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环介导等温扩增技术检测建兰花叶病毒被引量：10: 1; 作者许春英李逢慧罗超《现代农业科技》 2009年第8期11-12,14,共3页; 为了建立检测建兰花叶病毒的快速实用分子生物学技术,该研究借助新兴的环介导等温扩增技术,建立了一种灵敏、特异、快速的分子生物学检测方法——体外等温扩增检测方法。设计了4条针对目的基因的6个位点的特异性引物,建立了一套从核酸... 展开更多; 关键词建兰花叶病毒反转录聚合酶链反应环介导等温扩增技术; 在线阅读下载PDF 职称材料

山乌桕叶片DNA提取及ISSR-PCR反应体系优化被引量：9: 2; 作者黄旭萍黄一航 +3 位作者黄敏王建超陈孝丑陈发兴《森林与环境学报》 CSCD 北大核心 2021年第2期164-171,共8页; 为研究南方优良乡土彩叶树种山乌桕的遗传多样性,并为山乌桕种质培育研究提供技术参考。以山乌桕叶片为试验材料,对山乌桕ISSR-PCR反应体系进行优化,比较试剂盒法、改良十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法和十二烷基硫酸钠(SDS)法对山乌桕叶... 展开更多; 关键词山乌桕 DNA提取简单重复序列区间-聚合酶链式扩增反应体系优化; 在线阅读下载PDF 职称材料

牛轮状病毒RT-LAMP检测方法的建立被引量：5: 3; 作者李巍李宁 +1 位作者袁万哲孙继国《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2012年第5期39-43,共5页; 建立一种适用于牛轮状病毒(BRV)的反转录-环介导等温扩增(RT-LAMP)的快速检测方法。根据GenBank中登录的BRV VP7基因序列,针对其保守区设计了4条引物,利用RT-LAMP方法进行检测,并优化了反应体系与反应时间,检测了该方法的特异性和灵敏... 展开更多; 关键词牛轮状病毒反转录-环介导等温扩增反转录-聚合酶链反应; 在线阅读下载PDF 职称材料

牛病毒性腹泻病毒内标双重RT-PCR检测方法的建立及初步应用被引量：3: 4; 作者季新成段琛 +3 位作者王克栋史茜于学辉冉多良《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2014年第1期17-21,共5页; 为了对BVDV-1和BVDV-2进行同步检测,针对不同基因型牛病毒性腹泻病毒(BVDV)基因组高度保守的5′-UTR核苷酸序列设计特异性引物(扩增长度为288bp)。为了指示假阴性结果,以牛GAPDH基因为内标基因,设计特异性引物(扩增序列长度为152bp)。... 展开更多; 关键词牛病毒性腹泻病毒内标双重反转录-聚合酶链反应共扩增; 在线阅读下载PDF 职称材料

犬瘟热病毒实时荧光RT-RPA检测方法的建立及应用被引量：3: 5; 作者张启龙傅彩霞 +6 位作者张玮高晓龙王林程敏姮郑雪莹刘海莹周德刚《动物医学进展》北大核心 2020年第11期19-23,共5页; 为建立犬瘟热病毒(CDV)临床快速检测方法,针对CDV保守N基因依据重组酶聚合酶等温扩增(RPA)引物设计原理进行RPA引物探针设计,通过反应条件优化、敏感性试验、特异性试验和临床样品检测,建立了CDV实时荧光RT-RPA检测方法。结果显示,反应... 展开更多; 关键词犬瘟热病毒实时荧光反转录-重组酶聚合酶等温扩增检测; 在线阅读下载PDF 职称材料

流感病毒核酸检测方法研究进展被引量：13: 6; 作者徐敏向华《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2011年第1期89-92,共4页; 流感病毒可以引起人和动物高度接触性传染性疾病,对公共卫生和畜禽养殖业均造成极大的威胁。因此,准确而又快速的诊断方法对流感的防控起着非常重要的作用。近年来,流感病毒的核酸诊断技术发展较快,主要有RT-PCR、实时荧光定量RT-PCR、... 展开更多; 关键词流感病毒逆转录-聚合酶链反应实时荧光定量RT-PCR 基因芯片环介导等温扩增; 在线阅读下载PDF 职称材料

南方水稻黑条矮缩病毒的新的自然寄主被引量：13: 7; 作者朱俊子周倩 +1 位作者崔亚高必达《湖南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期58-60,共3页; 2010年,由南方水稻黑条矮缩病毒(SRBSDV)引起的新水稻矮缩病在湖南省大面积爆发。为确定南方水稻黑条矮缩病毒的自然寄主范围,采集湖南省永州零陵、邵阳隆回、郴州宜章等地发病田块及附近的禾本科作物及杂草,提取RNA后,用自行设计的专... 展开更多; 关键词南方水稻黑条矮缩病毒反转录-聚合酶链式扩增自然寄主; 在线阅读下载PDF 职称材料

禽流感基因诊断技术研究进展被引量：2: 8; 作者田丽娜王秀荣 +3 位作者杨忠苹石霖陶启蒙陈化兰《动物医学进展》 CSCD 2008年第8期60-62,共3页; 禽流感是由流感病毒引起的一种人和动物的高度传染性疾病,不但造成养禽业的巨大经济损失,还对人类公共卫生安全存在威胁。因此,快速、准确的基因诊断技术对于禽流感的防控显得非常重要。近年来,主要有RT-PCR技术、荧光定量RT-PCR技术、... 展开更多; 关键词禽流感反转录-聚合酶链反应核酸依赖扩增技术基因芯片; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名环介导等温扩增技术检测建兰花叶病毒被引量：10: 1; 作者许春英李逢慧罗超; 机构湖南农业大学东方科技学院动检创新实验室; 出处《现代农业科技》 2009年第8期11-12,14,共3页; 文摘为了建立检测建兰花叶病毒的快速实用分子生物学技术,该研究借助新兴的环介导等温扩增技术,建立了一种灵敏、特异、快速的分子生物学检测方法——体外等温扩增检测方法。设计了4条针对目的基因的6个位点的特异性引物,建立了一套从核酸抽提到LAMP检测快速检测方法。所建立的检测方法比RT-PCR更灵敏;且具有特异性,操作简单,不需要复杂的仪器,肉眼可直接观察检测结果。适合基层和现场检测。; 关键词建兰花叶病毒反转录聚合酶链反应环介导等温扩增技术; 分类号 S432.41 [农业科学—植物病理学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名山乌桕叶片DNA提取及ISSR-PCR反应体系优化被引量：9: 2; 作者黄旭萍黄一航黄敏王建超陈孝丑陈发兴; 机构福建农林大学园艺学院福建省农业科学院果树研究所福州植物园; 出处《森林与环境学报》 CSCD 北大核心 2021年第2期164-171,共8页; 基金福建省林业科技项目(闽林科便函〔2020〕9号)。; 文摘为研究南方优良乡土彩叶树种山乌桕的遗传多样性,并为山乌桕种质培育研究提供技术参考。以山乌桕叶片为试验材料,对山乌桕ISSR-PCR反应体系进行优化,比较试剂盒法、改良十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法和十二烷基硫酸钠(SDS)法对山乌桕叶片DNA的提取效果,并利用单因素试验和L 25(53)正交试验对DNA模板用量、引物浓度、2×Taq Master Mix添加量、退火温度和循环次数进行优化。结果表明,试剂盒法和改良CTAB法均可获得较高浓度和质量的DNA,都是提取山乌桕叶片DNA的良好方法;山乌桕叶片ISSR-PCR反应体系中,DNA模板用量对扩增效果影响最大,2×Taq Master Mix添加量的影响最小;山乌桕叶片ISSR-PCR的最优反应体系为:总体积20μL,其中含20 ng DNA模板1.5μL、2×Taq Master Mix 8.0μL、引物浓度0.8μmol·L^(-1)。山乌桕叶片ISSR-PCR的反应程序为:94℃预变性5 min、94℃变性30 s、51.9℃退火45 s、72℃延伸90 s、40个循环,72℃延伸10 min、4℃保存。; 关键词山乌桕 DNA提取简单重复序列区间-聚合酶链式扩增反应体系优化; Keywords Sapium discolor DNA extraction inter-simple sequence repeat-polymerase chain reaction(ISSR-PCR) system optimization; 分类号 S687.1 [农业科学—观赏园艺]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名牛轮状病毒RT-LAMP检测方法的建立被引量：5: 3; 作者李巍李宁袁万哲孙继国; 机构河北农业大学动物科技学院; 出处《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2012年第5期39-43,共5页; 基金河北省科技支撑计划(10220401D); 文摘建立一种适用于牛轮状病毒(BRV)的反转录-环介导等温扩增(RT-LAMP)的快速检测方法。根据GenBank中登录的BRV VP7基因序列,针对其保守区设计了4条引物,利用RT-LAMP方法进行检测,并优化了反应体系与反应时间,检测了该方法的特异性和灵敏度。结果表明,该方法在等温条件下只需要50min就能检测出结果,与普通RT-PCR相比,具有较短的检测时间、良好的特异性和较高的灵敏度。论文针对BRV建立的RT-LAMP快速检测方法操作简便、无需昂贵设备、结果可视,适用于BRV在基层的快速检测。; 关键词牛轮状病毒反转录-环介导等温扩增反转录-聚合酶链反应; Keywords BRV RT-LAMP RT-PCR; 分类号 S852.653 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名牛病毒性腹泻病毒内标双重RT-PCR检测方法的建立及初步应用被引量：3: 4; 作者季新成段琛王克栋史茜于学辉冉多良; 机构新疆出入境检验检疫局国际关系学院新疆农业大学动物医学院; 出处《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2014年第1期17-21,共5页; 基金新疆自治区高新技术项目(201010101 201141147) 国家质量监督检验检疫总局科研项目(2011IK017); 文摘为了对BVDV-1和BVDV-2进行同步检测,针对不同基因型牛病毒性腹泻病毒(BVDV)基因组高度保守的5′-UTR核苷酸序列设计特异性引物(扩增长度为288bp)。为了指示假阴性结果,以牛GAPDH基因为内标基因,设计特异性引物(扩增序列长度为152bp)。通过反应条件的优化,建立了BVDV通用型内标双重RT-PCR检测方法,该方法可以监测RNA提取与RT-PCR反应过程,指示假阴性结果的发生。该方法的检测灵敏度约为100TCID50/mL,且具有较好的特异性和可重复性。通过对566份临床样品检验,检测到阳性样品19份,阳性率3.36%。该方法可用于临床样品中BVDV检测,并可对检测结果进行质量控制。; 关键词牛病毒性腹泻病毒内标双重反转录-聚合酶链反应共扩增; Keywords Bovine viral diarrhea virus internal control duplex RT-PCR co-amplification; 分类号 S852.659.5 [农业科学—基础兽医学] Q789 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名犬瘟热病毒实时荧光RT-RPA检测方法的建立及应用被引量：3: 5; 作者张启龙傅彩霞张玮高晓龙王林程敏姮郑雪莹刘海莹周德刚; 机构北京市动物疫病预防控制中心; 出处《动物医学进展》北大核心 2020年第11期19-23,共5页; 基金北京市农业农村局科技新星计划项目(20190210)。; 文摘为建立犬瘟热病毒(CDV)临床快速检测方法,针对CDV保守N基因依据重组酶聚合酶等温扩增(RPA)引物设计原理进行RPA引物探针设计,通过反应条件优化、敏感性试验、特异性试验和临床样品检测,建立了CDV实时荧光RT-RPA检测方法。结果显示,反应体系中M-MLV反转录酶最适浓度为4 U/μL,所建CDV实时荧光RT-RPA检测方法特异性较好,敏感性最低可检测到5.68×102 copies/μL,高于国标RT-PCR(GB/T 27532-2011)检测方法。建立的CDV实时荧光RT-RPA检测方法具有较高的敏感性和特异性、操作简便、20 min内判定结果,可用于临床犬瘟热快速诊断,对犬瘟热的防控具有重要意义。; 关键词犬瘟热病毒实时荧光反转录-重组酶聚合酶等温扩增检测; Keywords Canine distemper virus real-time fluorescence reverse transcription-recombinase polymerase amplification detection; 分类号 S852.659.5 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名流感病毒核酸检测方法研究进展被引量：13: 6; 作者徐敏向华; 机构广东省农业科学院兽医研究所广东省兽医公共卫生开放实验室; 出处《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2011年第1期89-92,共4页; 基金广东省科技厅科技减灾恢复生产应急专项项目(2009B020600001) 广东省农业科学院院长基金项目(20090203); 文摘流感病毒可以引起人和动物高度接触性传染性疾病,对公共卫生和畜禽养殖业均造成极大的威胁。因此,准确而又快速的诊断方法对流感的防控起着非常重要的作用。近年来,流感病毒的核酸诊断技术发展较快,主要有RT-PCR、实时荧光定量RT-PCR、基因芯片、逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)等。论文对这些诊断技术的基本原理和应用现状进行了综述,并对其发展前景进行了展望。; 关键词流感病毒逆转录-聚合酶链反应实时荧光定量RT-PCR 基因芯片环介导等温扩增; Keywords Influenza virus RT-PCR real-time quantitative RT-PCR gene chip loop-mediated isothermal amplification; 分类号 S854.43 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名南方水稻黑条矮缩病毒的新的自然寄主被引量：13: 7; 作者朱俊子周倩崔亚高必达; 机构植物疾病控制与利用湖南省高校重点实验室; 出处《湖南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期58-60,共3页; 基金公益性行业(农业)科研专项(201003031) 湖南省科学技术厅项目(2010NK3021); 文摘 2010年,由南方水稻黑条矮缩病毒(SRBSDV)引起的新水稻矮缩病在湖南省大面积爆发。为确定南方水稻黑条矮缩病毒的自然寄主范围,采集湖南省永州零陵、邵阳隆回、郴州宜章等地发病田块及附近的禾本科作物及杂草,提取RNA后,用自行设计的专利引物对,对其进行RT-PCR检测,发现高粱、野燕麦、牛筋草是新的SRBSDV自然寄主。; 关键词南方水稻黑条矮缩病毒反转录-聚合酶链式扩增自然寄主; Keywords Southern rice black-streaked dwarf virus（SRBSDV） RT PCR natural host; 分类号 S435.111.49 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名禽流感基因诊断技术研究进展被引量：2: 8; 作者田丽娜王秀荣杨忠苹石霖陶启蒙陈化兰; 机构东北农业大学动物医学院中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室兽医生物技术国家重点实验室; 出处《动物医学进展》 CSCD 2008年第8期60-62,共3页; 基金防制禽流感高效生物制剂生产开发项目(2007DFR30360); 文摘禽流感是由流感病毒引起的一种人和动物的高度传染性疾病,不但造成养禽业的巨大经济损失,还对人类公共卫生安全存在威胁。因此,快速、准确的基因诊断技术对于禽流感的防控显得非常重要。近年来,主要有RT-PCR技术、荧光定量RT-PCR技术、核酸依赖扩增技术(NASBA)以及基因芯片等基因诊断技术。文章就这些方法的基本原理、检测优点以及应用现状进行综述,以期为有效控制禽流感的发生与流行提供有力技术支撑。; 关键词禽流感反转录-聚合酶链反应核酸依赖扩增技术基因芯片; Keywords Avian influenza virus RT-PCR NASBA ： microarray; 分类号 S852.659.5 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	环介导等温扩增技术检测建兰花叶病毒	许春英李逢慧罗超	《现代农业科技》	2009	10	在线阅读下载PDF 职称材料
2	山乌桕叶片DNA提取及ISSR-PCR反应体系优化	黄旭萍黄一航黄敏王建超陈孝丑陈发兴	《森林与环境学报》 CSCD 北大核心	2021	9	在线阅读下载PDF 职称材料
3	牛轮状病毒RT-LAMP检测方法的建立	李巍李宁袁万哲孙继国	《动物医学进展》 CSCD 北大核心	2012	5	在线阅读下载PDF 职称材料
4	牛病毒性腹泻病毒内标双重RT-PCR检测方法的建立及初步应用	季新成段琛王克栋史茜于学辉冉多良	《动物医学进展》 CSCD 北大核心	2014	3	在线阅读下载PDF 职称材料
5	犬瘟热病毒实时荧光RT-RPA检测方法的建立及应用	张启龙傅彩霞张玮高晓龙王林程敏姮郑雪莹刘海莹周德刚	《动物医学进展》北大核心	2020	3	在线阅读下载PDF 职称材料
6	流感病毒核酸检测方法研究进展	徐敏向华	《动物医学进展》 CSCD 北大核心	2011	13	在线阅读下载PDF 职称材料
7	南方水稻黑条矮缩病毒的新的自然寄主	朱俊子周倩崔亚高必达	《湖南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心	2012	13	在线阅读下载PDF 职称材料
8	禽流感基因诊断技术研究进展	田丽娜王秀荣杨忠苹石霖陶启蒙陈化兰	《动物医学进展》 CSCD	2008	2	在线阅读下载PDF 职称材料