检索结果-维普期刊中文期刊服务平台

SAT2型口蹄疫病毒南非地区分离株结构蛋白VP1及其C端的表达、纯化和反应原性分析被引量：3: 1; 作者高闪电常惠芸 +5 位作者独军政邵军军丛国正林彤韩雪清谢庆阁《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期631-634,共4页; 目的：表达SAT2型口蹄疫病毒结构蛋白VPl及其C端，进行反应原性分析并制备多克隆抗体。方法：以SAT2型口蹄疫病毒南非地区分离株结构蛋白VPl编码区的重组克隆载体为模板，设计特异性引物，扩增VPl基因及其C端编码区，然后将该其分别克... 展开更多; 关键词 SAT2型口蹄疫病毒结构蛋白VP1 原核表达反应原性分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

口蹄疫病毒非结构蛋白3D原核表达、纯化和反应原性分析被引量：3: 2; 作者骆继怀杨利恒 +3 位作者高闪电独军政常惠芸薛慧文《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期7-12,共6页; 采用RT-PCR技术扩增获得口蹄疫病毒(FMDV)细胞毒O/Akesu/58的非结构蛋白3D(NSP 3D)基因编码区,并定向克隆到pProexHTb原核表达载体上,再将重组pProex-3D转化至大肠杆菌BL21,经IPTG诱导,表达产物用亲和层析法纯化,经SDS-PAGE鉴定和Wester... 展开更多; 关键词口蹄疫病毒 3D基因非结构蛋白反应原性分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

羊口疮病毒B2L基因的原核表达、纯化及反应原性分析被引量：4: 3; 作者石正旺刘华南 +1 位作者胡永浩郑海学《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期1-5,10,共6页; 【目的】克隆和表达羊口疮病毒(ORFV)的B2L基因,进而纯化并分析其反应原性.【方法】根据GenBank已发表的ORFV(GQ328006)的B2L基因序列设计一对特异引物,以提取阳性临床样品的总DNA为模板,通过PCR方法获得ORFV的B2L基因,将该基因片段连... 展开更多; 关键词羊口疮病毒 B2L基因原核表达纯化反应原性分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

H7亚型禽流感病毒HA基因的原核表达及表达产物的反应原性分析: 4; 作者董斌陈海超 +7 位作者杨伦耿文学熊晓妍孙兴臣李敏婕陈闻蒋家森许家荣《江苏农业科学》北大核心 2016年第10期49-49,50,51,52,共4页; 为构建新型H7亚型禽流感HA基因的原核表达载体,并在大肠杆菌中进行表达。从NCBI数据库下载H7亚型禽流感HA全基因序列,合成HA基因;定向克隆到原核表达载体p ET-32a(+)的多克隆位点中,构建重组原核表达质粒p ET-32a(+)-HA;转化入大肠杆菌B... 展开更多; 关键词 H7N9禽流感病毒 HA基因 pET32a(+) 原核表达反应原性分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

环形泰勒虫TA13815蛋白的原核表达及反应原性分析: 5; 作者戚姣姣蒋晨赵洪喜《农业科学研究》 2023年第1期15-21,共7页; 为研究环形泰勒虫(Theileria annulata)TA13815蛋白功能,对环形泰勒虫虫体蛋白TA13815基因的核苷酸序列及编码蛋白的氨基酸序列进行生物信息学分析,构建pET30a-TA13815重组表达载体,并对其进行原核表达及反应原性分析。SDS-PAGE结果显示... 展开更多; 关键词环形泰勒虫 TA13815蛋白原核表达反应原性分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名SAT2型口蹄疫病毒南非地区分离株结构蛋白VP1及其C端的表达、纯化和反应原性分析被引量：3: 1; 作者高闪电常惠芸独军政邵军军丛国正林彤韩雪清谢庆阁; 机构中国农业科学院兰州兽医研究所国家口蹄疫参考实验室家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室中国检验检疫科学研究院动植物检疫研究所; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期631-634,共4页; 基金国家“十一五”重大科技支撑计划(2006BAD06A14); 文摘目的：表达SAT2型口蹄疫病毒结构蛋白VPl及其C端，进行反应原性分析并制备多克隆抗体。方法：以SAT2型口蹄疫病毒南非地区分离株结构蛋白VPl编码区的重组克隆载体为模板，设计特异性引物，扩增VPl基因及其C端编码区，然后将该其分别克隆至原核表达载体pET-30a（＋）中，转化大肠杆菌工程菌株BL21（DE3）plysS，经IPTG诱导，以金属离子螯合层析法对表达的VPl、VP1C端融合蛋白进行纯化，经Westernblot对其反应原性进行分析。用纯化的蛋白免疫新西兰大耳白兔制备其多克隆抗体，以ELISA方法测定抗体效价。结果：实现了SAT2型口蹄疫病毒结构蛋白VPl及其C端的高效表达，表达产物主要以包涵体的形式存在。SDS—PAGE显示纯化的目的蛋白分别在相对分子质量35000和19000处有单一目的条带，具有较高的纯度。Western blot结果显示，纯化的VP1及其C端均可与牛SAT2型FMDV阳性血清反应，而与阴性对照血清无交叉反应。结论：用纯化的VPl及VP1C融合蛋白免疫新西兰大耳白兔制备的多克隆抗体效价达1：12800以上，具有较高的特异性。; 关键词 SAT2型口蹄疫病毒结构蛋白VP1 原核表达反应原性分析; Keywords FMDV serotype SAT2 structural protein VP1 prokaryotic expression reactivity analysis; 分类号 Q786 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名口蹄疫病毒非结构蛋白3D原核表达、纯化和反应原性分析被引量：3: 2; 作者骆继怀杨利恒高闪电独军政常惠芸薛慧文; 机构甘肃农业大学动物医学院中国农业科学院兰州兽医研究所; 出处《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期7-12,共6页; 基金农业部转基因重大专项(2008ZX08011-004 2009ZX08007-008B 2009ZX08006-002B); 文摘采用RT-PCR技术扩增获得口蹄疫病毒(FMDV)细胞毒O/Akesu/58的非结构蛋白3D(NSP 3D)基因编码区,并定向克隆到pProexHTb原核表达载体上,再将重组pProex-3D转化至大肠杆菌BL21,经IPTG诱导,表达产物用亲和层析法纯化,经SDS-PAGE鉴定和Western-blot分析抗原性;以纯化的表达蛋白免疫豚鼠制备其多克隆抗体,ELISA测定抗体效价,间接免疫荧光法检测制备的豚鼠抗NSP 3D多克隆抗体与细胞毒天然抗原的反应原性.结果表明:表达的目的蛋白大小为53ku左右;ELISA结果表明,制备的多克隆抗体效价达1∶1 024以上;Western-blot分析表明,纯化后的蛋白能与FMDV感染动物血清发生特异性反应;间接免疫荧光检测发现,豚鼠抗3D蛋白多克隆抗体可与细胞毒天然抗原反应,与阴性对照未见反应.; 关键词口蹄疫病毒 3D基因非结构蛋白反应原性分析; Keywords foot-and-mouth disease virus （FMDV） 3D gene non-structural proteim reactivity analysis; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名羊口疮病毒B2L基因的原核表达、纯化及反应原性分析被引量：4: 3; 作者石正旺刘华南胡永浩郑海学; 机构甘肃农业大学动物医学院中国农业科学院兰州兽医研究所; 出处《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期1-5,10,共6页; 基金国家“863”计划项目(2011AA10A211-1) 国际原子能机构项目(16025/R) 国家自然科学基金项目(31500617); 文摘【目的】克隆和表达羊口疮病毒(ORFV)的B2L基因,进而纯化并分析其反应原性.【方法】根据GenBank已发表的ORFV(GQ328006)的B2L基因序列设计一对特异引物,以提取阳性临床样品的总DNA为模板,通过PCR方法获得ORFV的B2L基因,将该基因片段连接至原核表达载体pET-30a(+)上,获得重组质粒pET-30a(+)-B2L.将此重组质粒转化BL21(DE3)感受态细胞,挑取单克隆进行扩大培养,经IPTG诱导获得重组融合蛋白.用SDS-PAGE和Western-blotting对表达的目的蛋白进行分析.【结果】成功获得重组质粒pET-30a(+)-B2L,读码框正确.获得了43ku的表达产物,与预期目的蛋白大小相符;纯化后的目的蛋白能与ORFV阳性血清发生特异反应.【结论】成功对ORFV-B2L蛋白进行了原核表达,且纯化后蛋白具有良好的反应原性.; 关键词羊口疮病毒 B2L基因原核表达纯化反应原性分析; Keywords ORFV B2L gene prokaryotic expression purification reactogenicity analysis; 分类号 S852.6 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名H7亚型禽流感病毒HA基因的原核表达及表达产物的反应原性分析: 4; 作者董斌陈海超杨伦耿文学熊晓妍孙兴臣李敏婕陈闻蒋家森许家荣; 机构南京农业大学南京千里光生物技术有限公司江苏省句容市科兴养殖基地句容市浩源农业科技有限公司; 出处《江苏农业科学》北大核心 2016年第10期49-49,50,51,52,共4页; 基金江苏省句容市科委项目(编号:NY2013029) 江苏省镇江市农业科技支撑项目(编号:SBK2014022021) +2 种基金江苏高校优势学科建设工程资助项目; 文摘为构建新型H7亚型禽流感HA基因的原核表达载体,并在大肠杆菌中进行表达。从NCBI数据库下载H7亚型禽流感HA全基因序列,合成HA基因;定向克隆到原核表达载体p ET-32a(+)的多克隆位点中,构建重组原核表达质粒p ET-32a(+)-HA;转化入大肠杆菌BL21(DE3)中经IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE和Western-blot法鉴定。结果显示,重组质粒经双酶切及基因测序鉴定构建正确;重组的HA融合蛋白约为84 ku,大小与预期融合蛋白大小一致;重组HA融合蛋白可以与His标签单克隆抗体特异性结合,与H7阳性血清有较强的反应原性。成功构建了HA基因原核表达载体,并在大肠杆菌BL21(DE3)中获得重组HA融合蛋白表达。; 关键词 H7N9禽流感病毒 HA基因 pET32a(+) 原核表达反应原性分析; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名环形泰勒虫TA13815蛋白的原核表达及反应原性分析: 5; 作者戚姣姣蒋晨赵洪喜; 机构宁夏大学农学院; 出处《农业科学研究》 2023年第1期15-21,共7页; 基金国家自然科学基金项目(31760727) 宁夏自然科学基金项目(2021AAC03011)。; 文摘为研究环形泰勒虫(Theileria annulata)TA13815蛋白功能,对环形泰勒虫虫体蛋白TA13815基因的核苷酸序列及编码蛋白的氨基酸序列进行生物信息学分析,构建pET30a-TA13815重组表达载体,并对其进行原核表达及反应原性分析。SDS-PAGE结果显示,蛋白的分子质量大约为29.663 ku,主要以包涵体形式表达,条带位置显示蛋白的分子质量比预期大,蛋白可能存在翻译后修饰。通过qPCR分析环形泰勒虫3个不同发育阶段,结果显示TA13815 mRNA在3个阶段均有表达,且在裂殖体阶段表达量最高。本试验成功表达了环形泰勒虫TA13815重组蛋白,该重组蛋白有较好的反应原性,且能与抗His标签蛋白的单克隆抗体和环形泰勒虫阳性血清发生特异性反应,而与健康牛血清无交叉反应。TA13815蛋白与东方泰勒虫的核苷酸和蛋白同源性均小于68%,表明该重组蛋白可作为间接ELISA诊断方法的备选抗原。; 关键词环形泰勒虫 TA13815蛋白原核表达反应原性分析; Keywords Theileria annulata TA13815 protein prokaryotic expression reactivity analysis; 分类号 S855.9 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	SAT2型口蹄疫病毒南非地区分离株结构蛋白VP1及其C端的表达、纯化和反应原性分析	高闪电常惠芸独军政邵军军丛国正林彤韩雪清谢庆阁	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2010	3	在线阅读下载PDF 职称材料
2	口蹄疫病毒非结构蛋白3D原核表达、纯化和反应原性分析	骆继怀杨利恒高闪电独军政常惠芸薛慧文	《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2012	3	在线阅读下载PDF 职称材料
3	羊口疮病毒B2L基因的原核表达、纯化及反应原性分析	石正旺刘华南胡永浩郑海学	《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2016	4	在线阅读下载PDF 职称材料
4	H7亚型禽流感病毒HA基因的原核表达及表达产物的反应原性分析	董斌陈海超杨伦耿文学熊晓妍孙兴臣李敏婕陈闻蒋家森许家荣	《江苏农业科学》北大核心	2016	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	环形泰勒虫TA13815蛋白的原核表达及反应原性分析	戚姣姣蒋晨赵洪喜	《农业科学研究》	2023	0	在线阅读下载PDF 职称材料