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大鼠PTHrP亚基因的克隆及其真核反应质粒的构建
被引量:
1
1
作者
张树威
陈安民
+5 位作者
郭风劲
谢柏臻
祁军
王江
易磊
李昆朋
《医学研究生学报》
CAS
2008年第11期1128-1131,共4页
目的:克隆甲状旁腺相关肽(PTHrP)亚基因PTHrP(1-36)、PTHrP(38-94)和PTHrP(107-139)并构建四环素反应性元件调控的反应质粒pTRE-PTHrP(1-36)、pTRE-PTHrP(38-94)和pTRE-PTHrP(107-139),为调控PTHrP亚克隆在软骨前体细胞中的表达打下基...
目的:克隆甲状旁腺相关肽(PTHrP)亚基因PTHrP(1-36)、PTHrP(38-94)和PTHrP(107-139)并构建四环素反应性元件调控的反应质粒pTRE-PTHrP(1-36)、pTRE-PTHrP(38-94)和pTRE-PTHrP(107-139),为调控PTHrP亚克隆在软骨前体细胞中的表达打下基础。方法:提取骨骺干细胞的总RNA,以RT-PCR方法获得带有酶切位点的PTHrP(1-36)、PTHrP(38-94)和PTHrP(107-139)基因片段,扩增的DNA片段分别与含潮霉素筛选标记的四环素反应性元件载体pTRE-2Hyg双酶切后连接,转化扩增后对重组质粒进行提取和酶切、测序鉴定。结果:经酶切图谱分析和DNA序列测定证实目的基因已经插入重组质粒。结论:成功克隆出PTHrP亚克隆基因PTHrP(1-36)、PTHrP(38-94)和PTHrP(107-139)并构建了反应质粒pTRE-PTHrP(1-36)、pTRE-PTHrP(38-94)和pTRE-PTHrP(107-139),为进一步精确调控PTHrP亚基因的表达奠定了基础。
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关键词
骨骺干细胞
甲状旁腺相关肽
反应质粒
PTHrP亚基因
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职称材料
质粒缺口-连接酶链反应-ELISA法检测重庆地区围生期孕妇沙眼衣原体感染及基因分型
被引量:
2
2
作者
伍金林
韦红
+1 位作者
吴仕孝
钟晓云
《临床皮肤科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第5期280-282,共3页
目的:用质粒缺口-连接酶链反应(Gap-LCR)-ELISA法研究重庆地区围生期孕妇沙眼衣原体(CT)感染的现状及流行的主要基因型别,为其疫苗的研制提供分子流行病学依据。方法:以512例孕妇的首段尿(FVU)及其配对新生儿的鼻咽拭子为标本,用质粒Gap...
目的:用质粒缺口-连接酶链反应(Gap-LCR)-ELISA法研究重庆地区围生期孕妇沙眼衣原体(CT)感染的现状及流行的主要基因型别,为其疫苗的研制提供分子流行病学依据。方法:以512例孕妇的首段尿(FVU)及其配对新生儿的鼻咽拭子为标本,用质粒Gap-LCR-ELISA法检测CT感染者,对阳性母、婴配对标本DNA行omp1-VS4-PCR扩增,产物行双链DNA直接测序并作基因分型。结果:所检重庆地区孕妇CT感染率为7.42%,母婴垂直传播率为15.79%,以阴道分娩为主要传播途径。6对阳性母婴配对标本的CT基因序列一致,其中5对为E型,1对为H型,再次证实了CT的垂直传播途径。结论:质粒Gap-LCR-ELISA法可用于围生期无症状CT感染孕妇的大规模流行病学调查。重庆地区围生期CT流行型别仍以E型为主。
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关键词
沙眼衣原体
质粒
缺口-连接酶链
反应
-酶联免疫吸附法
感染
围生期
基因分型
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职称材料
用质粒Gap-LCR-ELISA法检测孕妇尿中沙眼衣原体
被引量:
3
3
作者
伍金林
韦红
+2 位作者
吴仕孝
钟晓云
余加林
《临床皮肤科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第9期523-525,共3页
目的:研究孕妇尿液中对质粒缺口-连接酶链反应(Gap-LCR)-ELISA法检测沙眼衣原体(CT)产生抑制作用的物质及其去除方法,以提高该方法检测无症状孕妇CT感染的灵敏度。方法:对181份孕妇首段尿(FVU)进行全面尿化学分析后,采用CT标准株“Spik...
目的:研究孕妇尿液中对质粒缺口-连接酶链反应(Gap-LCR)-ELISA法检测沙眼衣原体(CT)产生抑制作用的物质及其去除方法,以提高该方法检测无症状孕妇CT感染的灵敏度。方法:对181份孕妇首段尿(FVU)进行全面尿化学分析后,采用CT标准株“Spike”法(铆钉法),对出现Gap—LCR—ELISA抑制的标本用多因素非条件Logistic回归分析与抑制作用相关的成分,在进行一系列去抑制处理后比较各方法的转阳率。结果:孕妇FVU对质粒Gap-LCR-ELISA检测CT的抑制率为6.08%(11/181),其中白细胞和磷酸盐结晶与抑制作用相关;对FVU作-70℃~37℃快速冻融2次的预处理可使90.91%的假阴性转为阳性,并对模板无明显降解作用。结论:孕妇尿液中确有对Gap—LCR—ELISA产生抑制作用的物质存在,可通过改良标本预处理的方法降低其所致的假阴性。
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关键词
沙眼衣原体
尿
孕妇
质粒
缺口-连接酶链
反应
-酶联免疫吸附法
抑制物
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职称材料
题名
大鼠PTHrP亚基因的克隆及其真核反应质粒的构建
被引量:
1
1
作者
张树威
陈安民
郭风劲
谢柏臻
祁军
王江
易磊
李昆朋
机构
华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科
出处
《医学研究生学报》
CAS
2008年第11期1128-1131,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(批准号:30571872)
教育部博士点基金资助项目[批准号:(2005)216]
文摘
目的:克隆甲状旁腺相关肽(PTHrP)亚基因PTHrP(1-36)、PTHrP(38-94)和PTHrP(107-139)并构建四环素反应性元件调控的反应质粒pTRE-PTHrP(1-36)、pTRE-PTHrP(38-94)和pTRE-PTHrP(107-139),为调控PTHrP亚克隆在软骨前体细胞中的表达打下基础。方法:提取骨骺干细胞的总RNA,以RT-PCR方法获得带有酶切位点的PTHrP(1-36)、PTHrP(38-94)和PTHrP(107-139)基因片段,扩增的DNA片段分别与含潮霉素筛选标记的四环素反应性元件载体pTRE-2Hyg双酶切后连接,转化扩增后对重组质粒进行提取和酶切、测序鉴定。结果:经酶切图谱分析和DNA序列测定证实目的基因已经插入重组质粒。结论:成功克隆出PTHrP亚克隆基因PTHrP(1-36)、PTHrP(38-94)和PTHrP(107-139)并构建了反应质粒pTRE-PTHrP(1-36)、pTRE-PTHrP(38-94)和pTRE-PTHrP(107-139),为进一步精确调控PTHrP亚基因的表达奠定了基础。
关键词
骨骺干细胞
甲状旁腺相关肽
反应质粒
PTHrP亚基因
Keywords
Precartilaginous stem cell
Parathyroid hormone-related peptide
Responsive plasmid
分类号
Q785 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
质粒缺口-连接酶链反应-ELISA法检测重庆地区围生期孕妇沙眼衣原体感染及基因分型
被引量:
2
2
作者
伍金林
韦红
吴仕孝
钟晓云
机构
重庆医科大学附属儿童医院新生儿科
重庆妇幼保健院儿科
出处
《临床皮肤科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第5期280-282,共3页
基金
国家自然科学基金资助项目(30200300)
文摘
目的:用质粒缺口-连接酶链反应(Gap-LCR)-ELISA法研究重庆地区围生期孕妇沙眼衣原体(CT)感染的现状及流行的主要基因型别,为其疫苗的研制提供分子流行病学依据。方法:以512例孕妇的首段尿(FVU)及其配对新生儿的鼻咽拭子为标本,用质粒Gap-LCR-ELISA法检测CT感染者,对阳性母、婴配对标本DNA行omp1-VS4-PCR扩增,产物行双链DNA直接测序并作基因分型。结果:所检重庆地区孕妇CT感染率为7.42%,母婴垂直传播率为15.79%,以阴道分娩为主要传播途径。6对阳性母婴配对标本的CT基因序列一致,其中5对为E型,1对为H型,再次证实了CT的垂直传播途径。结论:质粒Gap-LCR-ELISA法可用于围生期无症状CT感染孕妇的大规模流行病学调查。重庆地区围生期CT流行型别仍以E型为主。
关键词
沙眼衣原体
质粒
缺口-连接酶链
反应
-酶联免疫吸附法
感染
围生期
基因分型
Keywords
Chlamydia trachomatis
Gap-LCR-ELISA
infection, perinatal
genotyping
分类号
R374.1 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
用质粒Gap-LCR-ELISA法检测孕妇尿中沙眼衣原体
被引量:
3
3
作者
伍金林
韦红
吴仕孝
钟晓云
余加林
机构
重庆医科大学附属儿童医院儿科研究所
出处
《临床皮肤科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第9期523-525,共3页
基金
国家自然科学基金资助项目(30200300)
文摘
目的:研究孕妇尿液中对质粒缺口-连接酶链反应(Gap-LCR)-ELISA法检测沙眼衣原体(CT)产生抑制作用的物质及其去除方法,以提高该方法检测无症状孕妇CT感染的灵敏度。方法:对181份孕妇首段尿(FVU)进行全面尿化学分析后,采用CT标准株“Spike”法(铆钉法),对出现Gap—LCR—ELISA抑制的标本用多因素非条件Logistic回归分析与抑制作用相关的成分,在进行一系列去抑制处理后比较各方法的转阳率。结果:孕妇FVU对质粒Gap-LCR-ELISA检测CT的抑制率为6.08%(11/181),其中白细胞和磷酸盐结晶与抑制作用相关;对FVU作-70℃~37℃快速冻融2次的预处理可使90.91%的假阴性转为阳性,并对模板无明显降解作用。结论:孕妇尿液中确有对Gap—LCR—ELISA产生抑制作用的物质存在,可通过改良标本预处理的方法降低其所致的假阴性。
关键词
沙眼衣原体
尿
孕妇
质粒
缺口-连接酶链
反应
-酶联免疫吸附法
抑制物
Keywords
Chlamydia trachomatis
urine, pregnant women
plasmid Gap-LCR-ELISA
inhibitors
分类号
R374.1 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
大鼠PTHrP亚基因的克隆及其真核反应质粒的构建
张树威
陈安民
郭风劲
谢柏臻
祁军
王江
易磊
李昆朋
《医学研究生学报》
CAS
2008
1
在线阅读
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职称材料
2
质粒缺口-连接酶链反应-ELISA法检测重庆地区围生期孕妇沙眼衣原体感染及基因分型
伍金林
韦红
吴仕孝
钟晓云
《临床皮肤科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
用质粒Gap-LCR-ELISA法检测孕妇尿中沙眼衣原体
伍金林
韦红
吴仕孝
钟晓云
余加林
《临床皮肤科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2004
3
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