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心脏过表达人源PRKAG2(G100S)转基因小鼠模型的建立
被引量：
1
1
作者
陈挺
刘杰
+3 位作者
肖良
鲍礼智
余云华
郑兴
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第3期273-278,共6页
目的建立心脏过表达人源PRKAG2(G100S)的转基因小鼠模型,为进一步研究该人源基因点突变对小鼠心脏发育、形态和功能维持的作用奠定基础。方法克隆人源基因PRKAG2并构建点突变质粒,将人源PRKAG2(G100S)插入α肌球蛋白重链(α-MHC)启动子...
目的建立心脏过表达人源PRKAG2(G100S)的转基因小鼠模型,为进一步研究该人源基因点突变对小鼠心脏发育、形态和功能维持的作用奠定基础。方法克隆人源基因PRKAG2并构建点突变质粒,将人源PRKAG2(G100S)插入α肌球蛋白重链(α-MHC)启动子下游,构建转基因表达载体。选用C57BL/6J小鼠为遗传背景,通过显微注射法建立人源PRKAG2(G100S)转基因小鼠模型,利用特异引物PCR法鉴定转基因小鼠的基因型。采用实时荧光定量PCR(qPCR)和蛋白质印迹法检测人源PRKAG2(G100S)的表达。结果经过回交繁育后建立了2个品系的心脏特异表达人源PRKAG2(G100S)的转基因小鼠品系F2代,并通过qPCR、蛋白质印迹法检测,确认了转基因小鼠心脏组织中人源PRKAG2(G100S)在mRNA和蛋白水平存在过表达,且该突变能在转基因小鼠中稳定传代。结论本研究成功建立了心脏特异表达人源PRKAG2(G100S)转基因小鼠模型,人源PRKAG2(G100S)基因在心脏组织的过度表达在小鼠心脏发育和功能维持中的作用需要进一步深入研究与探讨。
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关键词
PRKAG2
受精卵原核注射
转基因小鼠
心脏病
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职称材料
PD-L1转基因小鼠的建立及其脊髓损伤后的运动功能恢复
被引量：
2
2
作者
唐亮
于才勇
+5 位作者
冯睿
刘芳芳
赵宇
郭宏敏
鞠躬
王键
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第4期357-359,363,共4页
目的:建立广泛表达PD-L1的转基因小鼠,并且评价转基因小鼠脊髓损伤后的运动功能恢复情况。方法:克隆小鼠PD-L1基因编码区的cDNA,经测序正确后,将PD-L1基因cDNA插入到pCAGGS质粒中,构建pCAG-PD-L1转基因载体;经C57BL/6小鼠受精卵原核注射...
目的:建立广泛表达PD-L1的转基因小鼠,并且评价转基因小鼠脊髓损伤后的运动功能恢复情况。方法:克隆小鼠PD-L1基因编码区的cDNA,经测序正确后,将PD-L1基因cDNA插入到pCAGGS质粒中,构建pCAG-PD-L1转基因载体;经C57BL/6小鼠受精卵原核注射,建立PD-L1转基因小鼠;PCR鉴定转基因小鼠的基因型;以流式细胞术(FCM)检测转基因小鼠脾脏中T、B淋巴细胞PD-L1的表达情况;免疫组织化学检测转基因小鼠周围组织PD-L1表达情况;RT-PCR检测转基因小鼠神经组织内PD-L1表达;BBB评价转基因小鼠脊髓损伤后运动功能恢复。结果:获得PD-L1转基因小鼠,外源PD-L1基因可以顺利遗传给子代;免疫组织化学、RT-PCR和FCM发现:PD-L1转基因小鼠的神经组织、淋巴组织以及生殖器官中高表达PD-L1;PD-L1转基因小鼠脊髓重度夹伤后,其BBB运动学评分明显高于野生型小鼠(P<0.05)。结论:成功地建立了C57BL/6背景的PD-L1转基因小鼠,且PD-L1基因的高表达促进脊髓损伤后的运动功能恢复。
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关键词
PD-L1
转基因
脊髓损伤
受精卵原核注射
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职称材料
题名
心脏过表达人源PRKAG2(G100S)转基因小鼠模型的建立
被引量：
1
1
作者
陈挺
刘杰
肖良
鲍礼智
余云华
郑兴
机构
第二军医大学长海医院心血管内科
解放军东海舰队上海舰艇岸勤部医院
第二军医大学海军医学系海洋生物技术教研室
出处
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第3期273-278,共6页
基金
国家自然科学基金(81170092)~~
文摘
目的建立心脏过表达人源PRKAG2(G100S)的转基因小鼠模型,为进一步研究该人源基因点突变对小鼠心脏发育、形态和功能维持的作用奠定基础。方法克隆人源基因PRKAG2并构建点突变质粒,将人源PRKAG2(G100S)插入α肌球蛋白重链(α-MHC)启动子下游,构建转基因表达载体。选用C57BL/6J小鼠为遗传背景,通过显微注射法建立人源PRKAG2(G100S)转基因小鼠模型,利用特异引物PCR法鉴定转基因小鼠的基因型。采用实时荧光定量PCR(qPCR)和蛋白质印迹法检测人源PRKAG2(G100S)的表达。结果经过回交繁育后建立了2个品系的心脏特异表达人源PRKAG2(G100S)的转基因小鼠品系F2代,并通过qPCR、蛋白质印迹法检测,确认了转基因小鼠心脏组织中人源PRKAG2(G100S)在mRNA和蛋白水平存在过表达,且该突变能在转基因小鼠中稳定传代。结论本研究成功建立了心脏特异表达人源PRKAG2(G100S)转基因小鼠模型,人源PRKAG2(G100S)基因在心脏组织的过度表达在小鼠心脏发育和功能维持中的作用需要进一步深入研究与探讨。
关键词
PRKAG2
受精卵原核注射
转基因小鼠
心脏病
Keywords
PRKAG2
pronuclear injection of zygote
transgenic mice
heart diseases
分类号
R541 [医药卫生—心血管疾病]
在线阅读
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职称材料
题名
PD-L1转基因小鼠的建立及其脊髓损伤后的运动功能恢复
被引量：
2
2
作者
唐亮
于才勇
冯睿
刘芳芳
赵宇
郭宏敏
鞠躬
王键
机构
第四军医大学神经生物学教研室
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第4期357-359,363,共4页
基金
国家重大新药创制大平台项目子课题(2009ZX09301-009-PT02)
军队"十一五"专项资助(08Z028)
文摘
目的:建立广泛表达PD-L1的转基因小鼠,并且评价转基因小鼠脊髓损伤后的运动功能恢复情况。方法:克隆小鼠PD-L1基因编码区的cDNA,经测序正确后,将PD-L1基因cDNA插入到pCAGGS质粒中,构建pCAG-PD-L1转基因载体;经C57BL/6小鼠受精卵原核注射,建立PD-L1转基因小鼠;PCR鉴定转基因小鼠的基因型;以流式细胞术(FCM)检测转基因小鼠脾脏中T、B淋巴细胞PD-L1的表达情况;免疫组织化学检测转基因小鼠周围组织PD-L1表达情况;RT-PCR检测转基因小鼠神经组织内PD-L1表达;BBB评价转基因小鼠脊髓损伤后运动功能恢复。结果:获得PD-L1转基因小鼠,外源PD-L1基因可以顺利遗传给子代;免疫组织化学、RT-PCR和FCM发现:PD-L1转基因小鼠的神经组织、淋巴组织以及生殖器官中高表达PD-L1;PD-L1转基因小鼠脊髓重度夹伤后,其BBB运动学评分明显高于野生型小鼠(P<0.05)。结论:成功地建立了C57BL/6背景的PD-L1转基因小鼠,且PD-L1基因的高表达促进脊髓损伤后的运动功能恢复。
关键词
PD-L1
转基因
脊髓损伤
受精卵原核注射
Keywords
PD-L1
transgenic
spinal cord injury
pronuclear injection of zygote
分类号
R329.11 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
心脏过表达人源PRKAG2(G100S)转基因小鼠模型的建立
陈挺
刘杰
肖良
鲍礼智
余云华
郑兴
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
PD-L1转基因小鼠的建立及其脊髓损伤后的运动功能恢复
唐亮
于才勇
冯睿
刘芳芳
赵宇
郭宏敏
鞠躬
王键
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2011
2
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