蛋白质的四级结构完整,log Mr与x线性相关性较低;但其中的α-牛乳白蛋白、鸡蛋清白蛋白、牛血清白蛋白的log Mr与x线性相关性较好,相关系数平方值(R2)>0.94。结论:SDecS-PAGE可用于测定有限种类的非变性蛋白质的分子量。 展开更多

关键词 癸基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳 非变性蛋白质 分子量测定 SDecS-PAGE

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非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测新疆特种乳中掺加的牛乳 被引量：3

4

作者 孙国栋 李爱丽 +1 位作者 赵仲凯 杨洁 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2023年第6期50-56,共7页

新疆特种乳资源丰富,具有重要的商业价值。近年来乳制品掺假问题时有发生,准确鉴别特种乳中乳源动物成分,防止牛乳掺假具有重要的意义。本研究采用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(native-PAGE)对驼乳、马乳、驴乳、山羊乳与牛乳等特种乳的乳... 新疆特种乳资源丰富,具有重要的商业价值。近年来乳制品掺假问题时有发生,准确鉴别特种乳中乳源动物成分,防止牛乳掺假具有重要的意义。本研究采用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(native-PAGE)对驼乳、马乳、驴乳、山羊乳与牛乳等特种乳的乳清蛋白及酪蛋白进行乳间差异性分析,建立基于牛乳特征蛋白质多态性的检测方法,并研究不同热处理工艺对检测方法稳定性、灵敏度的影响。结果表明,牛β-乳球蛋白可作为特种乳中掺加牛乳的检测靶标,热处理会使样品中蛋白质发生变性,导致掺加牛乳检出限的升高。基于牛β-乳球蛋白的条带强度与牛乳掺加百分比建立回归方程,相关系数为0.9779~0.9998,定量范围在5%~100%之间。本研究为新疆特种乳中掺加牛乳的检测,提供了一种准确、灵敏和经济的方法。 展开更多

关键词 特种乳 牛乳 掺假 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳

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几种鲑鳟鱼血清蛋白非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的研究 被引量：12

5

作者 杨贵强 徐绍刚 +2 位作者 王建 高云奇 王占全 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期1068-1072,共5页

采用非变性聚丙烯凝胶电泳的方法分析了硬头鳟、金鳟、虹鳟、北极红点鲑和溪红点鲑血清蛋白的组成成分及其含量。结果显示,硬头鳟、金鳟和虹鳟三者之间的遗传距离最小,硬头鳟、金鳟和虹鳟三者与溪红点鲑的遗传距离最大;硬头鳟、金鳟和... 采用非变性聚丙烯凝胶电泳的方法分析了硬头鳟、金鳟、虹鳟、北极红点鲑和溪红点鲑血清蛋白的组成成分及其含量。结果显示,硬头鳟、金鳟和虹鳟三者之间的遗传距离最小,硬头鳟、金鳟和虹鳟三者与溪红点鲑的遗传距离最大;硬头鳟、金鳟和虹鳟三者与北极红点鲑处于同一亚组,而溪红点鲑独处于另一亚组。研究结果表明硬头鳟、金鳟和虹鳟三者与溪红点鲑的亲缘关系远于与北极红点鲑的关系;同时还表明,以聚丙烯酰胺凝胶电泳分析鲑鳟鱼血清蛋白的方法简单易行、重复性好。本研究结果对鲑鳟鱼的种属鉴定、良种选育、品种改良和遗传结构分析提供了试验依据;虹鳟的繁养殖需进一步规范化和标准化,减少蛋白遗传基因的流失,从根本上预防大规模疾病的暴发。 展开更多

关键词 硬头鳟 金鳟 虹鳟 北极红点鲑 溪红点鲑 血清蛋白 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳

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SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法鉴定动物肌肉蛋白热变性的研究 被引量：2

6

作者 方绍庆 鲁闽 +4 位作者 许红岩 耿金培 王洪来 刘桂荣 梁成珠 《肉类研究》 2006年第5期41-44,共4页

分别对鸡、牛、猪、羊、鱼等五种新鲜动物肌肉组织进行不同温度的热处理,对处理前后的样品进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,结果显示五种动物肌肉组织经不同温度处理,所得电泳图谱具有显著差异,反映蛋白质变性与温度存在密切相关性。因此,... 分别对鸡、牛、猪、羊、鱼等五种新鲜动物肌肉组织进行不同温度的热处理,对处理前后的样品进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,结果显示五种动物肌肉组织经不同温度处理,所得电泳图谱具有显著差异,反映蛋白质变性与温度存在密切相关性。因此,可采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法鉴定动物组织蛋白的热变性程度,从而应用于肉制品加工过程中热熟程度的判定。该方法特异性和敏感性较强,操作简单,结果判定直观可靠。 展开更多

关键词 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) 蛋白热变性

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反应型表面活性剂RCS-10改性聚丙烯酰胺的流变性能研究 被引量：1

7

作者 赖小娟 刘贵茹 +5 位作者 刘晓庆 马永红 何平 王淼 成旭 雷宇田 《陕西科技大学学报》 北大核心 2023年第3期79-84,92,共7页

以十八醇聚氧乙烯醚(AEO)和甲基丙烯酸异氰基乙酯(IEM)为原料合成了一种氨基甲酸酯表面活性剂(RCS-10),采用傅里叶变换红外光谱(FTIR)和核磁共振(1H-NMR)对其进行了表征,并在室温下通过表面张力法测得RCS-10的临界胶束浓度(CMC)为5.19&#... 以十八醇聚氧乙烯醚(AEO)和甲基丙烯酸异氰基乙酯(IEM)为原料合成了一种氨基甲酸酯表面活性剂(RCS-10),采用傅里叶变换红外光谱(FTIR)和核磁共振(1H-NMR)对其进行了表征,并在室温下通过表面张力法测得RCS-10的临界胶束浓度(CMC)为5.19×10^(-4)mol/L.此外,还将RCS-10与丙烯酰胺、2-丙烯酰胺-2-甲基丙烷磺酸和丙烯酸共聚合成了一种新型疏水缔合聚合物(RHPAM),并对其水溶液的流变性能进行了分析.结果表明,在120℃、剪切速率为170 s^(-1)的条件下,改性和未改性聚丙烯酰胺溶液的黏度保持率分别为97.73%和87.07%.由此可见,RCS-10的加入提高了聚丙烯酰胺的耐热性和抗剪切性,并提高了聚丙烯酰胺的储存和损耗模量,表明其结构稳定性得到了增强.因此,RHPAM在改善压裂液耐热性、抗剪切性和提高采收率方面具有很大的潜力. 展开更多

关键词 表面活性剂 聚丙烯酰胺 临界胶束浓度 黏度 流变性能

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SSR标记小麦抗白粉病基因变性凝胶电泳体系的优化 被引量：3

8

作者 孙现军 郑炜君 +2 位作者 徐军飞 柴守诚 瞿利英 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期49-53,共5页

为寻找适合SSR标记定位小麦抗白粉病基因的变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的理想体系。主要研究Arc+Bis占凝胶的质量浓度、Arc/Bis质量比、上样量、电泳电压及染色等因素对变性聚丙烯酰胺凝胶电泳效果的影响。结果表明电泳效果较好的体系为:凝... 为寻找适合SSR标记定位小麦抗白粉病基因的变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的理想体系。主要研究Arc+Bis占凝胶的质量浓度、Arc/Bis质量比、上样量、电泳电压及染色等因素对变性聚丙烯酰胺凝胶电泳效果的影响。结果表明电泳效果较好的体系为:凝胶中Arc+Bis 60g/L、m(Arc)∶m(Bis)=29∶1、上样量5μL(含φ=20%的6×loading dye)、1 500V恒压、强碱法染色。此变性凝胶电泳体系下得到的图谱较为清晰。 展开更多

关键词 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 SSR 银染

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胆红素氧化酶凝胶电泳活性染色法

9

作者 曾伟 赵晓瑜 倪志华 《河北大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2008年第2期198-201,共4页

胆红素氧化酶能够特异地将胆红素氧化成胆绿素,利用酶与底物的这种特殊关系可以在凝胶上进行底物染色来直接显示酶的活性区带,这种方法称为胆红素氧化酶的活性染色法.这种活性染色可以采用胆红素直接溶入分离胶后电泳(胆红素-PAGE),也... 胆红素氧化酶能够特异地将胆红素氧化成胆绿素,利用酶与底物的这种特殊关系可以在凝胶上进行底物染色来直接显示酶的活性区带,这种方法称为胆红素氧化酶的活性染色法.这种活性染色可以采用胆红素直接溶入分离胶后电泳(胆红素-PAGE),也可以在电泳后置于胆红素溶液中染色(PACE-胆红素).其中PAGE-胆红素方法在20 min后即在凝胶上出现深绿色的胆红素氧化酶条带,随着时间延长,凝胶上的绿色酶条带逐渐扩散,最终形成透明条带;而运用胆红素-PAGE的方法则在12 h后才能在凝胶上看见透明的胆红素氧化酶所在的条带.相比之下,前者更为简便、快速、灵敏. 展开更多

关键词 活性染色 胆红素氧化酶 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳

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银屑病患者指甲和鳞屑的蛋白质SDS-电泳图谱和转谷氨酰胺酶活性探讨

10

作者 张玉红 李红文 吴景兰 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期700-702,共3页

目的:探讨银屑病患者指甲和鳞屑蛋白质十二烷基硫酸钠(SDS)-电泳图谱和转谷氨酰胺(transglutaminase1,TGase1)酶的活性。方法:各取5例银屑病患者的指甲和鳞屑与5例健康人的指甲和鳞屑,分别提取蛋白质进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PA... 目的:探讨银屑病患者指甲和鳞屑蛋白质十二烷基硫酸钠(SDS)-电泳图谱和转谷氨酰胺(transglutaminase1,TGase1)酶的活性。方法:各取5例银屑病患者的指甲和鳞屑与5例健康人的指甲和鳞屑,分别提取蛋白质进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)。应用辣根过氧化物酶(HRP)-单丹酰尸胺结合物对鳞屑铺片标本检测TGase 1酶活性。结果:健康人指甲和鳞屑的SDS-PAGE图谱皆呈现4条主带:63 ku、54 ku、48 ku及38 ku,银屑病患者指甲及鳞屑的SDS-PAGE图谱也呈现此4条主带,但多数主带扫描数值的水平较高,P<0.01。健康人的鳞屑铺片标本TGase 1酶活性呈现为棕黄色细颗粒定位于角质深层角质形成细胞(KC)的周缘;相比之下银屑病患者的TGase 1酶活性缺乏。结论:指甲及鳞屑的SDS-PAGE主带相似,前者图谱更清晰可能与其蛋白较稳定有关。银屑病患者比健康人的SDS-PAGE图谱主带表达水平升高,提示其KC可能呈增生状态,表达产物较多;患者TGase 1酶活性的缺如提示其表皮屏障功能有缺陷,可能与其参与代偿性增生有关。 展开更多

关键词 银屑病 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳 活性 转谷氨酰胺酶 指甲 鳞屑

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用蛋白电泳和高效凝胶排阻色谱法分析还原脲变性蛋白溶菌酶稀释复性过程的集聚体 被引量：5

11

作者 梁长利 边六交 《分析科学学报》 CAS CSCD 2006年第6期641-645,共5页

本文利用蛋白电泳和高效凝胶排阻层析法分析了还原脲变性蛋白溶菌酶稀释复性过程中的集聚体。当用复性液稀释复性还原脲变性蛋白溶菌酶时,会迅速产生可观量的沉淀。沉淀和上清液的不连续十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和... 本文利用蛋白电泳和高效凝胶排阻层析法分析了还原脲变性蛋白溶菌酶稀释复性过程中的集聚体。当用复性液稀释复性还原脲变性蛋白溶菌酶时,会迅速产生可观量的沉淀。沉淀和上清液的不连续十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和高效凝胶排阻层析分析结果表明,还原脲变性蛋白溶菌酶在稀释复性过程中除了能够复性成天然态蛋白溶菌酶分子外,还会形成可溶的蛋白溶菌酶分子二聚体和三聚体,二聚体和三聚体主要是靠分子间二硫键的错配连接而成的;可溶的蛋白溶菌酶分子二聚体之间通过非共价键相互作用而形成集聚体沉淀,而可溶的三聚体溶菌酶分子则仍处于复性液上清液中。 展开更多

关键词 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳 高效凝胶排阻层析 还原变性溶菌酶 集聚体 稀释复性 二硫键

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小麦籽粒淀粉分支酶活性电泳染色方法的比较验证

12

作者 赵法茂 齐霞 肖军 《山东农业大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2010年第3期352-355,共4页

以发育中的小麦籽粒为材料,对两种淀粉分支酶凝胶电泳活性染色方法的缓冲体系、染色过程、染色时间,试剂浓度等进行了比较验证。结果表明,Nagamine等文献中的酶活性染色方法能很好的区分淀粉分支酶的同种型类型和基因位点分布,显示不同... 以发育中的小麦籽粒为材料,对两种淀粉分支酶凝胶电泳活性染色方法的缓冲体系、染色过程、染色时间,试剂浓度等进行了比较验证。结果表明,Nagamine等文献中的酶活性染色方法能很好的区分淀粉分支酶的同种型类型和基因位点分布,显示不同基因位点的遗传多态性特点,与Yamanouchi等文献中的染色方法相比,酶带分辨率高,电泳图谱清晰,实验成本降低,可为淀粉分支酶的分子生物学及遗传特性研究提供一种经济、可靠的方法。 展开更多

关键词 小麦 淀粉分支酶 酶活性染色 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 比较

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小麦蛋白酶解制备活性多肽的研究 被引量：11

13

作者 王岁楼 祝红蕾 张栋 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第9期388-392,共5页

分别采用胃蛋白酶、酸性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶水解小麦蛋白,实验结果表明,胃蛋白酶作用效果最好。以水解度(DH)和得率为指标,对底物浓度、胃蛋白酶浓度、反应温度、反应时间和反应体系pH值等影响因素进行了单因素试验,在此基础... 分别采用胃蛋白酶、酸性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶水解小麦蛋白,实验结果表明,胃蛋白酶作用效果最好。以水解度(DH)和得率为指标,对底物浓度、胃蛋白酶浓度、反应温度、反应时间和反应体系pH值等影响因素进行了单因素试验,在此基础上通过正交试验最终确定了酶解小麦蛋白的最佳条件为:底物浓度10%、E/S7%、温度35℃、时间3h、pH2.0,在此条件下蛋白质水解度为4.62%、产物得率为50.64%。利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析小麦蛋白的水解产物,实验结果表明,所有水解产物的分子量均小于7.0kD,其中大多数处于4.1～1.4kD,说明小麦蛋白已被水解成多肽。 展开更多

关键词 小麦蛋白 酶解 活性多肽 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳

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山溪鲵皮肤分泌物抗菌活性的初步研究 被引量：12

14

作者 刘炯宇 江建平 +4 位作者 何开泽 谢锋 张逊 郑中华 周洲 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2004年第5期415-419,共5页

山溪鲵皮肤分泌物和经两次SephadexG 2 5层析分离得到的初步提纯样品经抗菌实验 ,发现具有抗菌活性。其中的抗菌活性成分为蛋白质性质 ,分子量约为 2 0kD ,具有在高温下短时间、常温下长时间保持稳定的特性。初步提纯样品经尿素SDS聚丙... 山溪鲵皮肤分泌物和经两次SephadexG 2 5层析分离得到的初步提纯样品经抗菌实验 ,发现具有抗菌活性。其中的抗菌活性成分为蛋白质性质 ,分子量约为 2 0kD ,具有在高温下短时间、常温下长时间保持稳定的特性。初步提纯样品经尿素SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳检测为两条带 ;经反相高效液相层析 (RP HPLC)检测为 13个峰。此提纯方法的活性回收率为 4 6 .7%。这为进一步的纯化和性质鉴定工作奠定了基础。 展开更多

关键词 皮肤 分泌物 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳 反相高效液相 经尿 抗菌活性 RP-HPLC 层析分离 鉴定工作 蛋白质

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SDS-PAGE凝胶原位检测抗菌蛋白的活性——生物自显影技术 被引量：4

15

作者 邓小娟 曹阳 +1 位作者 钟仰进 黄自然 《西南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期136-137,共2页

以大肠杆菌诱导的柞蚕蛹免疫血淋巴为例,介绍一种SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳后的凝胶原位检测抗菌活性组 分的生物自显影技术,该技术适用于鉴定各种不同生物体来源的样品中起活性作用的抗菌蛋白或抗菌肽。

关键词 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 原位检测 抗菌活性 生物自显影

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鳞翅目昆虫细胞抗菌肽的诱导、筛选及抗菌活性的研究 被引量：3

16

作者 彭蓉 杨忠 +4 位作者 刘凯于 姚汉超 杨红 崔艳芳 洪华珠 《华中师范大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 2006年第2期240-243,共4页

选取3种离体培养的鳞翅目昆虫细胞系,采用热灭活的大肠杆菌诱导的方法,诱导其产生抗菌肽,并进行抗菌活性检测、诱导动力学研究及Tricine SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测分析.结果筛选到1株诱导抗菌活性较高的昆虫细胞系———粉纹夜蛾BTI-T... 选取3种离体培养的鳞翅目昆虫细胞系,采用热灭活的大肠杆菌诱导的方法,诱导其产生抗菌肽,并进行抗菌活性检测、诱导动力学研究及Tricine SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测分析.结果筛选到1株诱导抗菌活性较高的昆虫细胞系———粉纹夜蛾BTI-Tn-5B1细胞系,并发现该粉纹夜蛾5B1细胞在诱导后16 h产生了1个分子量大约为8 000的抗菌肽,抗菌活性检测表明其对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、大肠杆菌(Escherichia coliK12D31)、德氏卑沙门氏菌(Salmonella derby)均有不同程度的抑制作用,其中特别是对革兰氏阴性菌———大肠杆菌K12D31和德氏卑沙门氏菌有较强的抑菌活性. 展开更多

关键词 抗菌肽 BTI-Tn-5B1细胞系 Tricine SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 抗菌活性

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单链DNA纯化对变性PAGE凝胶银染片段回收效率的提高 被引量：3

17

作者 史金铭 孙野青 《生物学杂志》 CAS CSCD 2009年第5期74-76,共3页

为了提高变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)银染后片段回收的效率,本实验在传统的煮沸法的基础上加入单链DNA纯化的步骤对水稻基因组CCGG为点甲基化敏感限制性酶切多态性(MSAP)分析片段进行回收,并对加入该步骤后的再扩增的效率与传统煮沸... 为了提高变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)银染后片段回收的效率,本实验在传统的煮沸法的基础上加入单链DNA纯化的步骤对水稻基因组CCGG为点甲基化敏感限制性酶切多态性(MSAP)分析片段进行回收,并对加入该步骤后的再扩增的效率与传统煮沸法进行了比较。实验结果显示,加入单链DNA纯化步骤后的回收效率比传统煮沸法提高了约6倍。改进后的方法可以有效地用于扩增片段长度多态性(AFLP)以及MSAP等差异显示PAGE凝胶银染DNA片段的回收。 展开更多

关键词 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 条带回收 银染 MSAP

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牛乳中纤维蛋白酶及其酶原活性测定方法的比较 被引量：9

18

作者 张爱霞 张佳程 生庆海 《中国乳业》 2003年第2期39-40,共2页

牛乳中纤维蛋白酶及其酶原活性的测定,以合成色谱底物(V7127)进行的分光光度比色法为最佳方案,因此利用该方法进行研究的也较多。SDS-PAGE、ELISA技术、TCA可溶性氮等各方法,虽然具有一定的局限性,但可作为分光光度法的辅助手段,以更好... 牛乳中纤维蛋白酶及其酶原活性的测定,以合成色谱底物(V7127)进行的分光光度比色法为最佳方案,因此利用该方法进行研究的也较多。SDS-PAGE、ELISA技术、TCA可溶性氮等各方法,虽然具有一定的局限性,但可作为分光光度法的辅助手段,以更好的对纤维蛋白酶进行研究。 展开更多

关键词 纤维蛋白酶 牛乳 酶原活性 测定方法 分光光度法 聚丙烯酰胺凝胶电泳技术 酶联免疫吸附技术 三氯乙酸-可溶性氮法

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不同家蚕品系的胰蛋白酶抑制剂种类与活性的多态性分析

19

作者 王凌燕 钟晓武 +4 位作者 张艳 董照明 王娟 夏庆友 赵萍 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期613-618,共6页

胰蛋白酶抑制剂（trypsin inhibitor,TI）广泛存在于昆虫体内,可抑制胰蛋白酶的水解活性。采用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和蛋白酶活性染色的方法,研究不同家蚕品系的丝腺、同一品系家蚕的不同组织器官及不同发育时期丝腺中胰蛋白酶抑制... 胰蛋白酶抑制剂（trypsin inhibitor,TI）广泛存在于昆虫体内,可抑制胰蛋白酶的水解活性。采用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和蛋白酶活性染色的方法,研究不同家蚕品系的丝腺、同一品系家蚕的不同组织器官及不同发育时期丝腺中胰蛋白酶抑制剂种类和活性的多态性,以丰富家蚕丝蛋白的合成、分泌及保护机制研究的基础信息。在22个家蚕品系上蔟第2天的蚕体丝腺中,共检测到6种胰蛋白酶抑制剂,分别命名为TI-Ⅰ~TI-Ⅵ,其中大部分家蚕品系都有TI-Ⅵ,有TI-Ⅳ的品系也较多,而有TI-Ⅱ的品系最少,家蚕不同品系间TI的种类分布不一致;在幼虫5龄期,TI活性随着丝腺的发育逐渐增强;在家蚕品系大造上蔟第1天蚕体的7个组织器官中,只在血液、精巢和丝腺中检测到TI,其中血液和丝腺中各检测到2种TI,精巢中检测到1种TI,而且同一家蚕品系含有TI的组织器官中的TI种类也不一致。对茧丝中3种TI（TI-Ⅲ、TI-Ⅳ和TI-Ⅵ）的理化性质进行检测,发现不同种类TI对温度及p H的适应范围不同,其中TI-Ⅵ的适应范围较广。研究结果显示：不同家蚕品系丝腺中含有的TI种类以及6种TI活性的强弱表现出多态性;同一家蚕品系不同组织器官中的TI种类也具有多态性;温度和p H对不同TI的活性影响程度不同。 展开更多

关键词 胰蛋白酶抑制剂 种类 活性 家蚕品系 丝腺 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 酶活性染色

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HMGN2：一个新的免疫活性分子（研究综述）

20

作者 黄宁 冯云 +2 位作者 吴琦 李成梁 王伯瑶 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期1650-1650,共1页

我们应用微量琼脂糖弥散抗菌检测法、制备性酸性尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳和反向高效液相色谱技术分别从人LAK细胞和子宫颈黏液中分离鉴定出一个抗菌多肽,经N-端氨基酸序列测定、质谱分析、全长cDNA克隆和免疫印迹等证明为HMGN2.

关键词 免疫活性分子 研究综述 聚丙烯酰胺凝胶电泳 高效液相色谱技术 全长CDNA克隆 protein 人LAK细胞 抗菌多肽 非组蛋白

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