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非洲马瘟病毒可视化RT-LAMP现场检测方法的建立
被引量：
8
1
作者
李富祥
赵文华
杨仕标
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第6期579-583,共5页
为建立非洲马瘟病毒(AHSV)可视化RT-LAMP检测方法,本研究根据AHSV外衣壳蛋白(VP7)基因保守序列设计2对特异性引物,通过反应条件优化建立了AHSV可视化RT-LAMP检测方法。结果显示,本实验所建立RT-LAMP方法的最佳反应条件为62℃1 h;利用该...
为建立非洲马瘟病毒(AHSV)可视化RT-LAMP检测方法,本研究根据AHSV外衣壳蛋白(VP7)基因保守序列设计2对特异性引物,通过反应条件优化建立了AHSV可视化RT-LAMP检测方法。结果显示,本实验所建立RT-LAMP方法的最佳反应条件为62℃1 h;利用该方法检测进口灭活冻干疫苗中的9个血清型AHSV以及马流感病毒、马传贫病毒、马动脉炎病毒和蓝舌病病毒的RNA,结果显示所有血清型AHSV RNA检测均为阳性,其它病毒RNA检测为阴性,该方法特异性较强;该方法最低可检测到3.2×10-9 ng/μL的RNA,敏感性是普通RT-PCR方法的1000倍。利用建立的RT-LAMP方法和普通RT-PCR方法对35份马血和5份驴血样品同时进行检测,结果显示二者阳性和阴性符合率均为100%。本研究在国内外首次建立了AHSV 9种血清型的可视化RT-LAMP检测方法,其具有特异性强、敏感性高、快速和高通量检测的优点,为非洲马瘟(AHS)快速的可视化现场诊断提供可行方法。
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关键词
非洲马瘟病毒
反转录环介等温扩增
可视化现场检测
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职称材料
蓝舌病病毒8型可视化RT-LAMP检测方法的建立
被引量：
2
2
作者
李富祥
赵文华
杨仕标
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第10期1027-1031,共5页
为建立蓝舌病病毒8型(BTV-8)可视化RT-LAMP检测方法,本研究根据BTV-8外衣壳蛋白(VP2)基因保守序列设计2对BTV-8血清型特异性引物,通过反应条件优化建立了BTV-8可视化RT-LAMP检测方法。该方法最佳反应条件为60℃1 h;利用本实验建立的方...
为建立蓝舌病病毒8型(BTV-8)可视化RT-LAMP检测方法,本研究根据BTV-8外衣壳蛋白(VP2)基因保守序列设计2对BTV-8血清型特异性引物,通过反应条件优化建立了BTV-8可视化RT-LAMP检测方法。该方法最佳反应条件为60℃1 h;利用本实验建立的方法检测BTV-8,以及其它23个血清型BTV以及口蹄疫病毒、小反刍兽疫病毒、鹿流行性出血热病毒、阿卡斑病毒和狂犬病病毒,结果显示除BTV-8外,该方法与其它病原无交叉反应,特异性较强;该方法最低可检测到8.3×10-10 ng/μL的病毒RNA,敏感性是OIE标准套式RT-PCR检测方法的10倍,敏感性较高。应用建立的RT-LAMP方法和普通RT-PCR方法对38份牛羊临床样品进行检测,两种方法检测结果一致均为阴性。本研究建立的BTV-8可视化RT-LAMP检测方法具有特异性强、敏感性高、操作简便、快速和高通量检测的优点,为BTV-8的可视化快速检测提供可行方法。
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关键词
蓝舌病病毒8型
反转录环介等温扩增
快速检测
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职称材料
版纳病毒和芒市病毒可视化RT-LAMP检测方法的建立及应用
3
作者
杨振兴
李卓然
+5 位作者
何于雯
李占鸿
李乐
廖德芳
杨恒
朱建波
《动物医学进展》
北大核心
2022年第6期6-12,共7页
为建立版纳病毒(BAV)和芒市病毒(MSV)的可视化RT-LAMP检测方法,根据我国分离的BAV(YNSZ043)和MSV(V301/YNJH/2019)毒株Seg-12基因的保守序列,分别设计2对特异性引物和1条环引物,通过反应条件优化,分别建立了2种病毒的可视化RT-LAMP检测...
为建立版纳病毒(BAV)和芒市病毒(MSV)的可视化RT-LAMP检测方法,根据我国分离的BAV(YNSZ043)和MSV(V301/YNJH/2019)毒株Seg-12基因的保守序列,分别设计2对特异性引物和1条环引物,通过反应条件优化,分别建立了2种病毒的可视化RT-LAMP检测方法,其最佳反应条件为64℃50 min,分别利用2种方法检测西藏环状病毒、流行性出血病病毒、蓝舌病病毒、中山病病毒、广西环状病毒和阿卡斑病毒等虫媒病毒的核酸样品,结果2种方法仅能分别检测出BAV和MSV,其他虫媒病毒均无非特异性扩增。灵敏度试验检出BAV和MSV的最低检测限制分别为13.7拷贝/μL和19.0拷贝/μL,敏感性是常规RT-PCR的10倍以上。应用2种病毒的RT-LAMP及RT-PCR方法分别对2596只蠓虫和蚊虫的核酸样品进行检测,结果阳性检出率均是RT-PCR的2倍以上。结果表明,建立的BAV和MSV可视化RT-LAMP检测方法具有特异性强、敏感性高和可视化等优点,为我国开展2种病毒的现场快速检测与流行病学研究提供了有效的技术支撑。
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关键词
版纳病毒
芒市病毒
反
转录
-
环
介
等温
扩
增
可视化检测
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职称材料
题名
非洲马瘟病毒可视化RT-LAMP现场检测方法的建立
被引量：
8
1
作者
李富祥
赵文华
杨仕标
机构
云南省畜牧兽医科学院云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室
出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第6期579-583,共5页
基金
国家重点研发计划项目(2017YFD0501805、2017YFD0501801)
云南省创新人才计划项目(2017HB090)。
文摘
为建立非洲马瘟病毒(AHSV)可视化RT-LAMP检测方法,本研究根据AHSV外衣壳蛋白(VP7)基因保守序列设计2对特异性引物,通过反应条件优化建立了AHSV可视化RT-LAMP检测方法。结果显示,本实验所建立RT-LAMP方法的最佳反应条件为62℃1 h;利用该方法检测进口灭活冻干疫苗中的9个血清型AHSV以及马流感病毒、马传贫病毒、马动脉炎病毒和蓝舌病病毒的RNA,结果显示所有血清型AHSV RNA检测均为阳性,其它病毒RNA检测为阴性,该方法特异性较强;该方法最低可检测到3.2×10-9 ng/μL的RNA,敏感性是普通RT-PCR方法的1000倍。利用建立的RT-LAMP方法和普通RT-PCR方法对35份马血和5份驴血样品同时进行检测,结果显示二者阳性和阴性符合率均为100%。本研究在国内外首次建立了AHSV 9种血清型的可视化RT-LAMP检测方法,其具有特异性强、敏感性高、快速和高通量检测的优点,为非洲马瘟(AHS)快速的可视化现场诊断提供可行方法。
关键词
非洲马瘟病毒
反转录环介等温扩增
可视化现场检测
Keywords
African horse sickness virus
RT-LAMP
visual field detection
分类号
S855.3 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
蓝舌病病毒8型可视化RT-LAMP检测方法的建立
被引量：
2
2
作者
李富祥
赵文华
杨仕标
机构
云南省畜牧兽医科学院云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室
出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第10期1027-1031,共5页
基金
国家重点研发计划项目(2017YFD0501805、2017YFD0501801)
云南省创新人才计划项目(2017HB090)
文摘
为建立蓝舌病病毒8型(BTV-8)可视化RT-LAMP检测方法,本研究根据BTV-8外衣壳蛋白(VP2)基因保守序列设计2对BTV-8血清型特异性引物,通过反应条件优化建立了BTV-8可视化RT-LAMP检测方法。该方法最佳反应条件为60℃1 h;利用本实验建立的方法检测BTV-8,以及其它23个血清型BTV以及口蹄疫病毒、小反刍兽疫病毒、鹿流行性出血热病毒、阿卡斑病毒和狂犬病病毒,结果显示除BTV-8外,该方法与其它病原无交叉反应,特异性较强;该方法最低可检测到8.3×10-10 ng/μL的病毒RNA,敏感性是OIE标准套式RT-PCR检测方法的10倍,敏感性较高。应用建立的RT-LAMP方法和普通RT-PCR方法对38份牛羊临床样品进行检测,两种方法检测结果一致均为阴性。本研究建立的BTV-8可视化RT-LAMP检测方法具有特异性强、敏感性高、操作简便、快速和高通量检测的优点,为BTV-8的可视化快速检测提供可行方法。
关键词
蓝舌病病毒8型
反转录环介等温扩增
快速检测
Keywords
Bluetongue virus serotype 8
RT-LAMP
visual detection
分类号
S855.3 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
版纳病毒和芒市病毒可视化RT-LAMP检测方法的建立及应用
3
作者
杨振兴
李卓然
何于雯
李占鸿
李乐
廖德芳
杨恒
朱建波
机构
云南省畜牧兽医科学院云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室
出处
《动物医学进展》
北大核心
2022年第6期6-12,共7页
基金
2019年云南省“万人计划”产业技术领军人才项目
基础研究计划青年项目(2018FD002)
国家重点研发计划项目(2017YFC1200505)。
文摘
为建立版纳病毒(BAV)和芒市病毒(MSV)的可视化RT-LAMP检测方法,根据我国分离的BAV(YNSZ043)和MSV(V301/YNJH/2019)毒株Seg-12基因的保守序列,分别设计2对特异性引物和1条环引物,通过反应条件优化,分别建立了2种病毒的可视化RT-LAMP检测方法,其最佳反应条件为64℃50 min,分别利用2种方法检测西藏环状病毒、流行性出血病病毒、蓝舌病病毒、中山病病毒、广西环状病毒和阿卡斑病毒等虫媒病毒的核酸样品,结果2种方法仅能分别检测出BAV和MSV,其他虫媒病毒均无非特异性扩增。灵敏度试验检出BAV和MSV的最低检测限制分别为13.7拷贝/μL和19.0拷贝/μL,敏感性是常规RT-PCR的10倍以上。应用2种病毒的RT-LAMP及RT-PCR方法分别对2596只蠓虫和蚊虫的核酸样品进行检测,结果阳性检出率均是RT-PCR的2倍以上。结果表明,建立的BAV和MSV可视化RT-LAMP检测方法具有特异性强、敏感性高和可视化等优点,为我国开展2种病毒的现场快速检测与流行病学研究提供了有效的技术支撑。
关键词
版纳病毒
芒市病毒
反
转录
-
环
介
等温
扩
增
可视化检测
Keywords
Banna virus(BAV)
Mangshi virus(MSV)
RT-LAMP
visual detection method
分类号
S852.659.4 [农业科学]
S854.43 [农业科学—基础兽医学]
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题名
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被引量
操作
1
非洲马瘟病毒可视化RT-LAMP现场检测方法的建立
李富祥
赵文华
杨仕标
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020
8
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职称材料
2
蓝舌病病毒8型可视化RT-LAMP检测方法的建立
李富祥
赵文华
杨仕标
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019
2
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职称材料
3
版纳病毒和芒市病毒可视化RT-LAMP检测方法的建立及应用
杨振兴
李卓然
何于雯
李占鸿
李乐
廖德芳
杨恒
朱建波
《动物医学进展》
北大核心
2022
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