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差异显示反转录-PCR及抑制性扣除杂交在基因表达差异分析中的应用 被引量：2
1
作者 黄升谋 邹应斌 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 2002年第2期183-185,共3页
差异显示反转录 -PCR和抑制性扣除杂交是目前广泛应用于基因表达差异分析的方法 ,它们分别具有灵敏度高假阳性率低等特点 ,对其原理、技术。
关键词 差异显示反转录-pcr 抑制性扣除杂交 基因表达差异分析 应用
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18srDNA为内参照的Real-Time-PCR方法检测半夏病毒 被引量：2
2
作者 何煜波 陈集双 +2 位作者 陈海敏 冯俊丽 高必达 《湖南师范大学自然科学学报》 EI CAS 北大核心 2006年第3期103-106,共4页
利用实时荧光PCR方法,以18srRNA为内参照,对半夏植株及相应组培苗携带的黄瓜花叶病毒(Cu-cumber Mosaic Virus,CMV)含量进行了相对定量检测.并以DAS-ELISA和RT-PCR方法检测结果相比较.结果表明,相比原始植株,组培苗的病毒含量大大降低.... 利用实时荧光PCR方法,以18srRNA为内参照,对半夏植株及相应组培苗携带的黄瓜花叶病毒(Cu-cumber Mosaic Virus,CMV)含量进行了相对定量检测.并以DAS-ELISA和RT-PCR方法检测结果相比较.结果表明,相比原始植株,组培苗的病毒含量大大降低.以带病毒半夏母株为外植体培养的组培苗,其病毒含量以叶片中的相对较高,在块茎和愈伤组织中病毒相对较低.而ELISA方法在检测病毒含量低的样品时有假阴性结果;RT-PCR方法灵敏度可靠但不适宜精确量化. 展开更多
关键词 实时荧光PCR 黄瓜花叶病毒 反转录-pcr 双夹心酶联免疫反应 半夏
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不同耐药淋球菌菌株IR基因突变与mtrC基因转录水平的差异性比较 被引量：1
3
作者 张丽霞 林能兴 +5 位作者 胡志国 黄长征 刘志香 陈宏翔 林云 涂亚庭 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期763-765,共3页
目的:研究不同耐药淋球菌菌株多传递耐药(mtr)系统反向重复序列(IR)区基因突变与mtrC基因转录水平的差异性,进一步探索mtr系统介导耐药的机制。方法:采用琼脂稀释法测定抗生素对菌株的最小抑菌浓度(MIC),PCR扩增含IR区的目的基因并对扩... 目的:研究不同耐药淋球菌菌株多传递耐药(mtr)系统反向重复序列(IR)区基因突变与mtrC基因转录水平的差异性,进一步探索mtr系统介导耐药的机制。方法:采用琼脂稀释法测定抗生素对菌株的最小抑菌浓度(MIC),PCR扩增含IR区的目的基因并对扩增产物测序,同时采用反转录(RT)-PCR检测mtrC基因mRNA表达水平的变化。结果:5株敏感株及5株仅耐青霉素菌株无IR区基因突变,16株多重耐药菌株中IR区均有碱基A/T缺失。敏感株mtrC转录水平显著低于耐药株(P<0.05),而耐药菌株组中IR区碱基突变组mtrC转录水平显著高于无突变组(P<0.05)。结论:淋球菌染色体mtrR启动子区域的IR区基因突变会引起mtrC基因转录增加,进而提高奈瑟淋球菌的耐药性。 展开更多
关键词 淋球菌 基因突变 反向重复序列 反转录-pcr mtrC基因
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马铃薯茎尖脱毒技术体系的研究进展 被引量：15
4
作者 毛玮 王英 +1 位作者 金建钧 刘志文 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第33期16257-16260,共4页
马铃薯茎尖脱毒技术的应用是克服马铃薯病毒病和类病毒病害的主要措施之一。系统总结了茎尖脱毒技术体系中的脱毒、快繁、种薯诱导和检测技术的影响因素和研究进展,主要包括茎尖大小、外源激素、温度、光照、环境、培养基等因素以及RT-... 马铃薯茎尖脱毒技术的应用是克服马铃薯病毒病和类病毒病害的主要措施之一。系统总结了茎尖脱毒技术体系中的脱毒、快繁、种薯诱导和检测技术的影响因素和研究进展,主要包括茎尖大小、外源激素、温度、光照、环境、培养基等因素以及RT-PCR检测技术等,还分析了脱毒马铃薯增产的机理,并展望了该技术今后研究方向。 展开更多
关键词 马铃薯 脱毒苗 微型薯 病毒检测 反转录-pcr 机理
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狂犬病病毒野毒株糖蛋白基因序列测定及分析比较 被引量：3
5
作者 赵云蛟 钱爱东 +3 位作者 胡桂学 王利民 李影 尹殿明 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期338-341,共4页
对我国河南某地野鼠体内分离的狂犬病病毒野毒株MRV糖蛋白全基因进行序列测定 ,与已发表的代表性毒株糖蛋白基因进行核苷酸和推导氨基酸序列的比较分析 ,结果表明在同一基因型中 ,MRV和国际标准攻毒株CVS的同源性最高 (96 .5 % ) ,和中... 对我国河南某地野鼠体内分离的狂犬病病毒野毒株MRV糖蛋白全基因进行序列测定 ,与已发表的代表性毒株糖蛋白基因进行核苷酸和推导氨基酸序列的比较分析 ,结果表明在同一基因型中 ,MRV和国际标准攻毒株CVS的同源性最高 (96 .5 % ) ,和中国减毒株CTN的同源性最低 (79.8% ) ;在G基因的四个功能区中 ,氨基酸同源性最高的是抗原区 ,同源性最低的是膜内区 ;MRV的抗原部位和糖基化位点氨基酸均有变异 ;建立了各毒株的系统进化树。 展开更多
关键词 狂犬病病毒 糖蛋白基因 反转录-pcr 测序 分析
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新基因LX3与白细胞介素-6诱导的相关性 被引量：2
6
作者 夏荣 黎燕 +2 位作者 冯建男 兰炯采 沈倍奋 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2005年第4期384-386,共3页
目的研究功能未知新基因LX3[1]与白细胞介素-6(IL-6)的相关性,为研究IL-6的作用机制寻找新的靶基因。方法反转录-PCR(RT-PCR)分析不同浓度IL-6处理的U937细胞及同一浓度IL-6诱导不同时间的U937细胞中新基因LX3的表达差异;NorthernBlot分... 目的研究功能未知新基因LX3[1]与白细胞介素-6(IL-6)的相关性,为研究IL-6的作用机制寻找新的靶基因。方法反转录-PCR(RT-PCR)分析不同浓度IL-6处理的U937细胞及同一浓度IL-6诱导不同时间的U937细胞中新基因LX3的表达差异;NorthernBlot分析IL-6诱导前后U937细胞中新基因LX3表达的变化。结果LX3基因在U937细胞中的表达量随IL-6诱导浓度的增加而增加,在IL-6浓度为500ng/ml时表达量最高,而在0ng/ml时不表达;时间表达谱分析显示在IL-6刺激8h时新基因LX3的表达量最高;Northern印迹分析显示新基因LX3在IL-6诱导后的U937细胞中的表达量明显升高。结论LX3是与IL-6诱导紧密相关的新基因。 展开更多
关键词 白细胞介素-6 LX3 反转录-pcr
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银屑病患者骨髓高增殖潜能集落形成细胞P16基因mRNA表达的研究 被引量：1
7
作者 张瑞丽 牛旭平 +2 位作者 李新华 张开明 尹国华 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期281-283,共3页
目的:研究银屑病患者骨髓高增殖潜能集落形成细胞(HPP-CFC)的集落形成能力及P16基因mRNA表达,探讨银屑病患者骨髓造血干细胞体外增殖活性及原因。方法:密度梯度离心法分离银屑病患者及正常对照骨髓单个核细胞,培养于含人干细胞因子(SCF... 目的:研究银屑病患者骨髓高增殖潜能集落形成细胞(HPP-CFC)的集落形成能力及P16基因mRNA表达,探讨银屑病患者骨髓造血干细胞体外增殖活性及原因。方法:密度梯度离心法分离银屑病患者及正常对照骨髓单个核细胞,培养于含人干细胞因子(SCF)、人粒-巨噬细胞系集落剌激因子(GM-CSF)、白介素(IL)-3、IL-6细胞因子组合的甲基纤维素半固体培养基,培养14d时计数HPP-CFC集落,然后收集集落。提取纯化集落细胞的总RNA,应用反转录(RT)-PCR方法检测HPP-CFC集落细胞的P16基因mRNA的表达。结果:①在甲基纤维素半固体培养基中,银屑病患者骨髓HPP-CFC集落数显著低于正常对照组,且集落形态较小;②银屑病患者骨髓HPP-CFC集落细胞的P16基因mRNA表达高于正常对照组,差异有统计学意义。结论:银屑病患者骨髓HPP-CFC集落形成能力降低;银屑病患者骨髓HPP-CFC的P16基因mRNA表达阳性率增高,推测P16基因可能参与了银屑病患者骨髓造血干细胞体外增殖活性异常的发生。 展开更多
关键词 银屑病 高增殖潜能集落形成细胞 P16基因 反转录-pcr
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凋亡抑制蛋白livin在人皮肤鳞状细胞癌中表达的初步研究 被引量：1
8
作者 陶菲克 涂亚庭 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期15-17,共3页
目的:研究凋亡抑制蛋白 livin 在人皮肤鳞状细胞癌(简称鳞癌)组织及细胞中的表达情况。方法:①采用免疫组化染色方法检测18例鳞癌组织中 livin 的表达情况;②利用反转录(RT)-PCR 及 Western blot 的方法检测皮肤鳞癌细胞系 A431细胞中 l... 目的:研究凋亡抑制蛋白 livin 在人皮肤鳞状细胞癌(简称鳞癌)组织及细胞中的表达情况。方法:①采用免疫组化染色方法检测18例鳞癌组织中 livin 的表达情况;②利用反转录(RT)-PCR 及 Western blot 的方法检测皮肤鳞癌细胞系 A431细胞中 livin mRNA 及蛋白的表达情况。结果:①livin 蛋白在正常皮肤组织中不表达,鳞癌组织中 livin 蛋白的阳性表达率为72.2%;②livin 基因 mRNA 及蛋白在皮肤鳞癌细胞系 A431中表达较高。结论:凋亡抑制基因 livin 在人皮肤鳞癌组织及细胞中高表达,提示 livin 基因在皮肤鳞癌发生发展中起一定作用,为皮肤鳞癌的诊断及治疗研究提供实验基础。 展开更多
关键词 LIVIN 癌 鳞状细胞 皮肤 反转录-pcr 免疫印迹法
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地锦草总黄酮对小鼠免疫功能及细胞因子mRNA表达影响 被引量：8
9
作者 徐波 张建超 +2 位作者 付作明 聂厚湘 孙志良 《中兽医医药杂志》 2010年第5期22-26,共5页
探讨地锦草总黄酮对小鼠免疫功能及细胞因子IL-2、IL-12、IFN-γ、TNF-αmRNA表达影响。将小鼠随机分成4组:地锦草总黄酮高剂量组(H组)、中剂量组(M组)、低剂量组(L组)和纯水对照组(C组),连续灌胃9 d后,检测其单核巨噬细胞吞噬功能、2%... 探讨地锦草总黄酮对小鼠免疫功能及细胞因子IL-2、IL-12、IFN-γ、TNF-αmRNA表达影响。将小鼠随机分成4组:地锦草总黄酮高剂量组(H组)、中剂量组(M组)、低剂量组(L组)和纯水对照组(C组),连续灌胃9 d后,检测其单核巨噬细胞吞噬功能、2%绵羊红细胞诱导的小鼠迟发型变态反应、肝脏指数和脾脏指数,并用逆转录酶-聚合酶链式反应的方法检测脾脏IL-2、IL-12、IFN-γ和TNF-αmRNA表达水平。结果显示,地锦草总黄酮3个剂量组脾脏指数、廓清指数(K)、吞噬指数(α)、24 h足跖增厚值均显著高于C组;M组和H组肝指数显著高于C组(P<0.01);3个剂量组均能提高IL-2、IL-12、IFN-γ和TNF-αmRNA的表达水平,与C组相比,H组最显著。试验结果表明,地锦草总黄酮能有效提高机体的免疫功能及IL-2、IL-12、IFN-γ和TNF-αmRNA表达。 展开更多
关键词 地锦草 总黄酮 细胞因子 反转录-pcr
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利用基因芯片对一高保守基因进行肿瘤相关分析
10
作者 程超 周宗祥 +9 位作者 徐明 赵炜 徐坚 曾立 黄燕 吴奇涵 戴建锋 应康 谢毅 毛裕民 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期227-231,共5页
本文对大规模人类cDNA测序过程中获得的一条高保守基因进行了初步功能研究 ,生物信息学研究发现该基因在人类、小鼠、果蝇、拟南芥和裂殖酵母中都有很高的保守性 ,其他分析预测该基因可能具有肿瘤相关性。RT -PCR分析表明 ,该基因在成... 本文对大规模人类cDNA测序过程中获得的一条高保守基因进行了初步功能研究 ,生物信息学研究发现该基因在人类、小鼠、果蝇、拟南芥和裂殖酵母中都有很高的保守性 ,其他分析预测该基因可能具有肿瘤相关性。RT -PCR分析表明 ,该基因在成人和胎儿组织中广谱表达。利用基因芯片分析该基因在 7例肝癌、5例胰腺癌、2例喉癌和 2例肺癌中表达情况 ,结果证实了该基因的肿瘤相关性 ,并且提示该基因在不同肿瘤类型中可能处于不同的地位。 展开更多
关键词 基因芯片 高保守基因 肿瘤相关分析 反转录-pcr 结构域
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