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浅析反相高效液相色谱中样品溶剂对中药成分色谱保留行为的影响 被引量:1
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作者 张冬旭 张彤 +4 位作者 丁越 张永 杨正燕 王申澍 张新华 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2024年第4期1017-1027,共11页
目的探究反相高效液相色谱(RP-HPLC)中样品溶剂对中药成分色谱保留行为的影响。方法选取2020版《中国药典》一部收载的5种中药,参照各药材含量测定项下要求进行HPLC法测定,初步研究龙胆苦苷-龙胆、紫丁香苷-刺五加、松脂醇二葡萄糖苷-... 目的探究反相高效液相色谱(RP-HPLC)中样品溶剂对中药成分色谱保留行为的影响。方法选取2020版《中国药典》一部收载的5种中药,参照各药材含量测定项下要求进行HPLC法测定,初步研究龙胆苦苷-龙胆、紫丁香苷-刺五加、松脂醇二葡萄糖苷-杜仲、秦皮甲素-秦皮、腺苷-冬虫夏草受样品溶剂影响产生的色谱峰异常行为,深入探讨溶剂效应的机理,并提出解决方案。结果5种中药化学成分的色谱异常行为表现为保留时间漂移、色谱峰展宽、前延及裂分,产生上述异常现象的根本原因是溶解样品的溶剂和流动相存在某种不匹配,导致样品在溶剂与流动相中所处状态出现差异(溶剂效应)。消除溶剂效应的首选方法是用流动相或相近的溶剂溶解样品,此外,减小进样量和使用溶剂效应消除器可作为辅助手段。结论溶剂效应容易引起色谱峰异常,影响对化学成分定性和定量的准确性,应该在日常中药分析工作中予以重视。 展开更多
关键词 反相高效液相色 样品溶剂 溶剂效应 流动相 峰形异常 溶剂效应消除器
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反相高效液相色谱双梯度洗脱分离肽混合物及质谱分析 被引量:4
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作者 马岩 张万军 +5 位作者 卫军营 牛明 林虹君 秦伟捷 张养军 钱小红 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期205-211,共7页
复杂肽段混合物的有效分离是高覆盖率地鉴定蛋白质混合物的前提。"鸟枪法"(Shotgun)蛋白质组学研究策略通常采用蛋白酶切、二维液相色谱-串联质谱分析肽段混合物从而鉴定蛋白质,其中高效率地分离肽段混合物是关键步骤之一。... 复杂肽段混合物的有效分离是高覆盖率地鉴定蛋白质混合物的前提。"鸟枪法"(Shotgun)蛋白质组学研究策略通常采用蛋白酶切、二维液相色谱-串联质谱分析肽段混合物从而鉴定蛋白质,其中高效率地分离肽段混合物是关键步骤之一。本文通过pH梯度结合有机溶剂梯度的反相高效液相色谱(RP-HPLC)进行一维液相色谱分离,按等时间间隔收集馏分并将一个梯度的前段的一个馏分与后段一个馏分混合,然后进行纳升级液相色谱-质谱联用(nanoRPLC-MS/MS)分析。将该方法应用于酵母蛋白质的分离和鉴定,实验结果为:与常规的强阳离子色谱-反相液相色谱-质谱分离鉴定方法相比,采用pH梯度结合有机相梯度的RP-HPLC-RPLC-MS分离鉴定方法多鉴定到567个酵母蛋白质(簇,含有3 035个唯一肽段);其中鉴定到肽段的pI分布范围为3.42~12.01,相对分子质量范围为587.67~3 499.79;蛋白质的pI分布范围为3.82~12.19,相对分子质量范围为3 446.55~432 905。该结果表明这种方法在复杂体系蛋白质组分离鉴定中具有明显的优势,在蛋白质组学研究中有较好的应用前景。 展开更多
关键词 反相高效液相色 pH梯度洗脱 有机溶剂梯度洗脱 纳升级反相高效液相色谱-串联质谱 肽混合物 酵母
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天然酚酸类化合物的反相高效液相色谱分析 被引量:40
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作者 刘江云 杨学东 +1 位作者 徐丽珍 杨世林 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期245-248,共4页
采用反相高效液相色谱法梯度洗脱 ,对 12种天然酚酸进行定性定量分析研究。通过色谱条件的优化 ,确定了最佳的分离条件 ;同时探讨了流动相的酸度对分离结果的影响 ,以及酚酸结构与保留行为之间的关系。实验中以确定的最佳分离条件对 12... 采用反相高效液相色谱法梯度洗脱 ,对 12种天然酚酸进行定性定量分析研究。通过色谱条件的优化 ,确定了最佳的分离条件 ;同时探讨了流动相的酸度对分离结果的影响 ,以及酚酸结构与保留行为之间的关系。实验中以确定的最佳分离条件对 12种天然酚酸进行了定量分析 ,测定了各个化合物的回归方程、相关系数、线性范围、检测限和相对标准偏差。实验结果显示 ,各个化合物回归方程的相关系数r为 0 9980~ 0 9999,检测限为 0 96ng~ 4 10ng ,相对标准偏差RSD≤ 2 6 4 % ,满足定量分析要求。 展开更多
关键词 天然酚酸类化合物 分析 反相高效液相色 pH优化 保留行为 苯甲酸 肉桂酸
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柱前衍生-反相高效液相色谱法测定不同方法煮制的猪肉及其汤汁中的游离氨基酸 被引量:21
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作者 顾伟钢 张进杰 +4 位作者 辛梅 姚燕佳 纪蓉 吕兵兵 陈健初 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期1041-1045,共5页
建立了反相高效液相色谱(RP-HPLC)分离检测用不同方法煮制的猪肉及其汤汁中17种游离氨基酸的方法。样品经6-氨基喹啉基-N-羟基琥珀酰亚氨基甲酸酯(AQC)柱前衍生后,采用Nova-PakTM C18色谱柱分离,以AccQ.Tag Eluent A稀释液、乙腈和超纯... 建立了反相高效液相色谱(RP-HPLC)分离检测用不同方法煮制的猪肉及其汤汁中17种游离氨基酸的方法。样品经6-氨基喹啉基-N-羟基琥珀酰亚氨基甲酸酯(AQC)柱前衍生后,采用Nova-PakTM C18色谱柱分离,以AccQ.Tag Eluent A稀释液、乙腈和超纯水为流动相,梯度洗脱,检测波长为248 nm,在47 min内实现了17种氨基酸衍生物的基线分离。各氨基酸在1~100μmol/L(胱氨酸在0.5~50μmol/L)范围内呈现出良好的线性关系,相应的线性相关系数(r2)均大于0.99;17种氨基酸的检出限(以信噪比为3计)为0.29~0.96μmol/L;在汤汁中的加标回收率为86.5%~101.0%。该方法前处理过程简单,分离效果好,是检测肉及其汤汁中氨基酸的有效手段,可应用于肉制品的质量评定和工艺优化。 展开更多
关键词 反相高效液相色 柱前衍生 游离氨基酸 猪肉 汤汁
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用反相高效液相色谱-紫外检测法测定1-脱氧野尻霉素的含量 被引量:50
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作者 施新琴 崔为正 +2 位作者 裘立群 段祖安 吴小锋 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期146-149,共4页
以0.05 mol/L HC l为溶剂提取蚕粉和桑叶粉中的1-脱氧野尻霉素(DNJ),并用9-芴基氯甲酸甲酯(FMOC)为衍化剂,在pH 8.5的硼酸盐缓冲液中进行衍生化反应,生成具有紫外吸收的DNJ-FMOC络合物,再用反相高效液相色谱-紫外检测法对其分离测定。... 以0.05 mol/L HC l为溶剂提取蚕粉和桑叶粉中的1-脱氧野尻霉素(DNJ),并用9-芴基氯甲酸甲酯(FMOC)为衍化剂,在pH 8.5的硼酸盐缓冲液中进行衍生化反应,生成具有紫外吸收的DNJ-FMOC络合物,再用反相高效液相色谱-紫外检测法对其分离测定。结果表明,反应产物的色谱图分离效果良好,DNJ-FMOC的峰面积与DNJ浓度呈高度正相关关系,加样回收率平均为100.7%。精密度试验、稳定性试验、重现性试验、回收率试验表明,该方法稳定可靠,可以作为测定家蚕、桑叶及有关药物样品中DNJ含量的有效方法。 展开更多
关键词 1-脱氧野尻霉素 含量测定 反相高效液相色 紫外检测
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反相高效液相色谱法同时测定保健品中的四种类胡萝卜素 被引量:24
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作者 李赫 陈敏 +2 位作者 朱蕾 刘丽娟 王静钰 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期475-478,共4页
建立了不同剂型保健品中类胡萝h素的提取方法和同时测定保健品中4种类胡萝h素含量的高效液相色谱分析方法。采用Diamonsil^TM C18色谱柱(250mm×4.6mmi.d.,5μm),以乙腈和乙酸乙酯为流动相进行梯度洗脱,洗脱程序:先以100... 建立了不同剂型保健品中类胡萝h素的提取方法和同时测定保健品中4种类胡萝h素含量的高效液相色谱分析方法。采用Diamonsil^TM C18色谱柱(250mm×4.6mmi.d.,5μm),以乙腈和乙酸乙酯为流动相进行梯度洗脱,洗脱程序:先以100%乙腈洗脱15min,然后乙酸乙酯的含量在10min内从0增加到100%,再以100%乙腈洗脱5min;流速1mL/min;采用二极管阵列检测器检测,检测波长为450nm。以外标法定量,番茄红素、叶黄素、玉米黄素、β-胡萝h素4种组分的线性关系良好,相关系数为0.9994~0.9997,检测限为0.4~0.5mg/L。片剂样品、粉状样品、油状样品的加标回收率分别为95.3%~98.7%,93.7%~98.8%,97.1%~99.2%,相对标准偏差(RSD)分别为0.89%~2.0%,0.89%-2.8%,0.42%1.2%。该法简便、快速、准确,是保健品中多种类胡萝卜素定量测定的可靠方法之一。 展开更多
关键词 反相高效液相色 类胡萝卜素 番茄红素 叶黄素 玉米黄素 Β-胡萝卜素 保健品
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反相高效液相色谱法同时测定植物油中四种生育酚 被引量:29
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作者 于瑞祥 张欣 +2 位作者 张秀芹 方晓明 丁卓平 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期764-767,共4页
建立了反相液相色谱法同时测定植物油中4种生育酚的方法。样品用甲醇超声提取,离心后取上清液氮吹至干,甲醇定容后过有机相滤膜,反相C30柱(4.6 mm i.d.×250 mm,5μm)分离,甲醇-水-叔丁基甲醚(60∶15∶25)作流动相等度洗脱,荧光检测... 建立了反相液相色谱法同时测定植物油中4种生育酚的方法。样品用甲醇超声提取,离心后取上清液氮吹至干,甲醇定容后过有机相滤膜,反相C30柱(4.6 mm i.d.×250 mm,5μm)分离,甲醇-水-叔丁基甲醚(60∶15∶25)作流动相等度洗脱,荧光检测(λex=290 nm,λem=340 nm)。结果表明,4种生育酚的质量浓度在0.050~100.0 mg/L范围内与峰面积呈良好的线性关系,线性相关系数(r2)大于0.999。在加标水平为0.50、50.0、500.0 mg/kg时,4种生育酚的平均加标回收率为81.3%~93.2%,相对标准偏差(RSD)小于6%,α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚及δ-生育酚的方法检出限(LOD)分别为0.10、0.05、0.05、0.02mg/kg。方法准确、灵敏、可靠,可应用于实际样品的分析。 展开更多
关键词 反相高效液相色 荧光检测 生育酚 植物油
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反相高效液相色谱法测定乳清蛋白中的α-乳白蛋白和β-乳球蛋白 被引量:26
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作者 李慧 陈敏 +2 位作者 李赫 罗永康 戴蕴青 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期116-117,共2页
关键词 反相高效液相色谱(RP-HPLC) α-乳白蛋白(α-lactalbumin) β-乳球蛋白(β-lactoglobulin) 乳清蛋白(whey protein)
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水产食品中组胺的丹磺酰氯柱前衍生反相高效液相色谱测定方法的建立及应用 被引量:19
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作者 胡家伟 高榕 +4 位作者 曹敏杰 蔡秋凤 张凌晶 苏文金 刘光明 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第8期283-288,共6页
建立一种快速测定水产食品中组胺的丹磺酰氯柱前衍生反相高效液相色谱方法.该方法中样品经三氯乙酸提取、丹磺酰氯衍生,C18反相色谱柱分离,以70%乙腈和30%超纯水为流动相进行等度洗脱,254 nm波长处紫外检测.结果显示,组胺保留时间为5.... 建立一种快速测定水产食品中组胺的丹磺酰氯柱前衍生反相高效液相色谱方法.该方法中样品经三氯乙酸提取、丹磺酰氯衍生,C18反相色谱柱分离,以70%乙腈和30%超纯水为流动相进行等度洗脱,254 nm波长处紫外检测.结果显示,组胺保留时间为5.5 min,组胺在1~500μg/rnL范围内线性系数为0.999 9,仪器检出限(RSN=3)为0.5 μg/mL,定量限(RSN=10)为1.0 μg/mL,且重复性良好;采用该方法测定了16种水产品和19种水产加工食品中的组胺,结果显示含量在0~~682.22 mg/kg之间;样品添加不同质量浓度组胺的回收率为89.54%~101.92%.结果表明,该方法快速准确、灵敏度高、重复性好,适用于水产食品中组胺的测定.采用该方法检测了鲣鱼、鲭鱼和蓝圆鲹在不同温度条件下的组胺变化情况,结果发现,3种鱼在低温贮藏条件下的组胺含量明显低于高温贮藏条件下的含量,表明低温贮藏可有效抑制组胺产生. 展开更多
关键词 水产食品 组胺 丹磺酰氯 柱前衍生 反相高效液相色 低温贮藏
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反相高效液相色谱法定量分析木质素的主要降解产物 被引量:18
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作者 江智婧 朱均均 +3 位作者 李鑫 连之娜 余世袁 勇强 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期59-62,共4页
建立了反相高效液相色谱定量分析玉米秸秆蒸汽爆破预处理过程中产生的主要木质素降解产物的方法。采用C18色谱柱,柱温30℃,乙腈-水(含1.5%的醋酸)为流动相,梯度洗脱,流速为0.8mL/min,254nm和280nm波长下紫外检测,可实现4-羟基苯甲酸... 建立了反相高效液相色谱定量分析玉米秸秆蒸汽爆破预处理过程中产生的主要木质素降解产物的方法。采用C18色谱柱,柱温30℃,乙腈-水(含1.5%的醋酸)为流动相,梯度洗脱,流速为0.8mL/min,254nm和280nm波长下紫外检测,可实现4-羟基苯甲酸、香草酸、紫丁香酸、4-羟基苯甲醛、香草醛和紫丁香醛的有效分离。6种主要木质素降解产物线性回归方程相关系数为0.999 9-1.000 0,加标回收率均在96%以上,相对标准偏差低于2.5%(n=6),满足定量分析要求。 展开更多
关键词 反相高效液相色 酚类化合物 降解产物 木质素 玉米秸秆
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反相高效液相色谱法检测不同品种和叶位桑叶中1-脱氧野尻霉素 被引量:19
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作者 魏兆军 蒋磊 +2 位作者 周乐春 汪爱民 张松 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第16期258-261,共4页
建立以芴甲氧酰氯(FMOC-Cl)为衍化剂的柱前衍生化-反相高效液相紫外线检测法测定桑叶中1-脱氧野尻霉素(DNJ)含量的方法,并对不同品种、不同叶位桑叶中DNJ含量进行检测。结果表明:以0.05mol/LHCl为溶剂提取桑叶粉中的DNJ,用芴甲氧酰氯(FM... 建立以芴甲氧酰氯(FMOC-Cl)为衍化剂的柱前衍生化-反相高效液相紫外线检测法测定桑叶中1-脱氧野尻霉素(DNJ)含量的方法,并对不同品种、不同叶位桑叶中DNJ含量进行检测。结果表明:以0.05mol/LHCl为溶剂提取桑叶粉中的DNJ,用芴甲氧酰氯(FMOC-Cl)为衍生化试剂,在pH8.50硼酸盐缓冲液条件下,衍生化和RP-HPLC检测效果最好。反相高效液相色谱-紫外检测法检测DNJ时,流动相中乙腈:0.1%醋酸为55:45(V/V)时色谱分离效果最好,DNJ-FMOC的峰面积与DNJ浓度呈高度正相关关系,相关系数为0.9852。不同品种的桑叶中DNJ含量不同,本研究的15个样品中青阳青桑的DNJ含量最高,达到0.1486%,皮桑含量最低,为0.04291%。不同叶位桑叶的DNJ含量不同,第1叶位至第5叶位桑叶的DNJ含量逐渐降低,说明桑叶随着发育成熟,DNJ的含量逐渐降低。结果显示该方法快捷、稳定、灵敏、准确度高,适合桑叶中DNJ含量的检测。 展开更多
关键词 桑叶 1-脱氧野尻霉素 反相高效液相色 衍生化
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反相高效液相色谱法测定发酵饮料中有机酸和维生素C的含量 被引量:35
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作者 莫海涛 杜玉兰 +1 位作者 黎庆涛 秦菊霞 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期230-232,共3页
研究了利用高效液相色谱分离测定发酵饮料中10种有机酸和维生素C的方法。应用反相C18柱,3%CH3OH-0.05mol/L Na2HPO4(pH2.50)缓冲溶液作为流动相,流速为1.00mL/min,柱温为30℃,检测波长为215nm时,可以较好地分离和测定发酵饮料中常见的1... 研究了利用高效液相色谱分离测定发酵饮料中10种有机酸和维生素C的方法。应用反相C18柱,3%CH3OH-0.05mol/L Na2HPO4(pH2.50)缓冲溶液作为流动相,流速为1.00mL/min,柱温为30℃,检测波长为215nm时,可以较好地分离和测定发酵饮料中常见的10种有机酸和Vc。方法相对标准偏差0.048%~4.416%,回收率98.6%~101.9%,各成分的线性相关系数r>0.99,方法简便,具有较高的准确度和精确度,可应用于发酵饮料中有机酸和Vc的检测。 展开更多
关键词 反相高效液相色 有机酸 抗坏血酸 发酵饮料
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交替三线性分解算法与反相高效液相色谱-二极管阵列检测方法相结合同时测定苯二酚的位置异构体 被引量:12
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作者 孙剑奇 吴海龙 +3 位作者 莫翠云 陆剑忠 崔卉 俞汝勤 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期385-389,共5页
利用交替三线性分解算法与反相高效液相色谱 二极管阵列检测 (RP HPLC DAD)相结合 ,在色谱洗脱时间为1 0 86min~ 1 399min(间隔 1 / 1 50min)、紫外吸收波长为 2 68nm~ 2 98nm(间隔 1nm)时对苯二酚位置异构体的重叠色谱及光谱体系... 利用交替三线性分解算法与反相高效液相色谱 二极管阵列检测 (RP HPLC DAD)相结合 ,在色谱洗脱时间为1 0 86min~ 1 399min(间隔 1 / 1 50min)、紫外吸收波长为 2 68nm~ 2 98nm(间隔 1nm)时对苯二酚位置异构体的重叠色谱及光谱体系进行了分辨研究。分辨结果与实际结果一致。同时测定了水溶液中共存的邻苯二酚、间苯二酚和对苯二酚的含量 ,回收率分别为 (1 0 0 1± 1 0 ) % ,(99 4± 1 4) % ,(1 0 0 5± 1 7) %。研究结果表明 :该方法定量快速准确 ,实验操作步骤简单 ,解决了在干扰物存在条件下三者很难同时分辨的问题 ,说明三线性分解算法能有效地解决HPLC 展开更多
关键词 同时测定 位置异构体 交替三线性分解 反相高效液相色 二极管阵列检测 邻苯二酚 间苯二酚 对苯二酚
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反相高效液相色谱-化学发光法测定复合维生素片剂中的维生素B_1和B_2 被引量:20
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作者 张琰图 章竹君 +1 位作者 杨维平 田穗康 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期391-393,共3页
基于水溶性维生素在碱性介质中只有维生素B1(VB1)和维生素B2(VB2)可以被K3Fe(CN)6直接氧化产生化学发光的原理,建立了反相高效液相色谱(RP HPLC)分离柱后化学发光检测VB1和VB2的新方法,并成功应用于复合维生素B片剂中VB1和VB2的测定。... 基于水溶性维生素在碱性介质中只有维生素B1(VB1)和维生素B2(VB2)可以被K3Fe(CN)6直接氧化产生化学发光的原理,建立了反相高效液相色谱(RP HPLC)分离柱后化学发光检测VB1和VB2的新方法,并成功应用于复合维生素B片剂中VB1和VB2的测定。该方法测定VB1,VB2的线性范围分别为1 0×10-3~1 0g/L和1 0×10-3~0 1g/L,检出限分别为2×10-4g/L和8×10-4g/L。对1 0×10-2g/LVB1,VB2溶液连续11次测定的相对标准偏差分别为2 8%,0 9%。 展开更多
关键词 反相高效液相色 化学发光法 测定 复合维生素片剂 维生素B1 维生素B2 铁氰化钾
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反相高效液相色谱法测定黄酒中的有机酸 被引量:53
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作者 冯德明 张洋 +2 位作者 赵惠明 孙国昌 孙培龙 《中国酿造》 CAS 北大核心 2009年第3期157-161,共5页
建立了1种利用反相高效液相色谱法同时测定黄酒中9种有机酸的方法。应用反相C18色谱柱(AgilentZorbaxSB-C18250×4.6mm),以0.08mol/LKH2PO4为流动相,紫外检测波长215nm,将黄酒中草酸、酒石酸、丙酮酸、苹果酸、α-酮戊二酸、乳酸、... 建立了1种利用反相高效液相色谱法同时测定黄酒中9种有机酸的方法。应用反相C18色谱柱(AgilentZorbaxSB-C18250×4.6mm),以0.08mol/LKH2PO4为流动相,紫外检测波长215nm,将黄酒中草酸、酒石酸、丙酮酸、苹果酸、α-酮戊二酸、乳酸、乙酸、柠檬酸、琥珀酸一次性分离;并测定了国内市售的3种黄酒中的有机酸含量。除丙酮酸外各种有机酸的回收率>90%,变异系数<4%。该方法简便、快速、准确。 展开更多
关键词 反相高效液相色 黄酒 有机酸
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反相高效液相色谱法同时检测3种探针药物 被引量:14
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作者 扈金萍 闫淑莲 +1 位作者 徐艳霞 张锦楠 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期540-542,共3页
用反相高效液相色谱同时测定血清中咖啡因、氨苯砜、氯唑沙宗探针药物的质量浓度,以乙腈 磷酸盐缓冲体系(含0 02mol/L的磷酸二氢钾和0 02mol/L的三乙胺,pH6 5)(体积比为25∶75)为流动相,以安替比林为内标,经C18柱(250mm×4 6mmi d ,... 用反相高效液相色谱同时测定血清中咖啡因、氨苯砜、氯唑沙宗探针药物的质量浓度,以乙腈 磷酸盐缓冲体系(含0 02mol/L的磷酸二氢钾和0 02mol/L的三乙胺,pH6 5)(体积比为25∶75)为流动相,以安替比林为内标,经C18柱(250mm×4 6mmi d ,5 0μm)分离,紫外检测器检测,使3种探针药物得到较好的分离,并且在有效血药浓度范围内线性良好。该法简便、快速,能够为临床安全有效的用药提供科学的依据。 展开更多
关键词 同时检测 探针药物 反相高效液相色 咖啡因 氨苯砜 氯唑沙宗 药物代谢 临床安全 血药浓度
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新型荧光衍生试剂用于尿样中痕量游离雌二醇和雌三醇的反相高效液相色谱-荧光检测和质谱定性 被引量:12
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作者 赵怀鑫 孙志伟 +4 位作者 夏莲 孙学军 索有瑞 李玉林 尤进茂 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期164-168,共5页
合成了新型高灵敏度的荧光标记试剂10-乙基吖啶酮-2-磺酰氯(EASC)。采用EASC柱前衍生化实现了雌二醇(E2)和雌三醇(E3)的反相高效液相色谱(RP-HPLC)-荧光分析及柱后质谱鉴定。试剂EASC比丹磺酰氯(DNS-Cl)具有更高的紫外、荧光和质谱检测... 合成了新型高灵敏度的荧光标记试剂10-乙基吖啶酮-2-磺酰氯(EASC)。采用EASC柱前衍生化实现了雌二醇(E2)和雌三醇(E3)的反相高效液相色谱(RP-HPLC)-荧光分析及柱后质谱鉴定。试剂EASC比丹磺酰氯(DNS-Cl)具有更高的紫外、荧光和质谱检测灵敏度,其荧光发光强度是丹磺酰氯的1 000倍以上。EASC与E2和E3在NaHCO3缓冲液(pH10.5)中,于60℃下反应3min即可获得稳定的荧光产物,最大激发波长(λex)和最大发射波长(λem)分别为270nm和430nm。所建立的方法具有良好的重现性,线性回归系数大于0.999 0;检出限(S/N=3)为31fmol和40fmol。对实际根田鼠尿样中的雌二醇和雌三醇含量进行了测定,结果令人满意。 展开更多
关键词 10-乙基吖啶酮-2-磺酰氯 柱前衍生 反相高效液相色 丹磺酰氯 雌二醇 雌三醇 尿
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柱前衍生反相高效液相色谱法测定马尾松(Pinus massoniana)针叶中γ-氨基丁酸和17种游离氨基酸 被引量:12
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作者 邓文红 沈应柏 +2 位作者 李镇宇 张淑静 刘雪萍 《生态学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期4023-4029,共7页
建立了自动在线柱前衍生反相高效液相色谱法同时测定γ-氨基丁酸(GABA)和17种游离氨基酸含量的方法。以邻苯二甲醛-9-芴基甲基氯甲酸酯(OPA—FMOC)为衍生试剂进行衍生,AgilentHypersilAA-ODS-C18色谱柱分离,梯度洗脱,二极管阵列... 建立了自动在线柱前衍生反相高效液相色谱法同时测定γ-氨基丁酸(GABA)和17种游离氨基酸含量的方法。以邻苯二甲醛-9-芴基甲基氯甲酸酯(OPA—FMOC)为衍生试剂进行衍生,AgilentHypersilAA-ODS-C18色谱柱分离,梯度洗脱,二极管阵列检测器检测,在19min内分离测定了马尾松苗木针叶中GABA和17种游离氨基酸的含量。该方法测定氨基酸的回收率高于90.1%,精密度和重现性均较好(相对标准偏差为0.21%~2.81%),经测定,发现马尾松被马尾松毛虫取食后,所测18种氨基酸总量明显降低,从418.3μg·g^-1降低到310.4μg·g^-1鲜重。 展开更多
关键词 反相高效液相色 柱前衍生 游离氨基酸 Γ-氨基丁酸 马尾松
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反相高效液相色谱-蒸发光散射检测法同时测定阿胶中的17种未衍生氨基酸 被引量:28
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作者 鄢丹 韩玉梅 董小萍 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期359-362,共4页
建立了反相高效液相色谱-蒸发光散射检测法(HPLC—ELSD)同时测定中药阿胶中17种未衍生氨基酸含量的方法。采用Prevail^TM C18色谱柱(250mm×4.6mmi.d.,5μm),以乙腈-0.7%三氟醋酸溶液(含5.0mmol/L七氟丁酸)为流动相... 建立了反相高效液相色谱-蒸发光散射检测法(HPLC—ELSD)同时测定中药阿胶中17种未衍生氨基酸含量的方法。采用Prevail^TM C18色谱柱(250mm×4.6mmi.d.,5μm),以乙腈-0.7%三氟醋酸溶液(含5.0mmol/L七氟丁酸)为流动相进行线性梯度洗脱,流速为0.8mL/min,在漂移管温度115℃、氮气流量2.5L/min条件下,在25min内即可完成对阿胶中17种氨基酸的分离测定。氨基酸质量浓度为0.073~2.327g/L时,其峰面积的对数值与质量浓度的对数值线性关系良好;17种氨基酸的加样回收率为93.5%~104.8%;信噪比为3时,测得氨基酸的最低检测限介于18.2mg/L与54.6mg/L之间。该法快速、简便、准确,可作为阿胶中氨基酸的直接测定方法,亦为其他药物中氨基酸的分析提供了参考。 展开更多
关键词 反相高效液相色 蒸发光散射检测 未衍生化 氨基酸 阿胶
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应用反相高效液相色谱定性和定量浮游植物光合色素 被引量:15
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作者 胡俊 柳欣 +1 位作者 王磊 黄邦钦 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期19-28,共10页
利用本实验室建立的反相高效液相色谱实验体系分析了19种高纯度的浮游植物光合色素标准样品的特征参数。结果显示,该体系可将各种光合色素较好分离,但个别色素的保留时间、洗脱顺序、最大吸收波长及响应因子与文献报道的其他实验体系有... 利用本实验室建立的反相高效液相色谱实验体系分析了19种高纯度的浮游植物光合色素标准样品的特征参数。结果显示,该体系可将各种光合色素较好分离,但个别色素的保留时间、洗脱顺序、最大吸收波长及响应因子与文献报道的其他实验体系有所差异。表明在利用反相高效液相色谱定性、定量光合色素时不仅要参考其保留时间,还要参考其最大吸收波长,当色谱柱更换或方法改动后需重新测定响应因子。 展开更多
关键词 光合 浮游植物 反相高效液相色 定性 定量
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