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不同构建策略对D-氨基酸氧化酶表达的影响及发酵调节
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作者 冯美卿 史训龙 +2 位作者 黄海 张金晨 周珮 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期116-119,共4页
目的构建不含编码β-内酰胺酶编码基因的D-氨基酸氧化酶(D-amino acid oxidase,DAAO)工程菌,对不同构建策略构建的重组菌进行发酵调节研究。方法采用分子生物学手段,利用不同的策略、不同的毕赤酵母宿主菌,构建DAAO工程菌;利用微生物发... 目的构建不含编码β-内酰胺酶编码基因的D-氨基酸氧化酶(D-amino acid oxidase,DAAO)工程菌,对不同构建策略构建的重组菌进行发酵调节研究。方法采用分子生物学手段,利用不同的策略、不同的毕赤酵母宿主菌,构建DAAO工程菌;利用微生物发酵和调节手段,对工程菌的发酵条件进行优化。结果获得了表型不同的3株重组菌(Muts的PDK13和PDGA10,Mut+的PDG27),它们的最佳生长条件基本相似,诱导表达条件却不相同,在Basalsalts培养基内,当生长时间为36h,诱导培养基起始pH为6.0、甲醇浓度为0.5%时,最有利于DAAO表达。在菌体密度相同的条件下,Mut+表型(PDG27)甲醇代谢快,诱导24h,DAAO活力达到最高;Muts型(PDK13和PDGA10)甲醇代谢慢,诱导36h,DAAO活力达最高;通气量一定时,菌体密度增加,DAAO表达量增加,菌体增加到一定程度表达量反而下降,表明通气量应随菌体密度的增大而增加。结论Muts型重组菌对通气量要求低且更有利于高密度发酵。 展开更多
关键词 DAAO 重组菌表型 构建策略 表达 发酵调节
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降解脱氧雪腐镰刀菌烯醇直投菌剂发酵制备工艺研究及初步应用 被引量:3
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作者 杜稳 常晓娇 +3 位作者 赵一凡 管玉龙 孙长坡 刘虎军 《粮油食品科技》 2020年第4期152-158,共7页
脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)是镰刀菌的次级代谢产物,危害粮食及饲料产业。在5L-四联发酵罐中,对一株可以高效降解DON的枯草芽孢杆菌ASAG-35进行发酵,研究pH、温度、补料碳源以及发酵时间等工艺参数,以提高枯草芽孢杆菌的产芽孢能力。最佳... 脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)是镰刀菌的次级代谢产物,危害粮食及饲料产业。在5L-四联发酵罐中,对一株可以高效降解DON的枯草芽孢杆菌ASAG-35进行发酵,研究pH、温度、补料碳源以及发酵时间等工艺参数,以提高枯草芽孢杆菌的产芽孢能力。最佳发酵工艺条件为:pH控制在7.5,温度分阶段控制,发酵前12 h控制温度37℃,12 h后提高温度到39℃直至发酵结束,在发酵第12 h一次性补加10 g/L的糖蜜,30 h后终止发酵;在最优条件下,芽孢数可达到2.9×10^10 CFU/mL,芽孢率可达到96.7%。进一步将该发酵液制成直投菌剂并初步应用于粮食加工副产物中DON的脱除,当复合物料培养基中干物质含量≤30%,菌剂接入量≥0.1%时,菌剂发酵可有效脱除粮食副产物中的DON毒素,最高降解率为98.8%。 展开更多
关键词 脱氧雪腐镰刀菌烯醇 枯草芽孢杆菌 发酵调节优化 芽孢率 粮食副产物中DON脱毒
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