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氟环境下变形链球菌耐氟菌株ciaH、eno和pykF基因的差异表达及其意义 被引量:3
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作者 张琦 赵洪岩 +4 位作者 张志民 张红 李文月 超博 杨瑶瑶 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期747-751,共5页
目的:检测变形链球菌耐氟菌株在氟环境下ciaH、eno和pykF基因表达的差异,探讨ciaH、eno和pykF基因与变形链球菌氟抗性的关系。方法:变形链球菌亲代菌株及其耐氟菌株,分为亲代组(变形链球菌亲代菌株生长于无氟BHI培养基中)、耐氟组(耐氟... 目的:检测变形链球菌耐氟菌株在氟环境下ciaH、eno和pykF基因表达的差异,探讨ciaH、eno和pykF基因与变形链球菌氟抗性的关系。方法:变形链球菌亲代菌株及其耐氟菌株,分为亲代组(变形链球菌亲代菌株生长于无氟BHI培养基中)、耐氟组(耐氟菌株生长于无氟BHI培养基中)和含氟组(耐氟菌株生长于含氟量为1g·L^(-1)的BHI培养基中)。分别选取3组处于生长对数期(11h)和稳定期(20h)的菌株,采用RT-PCR法检测ciaH、eno和pykF mRNA表达水平。结果:与耐氟组比较,含氟组的耐氟菌株ciaH、eno和pykF mRNA表达水平在对数期和稳定期均明显升高(P<0.05或P<0.01);与亲代组比较,耐氟组的耐氟菌株eno和pykF mRNA表达水平在对数期和稳定期均明显降低(P<0.01),ciaH mRNA表达水平在对数期差异无统计学意义(P>0.05),在稳定期明显升高(P<0.01)。结论:氟能提高耐氟菌株ciaH、eno和pykF基因的表达,该组基因与耐氟菌株氟抗性的产生有关联。 展开更多
关键词 ciaH ENO pykF 变形链球菌 变形链球菌耐氟菌株 抗性
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siRNA干扰对变形链球菌耐氟菌ffh基因产酸能力的影响 被引量:3
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作者 李朋莲 张志民 +4 位作者 李振玲 张桐菲 李天博 闫胜男 戴莹 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期105-108,共4页
目的:探讨变形链球菌耐氟菌(UA159-FR)ffh基因siRNA干扰后对产酸能力的影响。方法:电穿孔法将siRNA转入UA159-FR与ffh基因序列靶向位点结合,将干扰前后细菌分别加入BHI培养液,含5%糖类的葡萄糖、蔗糖、乳糖、淀粉中培养,pH调至7.5,24h... 目的:探讨变形链球菌耐氟菌(UA159-FR)ffh基因siRNA干扰后对产酸能力的影响。方法:电穿孔法将siRNA转入UA159-FR与ffh基因序列靶向位点结合,将干扰前后细菌分别加入BHI培养液,含5%糖类的葡萄糖、蔗糖、乳糖、淀粉中培养,pH调至7.5,24h后测终末pH。结果:转染结果成功;干扰前后不同糖培养基中变形链球菌耐氟菌ffh基因对产酸有显著差异(P<0.05);干扰前后在常规、葡萄糖、及乳糖中差异极显著(P<0.01);蔗糖中差异显著(P<0.05);淀粉中无显著差异。结论:变形链球菌耐氟菌中基因ffh对产酸能力影响显著。 展开更多
关键词 变形链球菌耐氟 ffh基因 SIRNA 产酸能力
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变形链球菌耐氟菌株gtfB基因失活菌株的构建 被引量:1
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作者 李文月 高爽 +6 位作者 张志鹰 张红 超博 武玉凤 李贺 王春萌 张志民 《口腔医学研究》 CAS 北大核心 2018年第5期490-494,共5页
目的:构建变形链球菌(S.mutans)耐氟菌株UA159-FR中gtfB基因失活株,为研究耐氟菌株gtfB基因的功能奠定基础。方法:培养UA159-FR并以其为模板扩增gtfB基因上游、下游同源臂片段,以质粒pEGFP-N1为模板扩增kan基因;通过重叠延伸聚合酶链反... 目的:构建变形链球菌(S.mutans)耐氟菌株UA159-FR中gtfB基因失活株,为研究耐氟菌株gtfB基因的功能奠定基础。方法:培养UA159-FR并以其为模板扩增gtfB基因上游、下游同源臂片段,以质粒pEGFP-N1为模板扩增kan基因;通过重叠延伸聚合酶链反应法(overlap extension polymerase chain reaction,OE-PCR)获取上述3个片段的同源重组片段;与pEASY-Blunt Cloning Vector连接形成重组质粒后,进行PCR鉴定和测序鉴定;将重组片段电转化入UA159-FR感受态细胞中得到gtfB基因失活菌株,并进行PCR鉴定。结果:经PCR鉴定和测序鉴定,含有gtfB基因重组片段的重组质粒构建成功;经PCR鉴定,UA159-FR的gtfB基因失活株构建成功。结论:成功构建了含有gtfB基因重组片段的重组质粒和S.mutans耐氟菌株UA159-FR的gtfB基因失活株,可用于gtfB基因功能的研究。 展开更多
关键词 变形链球菌耐氟菌株 gtfB基因 重叠延伸聚合酶链反应 同源重组 基因失活
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氟化物对变形链球菌耐氟菌株生物膜形成的影响 被引量:2
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作者 杨瑶瑶 张志民 +4 位作者 赵洪岩 郭馨蔚 刘璐 凌晓旭 曲添 《口腔医学研究》 CAS 北大核心 2019年第6期546-550,共5页
目的:观察变形链球菌耐氟菌株体外成膜过程,并与亲代菌株进行比较;探讨氟化物对耐氟菌株生物膜形成的影响。方法:变形链球菌耐氟菌株及亲代菌株,分为亲代组(变形链球菌亲代菌株生长于无氟BHI培养基中)、耐氟组(耐氟菌株生长于无氟BHI培... 目的:观察变形链球菌耐氟菌株体外成膜过程,并与亲代菌株进行比较;探讨氟化物对耐氟菌株生物膜形成的影响。方法:变形链球菌耐氟菌株及亲代菌株,分为亲代组(变形链球菌亲代菌株生长于无氟BHI培养基中)、耐氟组(耐氟菌株生长于无氟BHI培养基中)和含氟组(耐氟菌株生长于含氟量为1 g/L的BHI培养基中)。通过结晶紫染色、扫描电镜及激光共聚焦显微镜观察3组在6、12、18、24、36、48 h生物膜形成情况,采用SPSS 21.0单因素方差分析进行统计学比较。结果:(1)结晶紫染色法观察到生物膜生物量随时间增加,24~36 h达到最大值且相对稳定。亲代组及耐氟组生物膜生物量无统计学差异( P >0.05);含氟组生物量在实验的6个时间点均明显少于耐氟组( P <0.05)。(2)扫描电镜可见生物膜随时间的延长结构更加复杂,含氟组在实验时间内未见形成完整生物膜。(3)激光共聚焦实验通过细菌活死染观察到6~24 h生物膜呈绿色荧光,以活菌为主;36~48 h生物膜呈黄色荧光,以死菌为主。在不同时间段,实验组之间细菌密度及活菌比例均存在显著的统计学差异( P <0.01)。结论:通过对变形链球菌耐氟菌株及亲代菌株体外成膜情况无明显差异;氟化物对耐氟菌株生物膜的形成有明显的抑制作用。本实验为后续药物对生物膜防治作用的研究及代谢组学的研究奠定基础。 展开更多
关键词 变形链球菌 变形链球菌耐氟菌株 细菌生物膜
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变形链球菌耐氟菌株eriC^F基因差异性表达及其意义
5
作者 曲添 张红 +4 位作者 张志民 杜奥博 邵思奇 杨瑶瑶 刘璐 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期551-557,共7页
目的:探讨不同氟浓度条件下eriC^F1和eriC^F2基因对变形链球菌(S.mutans)耐氟菌株UA159-FR氟抗性的影响,阐明eriCF基因差异性表达与S.mutans耐氟菌株抗性的关系。方法:重组大肠杆菌感受态细胞BL21分为eriC^F1组(eriC^F1+Peasy-Blunt E2)... 目的:探讨不同氟浓度条件下eriC^F1和eriC^F2基因对变形链球菌(S.mutans)耐氟菌株UA159-FR氟抗性的影响,阐明eriCF基因差异性表达与S.mutans耐氟菌株抗性的关系。方法:重组大肠杆菌感受态细胞BL21分为eriC^F1组(eriC^F1+Peasy-Blunt E2)、eriC^F2组(eriC^F2+Peasy-Blunt E2)和KZ组(Peasy-Blunt E2)。基因克隆和IPTG诱导后,检测3组eriC^F1和eriC^F2蛋白表达水平,并分别测定3组菌株在不同氟环境(1.5、2.0、2.5和3.0g·L^-1氟化钠)下的菌液浓度和菌株生长速度,绘制菌株的生长曲线。结果:在对数期(8h)和稳定期(16h),3组菌株在不同氟环境下(1.5、2.0、2.5和3.0g·L^-1氟化钠)的菌液终浓度及菌株生长速度组内比较,3组菌株菌液终浓度和生长速度均随着氟化钠浓度升高而降低;组间比较,相同氟化钠浓度条件下,菌液终浓度和生长速度均为eriC^F2组>eriC^F1组>KZ组(P<0.05或P<0.01);与eriC^F1组比较,eriC^F2组菌液浓度均明显升高(P<0.01)。结论:eriC^F1和eriC^F2基因均能增强大肠杆菌的氟抗性,且表达eriC^F2基因比表达eriC^F1基因的大肠杆菌的氟抗性更强。 展开更多
关键词 eriC^F1 eriC^F2 变形链球菌 变形链球菌耐氟菌株 抗性
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耐氟变形链球菌对计算机辅助设计与制造陶瓷与牙体组织粘接的影响
6
作者 郭馨蔚 赵洪岩 +2 位作者 程博群 钱鑫 张志民 《口腔医学研究》 CAS 北大核心 2019年第8期752-756,共5页
目的:探讨变形链球菌及其耐氟菌株对3种陶瓷与牙釉质、牙本质、流体树脂粘接界面的影响。方法:诱导变形链球菌耐氟菌株,制备瓷-牙釉质/牙本质/流体树脂试件,分别浸于变形链球菌菌液UA159、其耐氟菌株菌液、BHI培养液中,连续培养14d,体... 目的:探讨变形链球菌及其耐氟菌株对3种陶瓷与牙釉质、牙本质、流体树脂粘接界面的影响。方法:诱导变形链球菌耐氟菌株,制备瓷-牙釉质/牙本质/流体树脂试件,分别浸于变形链球菌菌液UA159、其耐氟菌株菌液、BHI培养液中,连续培养14d,体视显微镜及电镜下观察粘接界面。结果:(1)瓷-粘接剂界面:浸于UA159的试件瓷与粘接剂间的裂隙要多于浸于耐氟菌株的试件;树脂基陶瓷LavaUltimate与粘接剂之间产生的裂隙最多;(2)粘接剂-牙体组织界面:流体树脂、牙釉质、牙本质与粘接剂间的裂隙依次递增;UA159与其耐氟菌株对此界面产生的破坏比较差异无统计学意义。结论:变形链球菌及其耐氟菌株会对瓷-粘接剂-牙体组织界面产生破坏,且对树脂基陶瓷产生的破坏最大。 展开更多
关键词 变形链球菌耐氟菌株 变形链球菌 计算机辅助设计与制造 界面破坏
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