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题名转基因玉米59122品系的特异性检测
被引量：8
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作者
许文涛
杨蓉
陆姣
张南
罗云波
何景
黄昆仑
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机构
中国农业大学食品科学与营养工程学院食品安全实验室
农业部转基因产品检验监督测试中心(北京)
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出处
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2011年第4期139-142,共4页
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基金
国家"863"计划项目(2006AA10Z440)
国家自然科学基金项目(30800770)
国家转基因生物新品种培育重大专项(2008ZX08012-001)
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文摘
使用反向聚合酶链式反应(PCR)技术克隆了转基因玉米59122的外源基因与玉米基因组之间的两段侧翼序列,并据其左侧侧翼序列设计了具品系特异性的引物,运用半巢式PCR技术建立了59122的品系特异性二重PCR检测方法,扩增片段100bp,横跨pat终止子与转基因玉米侧翼基因之间。以转基因玉米59122、MON863、MON810、GA21、NK603,转基因大豆Roundup Ready和转基因油菜GT73等为材料,证明本方法与其他转基因作物具有高特异性。本方法在检测59122时,确定出连接体系中线性DNA的最佳质量浓度为1ng/μL左右,检出限达到0.1%,灵敏度为38个单倍体基因组拷贝数。因此可准确、快速、高效地检测转基因玉米及其产品,或作为常规PCR定性检测后的验证方法。
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关键词
转基因作物
品系特异性检测
半巢式聚合酶链式反应
反向聚合酶链式反应
二重聚合酶链式反应
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Keywords
genetically modified crop
event-specific transgenic detection
semi-nested polymerase chain reaction
inverse polymerase chain reaction
duplex polymerase chain reaction
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分类号
Q789
[生物学—分子生物学]
S513
[农业科学—作物学]
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