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犬瘟热病毒巢式RT-PCR检测方法的建立及初步应用
被引量：
5
1
作者
杨井泉
韩猛立
+2 位作者
朱艳平
黄新
薄新文
《新疆农业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第6期1098-1103,共6页
【目的】建立一种犬瘟热病毒(CDV)RT-nested PCR检测方法。【方法】根据CDV弱毒株Onderstepoort的核衣壳蛋白(NP)基因序列设计套式引物,进行特异性、敏感性、重复性实验。【结果】特异性试验表明,该方法可以特异扩增出CDV NP基因片段,但...
【目的】建立一种犬瘟热病毒(CDV)RT-nested PCR检测方法。【方法】根据CDV弱毒株Onderstepoort的核衣壳蛋白(NP)基因序列设计套式引物,进行特异性、敏感性、重复性实验。【结果】特异性试验表明,该方法可以特异扩增出CDV NP基因片段,但从RNA病毒狂犬病病毒(RV)、DNA病毒犬细小病毒(CPV)以及正常Vero细胞中均未扩增出该条带。敏感性试验表明,RT-PCR可以扩增10-3稀释度的病毒RNA,而建立的RT-nested PCR可以扩增10-6稀释度的病毒RNA,后者的敏感性明显高于前者。重复性实验表明,不同情况下的3次重复实验,结果相同。用RT-nested PCR对石河子地区疑似感染CDV的病料进行检测,结果表明,该研究建立的RT-nested PCR不仅能有效的检测CDV感染,而且能够检测不同组织的样品。【结论】建立的RT-nested PCR检测方法,适用于动物CDV的快速诊断和流行病学调查。
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关键词
犬瘟热病毒
反转录巢式pcr
lit—
pcr
NP基因
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职称材料
上海地区宠物犬中戊型肝炎病毒流行病学调查
被引量：
7
2
作者
刘俊峰
华修国
+3 位作者
张文
李培锋
杨志彪
沈权
《安徽农业科学》
CAS
北大核心
2008年第14期5895-5896,5941,共3页
[目的]为探讨宠物犬在戊型肝炎病毒(HEV)流行环节中的作用提供依据。[方法]以散养宠物犬为研究对象,从上海地区及其周边地区随机采集70份血清样品,通过双抗原夹心ELISA试验检测抗HEV抗体,分析不同品种和不同性别宠物犬中血清抗HEV抗体...
[目的]为探讨宠物犬在戊型肝炎病毒(HEV)流行环节中的作用提供依据。[方法]以散养宠物犬为研究对象,从上海地区及其周边地区随机采集70份血清样品,通过双抗原夹心ELISA试验检测抗HEV抗体,分析不同品种和不同性别宠物犬中血清抗HEV抗体阳性率。利用反转录巢式PCR检测血清中病毒核酸。[结果]在70份宠物犬血清样品中,15份样品中抗HEV抗体呈阳性,阳性率为21.4%。上海地区宠物犬阳性率为27.5%,高于上海周边地区。在供试的宠物犬品种中,杜宾犬的HEV抗体阳性率较高(33.3%),其他品种宠物犬为11.1%～25.0%。雌性宠物犬中HEV阳性率为34.4%,显著高于雄性宠物犬。在各种宠物犬中未检测到HEV核酸颗粒。[结论]宠物犬对HEV敏感,在HE流行环节中具有不容忽视的作用。
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关键词
戊型肝炎病毒
反转录巢式pcr
双抗原夹心酶联免疫试验
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职称材料
猪瘟病毒NASBA-RT-LAMP快速检测方法的建立
被引量：
2
3
作者
杨平东
张明璀
曹立廷
《中国动物检疫》
CAS
2018年第7期78-81,共4页
本研究基于核酸序列依赖性扩增技术(NASBA)和反转录环介导等温扩增技术(RT-LAMP),建立了一种针对猪瘟病毒的,快速、灵敏、特异的两步法检测技术。该方法的检测灵敏度与反转录巢式PCR(RT-NestPCR)相当,最低能检测出46 pg/μL的病毒RNA。...
本研究基于核酸序列依赖性扩增技术(NASBA)和反转录环介导等温扩增技术(RT-LAMP),建立了一种针对猪瘟病毒的,快速、灵敏、特异的两步法检测技术。该方法的检测灵敏度与反转录巢式PCR(RT-NestPCR)相当,最低能检测出46 pg/μL的病毒RNA。该方法的建立为猪瘟病毒的快速诊断提供了新思路。
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关键词
核酸序列依赖性扩增技术
环介导等温扩增技术
反转录巢式pcr
猪瘟病毒
快速检测
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职称材料
题名
犬瘟热病毒巢式RT-PCR检测方法的建立及初步应用
被引量：
5
1
作者
杨井泉
韩猛立
朱艳平
黄新
薄新文
机构
石河子大学动物科技学院
新疆农垦科学院/新疆兵团绵羊繁育生物技术重点实验室
新乡学院生命科学与技术系
出处
《新疆农业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第6期1098-1103,共6页
基金
国家产业技术体系专项(NYCYTX-40-13)
家畜疫病病原生物学国家重点实验室开放基金课题(SKLVEB2009KFKT016)
文摘
【目的】建立一种犬瘟热病毒(CDV)RT-nested PCR检测方法。【方法】根据CDV弱毒株Onderstepoort的核衣壳蛋白(NP)基因序列设计套式引物,进行特异性、敏感性、重复性实验。【结果】特异性试验表明,该方法可以特异扩增出CDV NP基因片段,但从RNA病毒狂犬病病毒(RV)、DNA病毒犬细小病毒(CPV)以及正常Vero细胞中均未扩增出该条带。敏感性试验表明,RT-PCR可以扩增10-3稀释度的病毒RNA,而建立的RT-nested PCR可以扩增10-6稀释度的病毒RNA,后者的敏感性明显高于前者。重复性实验表明,不同情况下的3次重复实验,结果相同。用RT-nested PCR对石河子地区疑似感染CDV的病料进行检测,结果表明,该研究建立的RT-nested PCR不仅能有效的检测CDV感染,而且能够检测不同组织的样品。【结论】建立的RT-nested PCR检测方法,适用于动物CDV的快速诊断和流行病学调查。
关键词
犬瘟热病毒
反转录巢式pcr
lit—
pcr
NP基因
Keywords
canine distemper virus （CDV）
RT-nested
pcr
RT-
pcr
NP gene
分类号
S852.655 [农业科学—基础兽医学]
S851.34 [农业科学—预防兽医学]
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职称材料
题名
上海地区宠物犬中戊型肝炎病毒流行病学调查
被引量：
7
2
作者
刘俊峰
华修国
张文
李培锋
杨志彪
沈权
机构
内蒙古农业大学动物科学与医学学院
上海交通大学农业与生物学院上海市兽医生物技术重点实验室
出处
《安徽农业科学》
CAS
北大核心
2008年第14期5895-5896,5941,共3页
基金
上海科技攻关计划重点项目(063919121)资助
文摘
[目的]为探讨宠物犬在戊型肝炎病毒(HEV)流行环节中的作用提供依据。[方法]以散养宠物犬为研究对象,从上海地区及其周边地区随机采集70份血清样品,通过双抗原夹心ELISA试验检测抗HEV抗体,分析不同品种和不同性别宠物犬中血清抗HEV抗体阳性率。利用反转录巢式PCR检测血清中病毒核酸。[结果]在70份宠物犬血清样品中,15份样品中抗HEV抗体呈阳性,阳性率为21.4%。上海地区宠物犬阳性率为27.5%,高于上海周边地区。在供试的宠物犬品种中,杜宾犬的HEV抗体阳性率较高(33.3%),其他品种宠物犬为11.1%～25.0%。雌性宠物犬中HEV阳性率为34.4%,显著高于雄性宠物犬。在各种宠物犬中未检测到HEV核酸颗粒。[结论]宠物犬对HEV敏感,在HE流行环节中具有不容忽视的作用。
关键词
戊型肝炎病毒
反转录巢式pcr
双抗原夹心酶联免疫试验
Keywords
Hepatitis E virus
RT-nested
pcr
Double-antigen sandwich ELISA
分类号
S858.292 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
猪瘟病毒NASBA-RT-LAMP快速检测方法的建立
被引量：
2
3
作者
杨平东
张明璀
曹立廷
机构
重庆荣昌高新技术产业开发区管委会
西南大学荣昌校区
出处
《中国动物检疫》
CAS
2018年第7期78-81,共4页
文摘
本研究基于核酸序列依赖性扩增技术(NASBA)和反转录环介导等温扩增技术(RT-LAMP),建立了一种针对猪瘟病毒的,快速、灵敏、特异的两步法检测技术。该方法的检测灵敏度与反转录巢式PCR(RT-NestPCR)相当,最低能检测出46 pg/μL的病毒RNA。该方法的建立为猪瘟病毒的快速诊断提供了新思路。
关键词
核酸序列依赖性扩增技术
环介导等温扩增技术
反转录巢式pcr
猪瘟病毒
快速检测
Keywords
nucleic acid sequence-based amplification
reverse transcription-loop-mediated isthermal amplification
RT-nest-
pcr
CSFV
rapid detection
分类号
S851.3 [农业科学—预防兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
犬瘟热病毒巢式RT-PCR检测方法的建立及初步应用
杨井泉
韩猛立
朱艳平
黄新
薄新文
《新疆农业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2011
5
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
上海地区宠物犬中戊型肝炎病毒流行病学调查
刘俊峰
华修国
张文
李培锋
杨志彪
沈权
《安徽农业科学》
CAS
北大核心
2008
7
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
猪瘟病毒NASBA-RT-LAMP快速检测方法的建立
杨平东
张明璀
曹立廷
《中国动物检疫》
CAS
2018
2
在线阅读
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职称材料
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