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葡萄霜霉病菌LFD-RPA检测体系的建立: 1; 作者黄强张强强顾沛雯《西北农林科技大学学报(自然科学版)》北大核心 2025年第4期89-97,共9页; 【目的】建立葡萄霜霉病菌(Plasmopara viticola)重组酶聚合酶扩增-侧流层析试纸条(recombinase polymerase amplification-lateral flow dipstick,LFD-RPA)检测体系,为快速准确诊断和有效防治葡萄霜霉病提供参考。【方法】依据葡萄霜... 展开更多; 关键词葡萄霜霉病葡萄生单轴霉重组酶聚合酶扩增-侧流层析试纸条检测病原检测; 在线阅读下载PDF 职称材料

K亚群禽白血病病毒的分离鉴定及RPA-LFD快速检测方法的建立与应用: 2; 作者喻华英曾婷婷 +8 位作者杨宗维王粲牙侯勋万丽君罗思思李孟谢芝勋于美玲谢丽基《中国家禽》北大核心 2025年第7期47-55,共9页; 为满足基层实验室对K亚群禽白血病病毒(Avian leukosis virus subgroup K,ALV-K)检测需求,研究建立了一种基于重组酶聚合酶等温扩增-侧流层析试纸条(Recombinase polymerase amplifcation-lateral flow dipstick,RPA-LFD)的ALV-K快速检... 展开更多; 关键词家禽 K亚群禽白血病病毒重组酶聚合酶等温扩增-侧流层析试纸条快速检测; 在线阅读下载PDF 职称材料

鳗鲡疱疹病毒基础RPA及RPA-LFD检测方法的比较被引量：1: 3; 作者林而舒《渔业研究》 2024年第4期367-374,共8页; 【目的】鳗鲡疱疹病毒(Anguillid herpesvirus,AngHV)是鳗鲡“脱黏败血综合征”的主要病原,对鳗鲡养殖产业造成了严重的经济损失。为达到早期预警和防止病毒扩增蔓延的目的,建立一套AngHV快速检测技术对中国鳗鲡养殖疾病防控具有重要意... 展开更多; 关键词鳗鲡鳗鲡疱疹病毒(AngHV) 重组酶聚合酶等温扩增(RPA) 重组酶聚合酶等温扩增-侧向流层析试纸条法(RPA-LFD); 在线阅读下载PDF 职称材料

柑橘衰退病毒RT-RPA-LFD可视化检测方法的建立及应用被引量：5: 4; 作者申世凯曾婷 +3 位作者乔兴华陈力任杰群周彦《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期2652-2660,共9页; 【目的】柑橘衰退病由柑橘衰退病毒(citrus tristeza virus,CTV)引起,是一种世界性的重要柑橘病害。为实现CTV的田间快速检测,建立一种准确、快速且可视化的检测方法。【方法】以CTV外壳蛋白(CP)的保守区域为靶标,设计3对特异性引物和探... 展开更多; 关键词柑橘柑橘衰退病毒反转录-重组酶聚合酶扩增-侧流层析试纸条快速检测; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名葡萄霜霉病菌LFD-RPA检测体系的建立: 1; 作者黄强张强强顾沛雯; 机构宁夏大学农学院; 出处《西北农林科技大学学报(自然科学版)》北大核心 2025年第4期89-97,共9页; 基金宁夏回族自治区重大科技成果转化项目“酿酒葡萄病虫害信息化监测预警技术应用”(2023CJE09038)。; 文摘【目的】建立葡萄霜霉病菌(Plasmopara viticola)重组酶聚合酶扩增-侧流层析试纸条(recombinase polymerase amplification-lateral flow dipstick,LFD-RPA)检测体系,为快速准确诊断和有效防治葡萄霜霉病提供参考。【方法】依据葡萄霜霉病菌内转录间隔区(ITS)序列设计了PF1/PR1、PF2/PR2和PF3/PR3共3对引物及探针RPA-P,对葡萄霜霉病菌DNA的ITS序列进行PCR扩增,建立了葡萄霜霉病菌LFD-RPA检测体系,并对其反应条件进行优化,对其特异性和灵敏性进行检测。【结果】建立了葡萄霜霉病菌LFD-RPA检测体系,引物PF1/PR1和探针RPA-P对靶标片段具有良好的特异性,检测条件为36℃扩增30 min,对葡萄霜霉病菌具有特异性;最低检测下限为10 pg/μL,灵敏性略低于常规PCR(1 pg/μL)和荧光定量PCR(100 fg/μL);对田间发病叶片的检测结果与常规PCR一致,准确性高。【结论】建立的葡萄霜霉病菌重组酶聚合酶扩增-侧流层析试纸条(LFD-RPA)检测体系,可以对目标物质进行快速、可视化检测,具有操作简单、特异性强、灵敏度高的特点,适宜推广使用。; 关键词葡萄霜霉病葡萄生单轴霉重组酶聚合酶扩增-侧流层析试纸条检测病原检测; Keywords grape downy mildew Plasmopara viticola recombinase polymerase amplification-lateral flow dipstick(LFD-RPA)detection detection of pathogens; 分类号 S436.631.1 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名K亚群禽白血病病毒的分离鉴定及RPA-LFD快速检测方法的建立与应用: 2; 作者喻华英曾婷婷杨宗维王粲牙侯勋万丽君罗思思李孟谢芝勋于美玲谢丽基; 机构广西大学动物科学技术学院广西壮族自治区兽医研究所农业农村部中国(广西)-东盟跨境动物疫病防控重点实验室/广西兽医生物技术重点实验室桂林力源粮油食品集团有限公司; 出处《中国家禽》北大核心 2025年第7期47-55,共9页; 基金广西科技重大专项(桂科AA23062050) 国家现代农业产业技术体系广西家禽产业创新团队建设专项资金(nycytxgxcxtd2024-19-3) 广西八桂学者专项(2019A50)。; 文摘为满足基层实验室对K亚群禽白血病病毒(Avian leukosis virus subgroup K,ALV-K)检测需求,研究建立了一种基于重组酶聚合酶等温扩增-侧流层析试纸条(Recombinase polymerase amplifcation-lateral flow dipstick,RPA-LFD)的ALV-K快速检测方法。试验首先通过细胞培养分离鉴定出一株ALV-K,并以此分离株的前病毒DNA作为建立检测方法的模板;其次,针对ALV-K gp85基因保守位置设计引物和探针,优化反应体系的引物浓度、探针浓度和反应温度,在此基础上进行敏感性预试验并以预试验检测限优化反应时间;最后,以优化反应时间进行敏感性试验、稳定性试验及特异性试验。结果显示:建立的ALV-K RPA-LFD反应体系在引物浓度为0.45 mmol/L,探针浓度为0.14 mmol/L,39℃条件下反应21 min,其检测限为4.86×10^(2) copies/反应的ALV-K DNA,并且不与其他常见禽类病原体核酸发生非特异扩增反应;30份临床病料中有14份ALV-K阳性,与单重PCR方法结果一致。研究表明,建立的ALV-K RPA-LFD检测方法具有快速、特异、操作简单,不需要复杂仪器,能够直观地观察结果的优点,适用于临床快速检测ALV-K,特别是实验室条件有限的检测场景。; 关键词家禽 K亚群禽白血病病毒重组酶聚合酶等温扩增-侧流层析试纸条快速检测; Keywords poultry avian leukosis virus subgroup K recombinant polymerase amplification-lateral flow dipstick rapid detection; 分类号 S855.3 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名鳗鲡疱疹病毒基础RPA及RPA-LFD检测方法的比较被引量：1: 3; 作者林而舒; 机构福建省淡水水产研究所; 出处《渔业研究》 2024年第4期367-374,共8页; 基金福建省属公益类科研院所基本科研专项(2023R1013003) 国家大宗淡水鱼产业技术体系项目(CARS-45-41) 福建省属公益类科研院所基本科研专项(2022R1014005)。; 文摘【目的】鳗鲡疱疹病毒(Anguillid herpesvirus,AngHV)是鳗鲡“脱黏败血综合征”的主要病原,对鳗鲡养殖产业造成了严重的经济损失。为达到早期预警和防止病毒扩增蔓延的目的,建立一套AngHV快速检测技术对中国鳗鲡养殖疾病防控具有重要意义。【方法】本研究根据AngHV ORF55设计了扩增引物和探针,建立了基于重组酶聚合酶等温扩增技术(RPA)的基础RPA及RPA侧向流层析试纸条法(RPA-LFD)检测方法,探究了不同时间和温度对基础RPA和RPA-LFD扩增效果的影响,并比较了2种方法的灵敏度、特异性和临床应用效果。【结果】本研究建立的AngHV基础RPA及RPA-LFD快速检测方法扩增产物大小为394 bp;2种检测方法都仅需20~40 min即可完成检测过程;温度的变化对检测方法的影响不大,37~43℃范围内均能得到较好的扩增效果;2种检测方法均与鳗鲡圆环病毒(Eel circovirus)、锦鲤疱疹病毒(Koi herpesvirus)和鲤疱疹病毒(Cyprinid herpesvirus)无交叉反应,表现出良好的特异性;RPA-LFD检测方法具有更高的检测灵敏度,检出限至1.32×10^(0)copies/mL,基础RPA检出限至1.32×10^(3)copies/mL;检测实验室保存的20份鳗鲡病料DNA,2种方法检测的结果一致,阳性率均为30%,表明AngHV基础RPA和RPALFD检测方法均具有良好的临床应用潜力。【结论】AngHV基础RPA和RPA-LFD检测方法十分适用于基层科研单位、鳗鲡产品加工场及养殖场的病毒检测,丰富了AngHV检测手段的可选性。; 关键词鳗鲡鳗鲡疱疹病毒(AngHV) 重组酶聚合酶等温扩增(RPA) 重组酶聚合酶等温扩增-侧向流层析试纸条法(RPA-LFD); Keywords eel Anguillid herpesvirus(AngHV) recombinase polymerase amplification(RPA) recombinase polymerase amplification-lateral flow dipstick(RPA-LFD); 分类号 S943 [农业科学—水产养殖]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名柑橘衰退病毒RT-RPA-LFD可视化检测方法的建立及应用被引量：5: 4; 作者申世凯曾婷乔兴华陈力任杰群周彦; 机构西南大学柑桔研究所国家柑桔工程技术研究中心重庆市万州区植物保护与果树技术推广站重庆三峡农业科学院; 出处《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期2652-2660,共9页; 基金财政部和农业农村部国家现代农业产业技术体系(CARS-26-05B)。; 文摘【目的】柑橘衰退病由柑橘衰退病毒(citrus tristeza virus,CTV)引起,是一种世界性的重要柑橘病害。为实现CTV的田间快速检测,建立一种准确、快速且可视化的检测方法。【方法】以CTV外壳蛋白(CP)的保守区域为靶标,设计3对特异性引物和探针,通过引物筛选,以及优化引物浓度、反应时间和反应温度等条件,建立CTV的反转录-重组酶聚合酶扩增-侧流层析试纸条(RT-RPA-LFD)快速检测方法,明确其灵敏度,并用于田间疑似样品的检测。【结果】建立了CTV的RT-RPA-LFD检测方法:最佳检测引物为RPA-1F/R,对应探针为RPA-P,最佳反应条件为40℃,25 min,且与其他5种柑橘病毒无交叉反应。该方法的灵敏度是RT-PCR的100倍,最低可检测到2.12×10^(1)拷贝·μL^(-1)的CTV核酸,与RT-qPCR相当。采用RT-RPA-LFD法在67份田间样品中检测出CTV阳性样品41份,与RT-PCR法检测结果一致。【结论】建立的CTV RT-RPA-LFD法具有操作简单、快速、结果可视等优点,适合基层植保工作者对田间样品开展快速检测。; 关键词柑橘柑橘衰退病毒反转录-重组酶聚合酶扩增-侧流层析试纸条快速检测; Keywords Citrus Citrus tristeza virus(CTV) Reverse transcription-recombinase polymerase amplifi-cation-lateral flow dipstick test strip Rapid detection; 分类号 S666 [农业科学—果树学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	葡萄霜霉病菌LFD-RPA检测体系的建立	黄强张强强顾沛雯	《西北农林科技大学学报(自然科学版)》北大核心	2025	0	在线阅读下载PDF 职称材料
2	K亚群禽白血病病毒的分离鉴定及RPA-LFD快速检测方法的建立与应用	喻华英曾婷婷杨宗维王粲牙侯勋万丽君罗思思李孟谢芝勋于美玲谢丽基	《中国家禽》北大核心	2025	0	在线阅读下载PDF 职称材料
3	鳗鲡疱疹病毒基础RPA及RPA-LFD检测方法的比较	林而舒	《渔业研究》	2024	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	柑橘衰退病毒RT-RPA-LFD可视化检测方法的建立及应用	申世凯曾婷乔兴华陈力任杰群周彦	《果树学报》 CAS CSCD 北大核心	2023	5	在线阅读下载PDF 职称材料