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粗毛栓菌cDNA文库的构建和漆酶基因的表达分析
被引量：
3
1
作者
张希根
何川
张义正
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第6期528-533,共6页
粗毛栓菌(Trametesgallica)能够分泌多种胞外氧化酶并且快速降解木质纤维素.为了快速高效分离鉴定粗毛栓菌木质纤维素降解酶相关基因,用Trizol试剂提取不同培养条件下粗毛栓菌总RNA,用CreatorTM SMARTTM cDNA Library Construction Kit...
粗毛栓菌(Trametesgallica)能够分泌多种胞外氧化酶并且快速降解木质纤维素.为了快速高效分离鉴定粗毛栓菌木质纤维素降解酶相关基因,用Trizol试剂提取不同培养条件下粗毛栓菌总RNA,用CreatorTM SMARTTM cDNA Library Construction Kit和Advantage 2PCR Kit成功构建了该菌全长cDNA文库.原始文库滴度为1.5×105cfu,重组率达99%,插入片段在0.7～2.0kb之间,平均大小约1kb.随机取16个重组子进行测序,全长cDNA序列完整性率为85.7%;并筛选到1个漆酶基因,编码区长1551bp,预测的蛋白质由517个氨基酸残基组成,分子量为55.41kD,等电点为4.76.用半定量RT-PCR法分析了该漆酶基因在不同培养条件下的表达水平.结果显示,高浓度的碳源,氮源,Cu2+均能诱导此基因的表达,该结果为漆酶基因的表达调控机制的深入研究奠定了基础.
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关键词
粗毛栓菌
CDNA文库
漆酶
基因表达
反转录pcr分析
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职称材料
题名
粗毛栓菌cDNA文库的构建和漆酶基因的表达分析
被引量：
3
1
作者
张希根
何川
张义正
机构
四川大学生命科学学院
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第6期528-533,共6页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.30470984)~~
文摘
粗毛栓菌(Trametesgallica)能够分泌多种胞外氧化酶并且快速降解木质纤维素.为了快速高效分离鉴定粗毛栓菌木质纤维素降解酶相关基因,用Trizol试剂提取不同培养条件下粗毛栓菌总RNA,用CreatorTM SMARTTM cDNA Library Construction Kit和Advantage 2PCR Kit成功构建了该菌全长cDNA文库.原始文库滴度为1.5×105cfu,重组率达99%,插入片段在0.7～2.0kb之间,平均大小约1kb.随机取16个重组子进行测序,全长cDNA序列完整性率为85.7%;并筛选到1个漆酶基因,编码区长1551bp,预测的蛋白质由517个氨基酸残基组成,分子量为55.41kD,等电点为4.76.用半定量RT-PCR法分析了该漆酶基因在不同培养条件下的表达水平.结果显示,高浓度的碳源,氮源,Cu2+均能诱导此基因的表达,该结果为漆酶基因的表达调控机制的深入研究奠定了基础.
关键词
粗毛栓菌
CDNA文库
漆酶
基因表达
反转录pcr分析
Keywords
Trametes gallica
cDNA library
taccase
gene expression
RT-
pcr
analysis
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
粗毛栓菌cDNA文库的构建和漆酶基因的表达分析
张希根
何川
张义正
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009
3
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