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聚合酶链反应(PCR)检测鸭瘟病毒方法的建立和应用 被引量:12
1
作者 宋涌 程安春 +6 位作者 汪铭书 刘菲 廖永洪 袁桂萍 韩晓英 徐超 陈孝跃 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2005年第2期17-20,共4页
关键词 传染病 聚合反应(pcr) 联免疫吸附试验(ELIsA) 血性 琼脂凝胶 首次 血清中和试验 鸭瘟病毒 DPV 血凝试验
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用聚合酶链反应(PCR)检测对虾杆状病毒 被引量:4
2
作者 郭福生 孙淑芳 +3 位作者 徐瑞 吴时友 姚龙涛 徐菊洪 《中国动物检疫》 CAS 1994年第6期5-6,共2页
用聚合酶苗反应(PCR),对36份养殖中国对虾,13份海水、虾池底泥、饵料生物及其它养殖环境中的甲壳动物进行了杆状病毒检测,共检出带毒虾23份,带毒海水1份。电子显微镜技术证实了检测的可靠性。
关键词 中国对虾 杆状病毒 pcr 聚合反应
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聚合酶链反应(PCR)方法检测远缘链球菌 被引量:4
3
作者 邢向辉 杨富生 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期594-597,共4页
目的 :建立一种快速、特异、敏感的远缘链球菌PCR检测方法。方法 :根据已发表的远缘链球菌葡聚糖酶基因 (dexA)的特异片断设计一对寡核苷酸引物 ,对 12种变形链球菌群中包含a~h 8种血清型的细菌及 2 3种常见的口腔菌中进行PCR扩增 ,扩... 目的 :建立一种快速、特异、敏感的远缘链球菌PCR检测方法。方法 :根据已发表的远缘链球菌葡聚糖酶基因 (dexA)的特异片断设计一对寡核苷酸引物 ,对 12种变形链球菌群中包含a~h 8种血清型的细菌及 2 3种常见的口腔菌中进行PCR扩增 ,扩增产物电泳鉴定 ,并对特异片断进行回收 ,测序。结果 :变形链球菌群标准菌株中 ,只有远缘链球菌 (血清d、g型 )产生特异的扩增片断 ,测序结果与已发表的文献结果完全一致 ,且显示了极高的灵敏性 ,≥ 2× 10 2 个细胞均可以用该方法检出。结论 :PCR方法可以用于快速灵敏的检测远缘链球菌 。 展开更多
关键词 聚合反应 pcr 检测 远缘球菌 变形球菌 龋病
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聚合酶链式反应(PCR)在植物病害诊断检测上的应用 被引量:4
4
作者 徐平东 李梅 《福建省农科院学报》 1994年第1期51-56,共6页
聚合酶链式反应(PCR)用于体外扩增DNA具灵敏、特异、快速、简便等诸多优点,已经在分子生物学、微生物学、医学及遗传学等领域得到广泛应用,且在这些领域中显示出巨大的应用价值和广阔的发展前景。在植物病理学领域,PCR主... 聚合酶链式反应(PCR)用于体外扩增DNA具灵敏、特异、快速、简便等诸多优点,已经在分子生物学、微生物学、医学及遗传学等领域得到广泛应用,且在这些领域中显示出巨大的应用价值和广阔的发展前景。在植物病理学领域,PCR主要应用于植物病害的诊断检测,特别是对植物病毒及类似病毒病害的检测,其灵敏度可达pg/fg水平。此外,还用于植物病原真菌、细菌、线虫的分类鉴定以及植物病毒、类病毒核酸的克隆、测序等研究。同时讨论了PCR技术目前的限制和将来的应用潜力。 展开更多
关键词 植物 病害 诊断 检测 pcr 聚合反应
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聚合酶链式反应(PCR)中主要污染源及处理方法的分析 被引量:1
5
作者 唐艳荣 张海云 +4 位作者 曹院章 许东保 郭睿 张雪梅 王雅琴 《农业开发与装备》 2017年第3期99-100,共2页
对聚合酶链式反应(PCR)中主要污染源及处理方法逐一进行分析。
关键词 聚合反应(pcr) 污染源 处理方法
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实时定量聚合酶链反应的研究及应用(综述) 被引量:5
6
作者 林灼锋 李校坤 吴帆 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 2002年第5期116-122,共7页
 实时定量聚合酶链反应(real-timequantitativePCR,RQ-PCR)是综合PCR、分子杂交和酶动力学的一种新技术,它根据荧光共振能量转移(fluorescenceresonanceenergytranslation,FRET)的原理进行.目前已经成功地开发出TaqManTM、molecularbea...  实时定量聚合酶链反应(real-timequantitativePCR,RQ-PCR)是综合PCR、分子杂交和酶动力学的一种新技术,它根据荧光共振能量转移(fluorescenceresonanceenergytranslation,FRET)的原理进行.目前已经成功地开发出TaqManTM、molecularbeaconprobe、amplifluortechnologies、LightCycler和single-labeledprobe几种相关的技术,并广泛地应用于病毒学、遗传性疾病和肿瘤等方面的诊断检测.实验研究表明:RQ-PCR作为一种快速、准确的核酸检测方法,在临床及生物学研究方面均具有相当的实用价值. 展开更多
关键词 基因诊断 实时定量聚合反应 生物学 pcr 分子杂交 动力学 核酸检测
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聚合酶链反应技术及其应用 被引量:3
7
作者 王非 蒋建一 +5 位作者 华炯刚 母安雄 谷根林 王桂军 魏建忠 刘光清 《动物医学进展》 CSCD 2006年第6期103-107,共5页
聚合酶链反应(PCR)技术自1985年发明至今不断得到发展和完善,在常规PCR技术的基础上,结合免疫学、计算机技术、原位杂交等技术的利用和相关仪器的运用,衍生出了各种PCR方法和技术,如原位PCR、复合PCR、反向PCR、定量PCR、不对称PCR、电... 聚合酶链反应(PCR)技术自1985年发明至今不断得到发展和完善,在常规PCR技术的基础上,结合免疫学、计算机技术、原位杂交等技术的利用和相关仪器的运用,衍生出了各种PCR方法和技术,如原位PCR、复合PCR、反向PCR、定量PCR、不对称PCR、电子PCR及PCR芯片等。这些衍生出的PCR新类型和新方法有着独特的技术特点,解决了以往传统PCR的局限性。PCR技术作为一种革命性的新技术将不断推动分子生物学及相关学科的发展,并广泛应用于病原诊断、基因表达、遗传病检测等生命科学研究领域。 展开更多
关键词 聚合反应 研究进展 pcr 病原诊断 基因表达
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聚合酶链反应技术检测旋毛虫DNA的实验研究 被引量:9
8
作者 温艳 张月清 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2001年第1期61-62,共2页
目 的 建立敏感、特异、稳定的聚合酶链反应 (PCR)法 ,以检测旋毛虫病。方法 采用PCR法 ,选择与合成引物并确立最佳扩增条件 ,比较不同的提取DNA方法 ,检测血浆中旋毛虫幼虫。结果 经扩增于 5 0 0bp、6 70bp、12 0 0bp出现特异性片... 目 的 建立敏感、特异、稳定的聚合酶链反应 (PCR)法 ,以检测旋毛虫病。方法 采用PCR法 ,选择与合成引物并确立最佳扩增条件 ,比较不同的提取DNA方法 ,检测血浆中旋毛虫幼虫。结果 经扩增于 5 0 0bp、6 70bp、12 0 0bp出现特异性片段 ,与原选择的编码基因片段大小相同 ,此特异片段与溶组织内阿米巴、日本血吸虫DNA无交叉反应 ,不同的DNA提取法结果显示 :用裂解煮沸法同样可从仅含 1条旋毛虫幼虫的 2 5 μl正常小鼠血浆中扩增出特异性片段。 结论 PCR法检测旋毛虫敏感高、特异强 。 展开更多
关键词 旋毛虫 DNA 聚合反应 pcr
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聚合酶链反应技术对真菌性角膜炎快速诊断的实验研究及临床应用 被引量:8
9
作者 王香兰 阴宁 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2001年第2期107-110,共4页
目的探讨聚合酶链反应(PCR)技术与真菌性角膜炎快速诊断的可行性和优越性及其在临床应用中的价值。方法以一段真菌特异性通用引物并配合热启动聚合酶链反应技术来检测临床上常见的病原性真菌。结果8种真菌均扩增出了一条 310 ... 目的探讨聚合酶链反应(PCR)技术与真菌性角膜炎快速诊断的可行性和优越性及其在临床应用中的价值。方法以一段真菌特异性通用引物并配合热启动聚合酶链反应技术来检测临床上常见的病原性真菌。结果8种真菌均扩增出了一条 310 bp的阳性条带,而其它细菌、病毒和人体角膜组织均为阴性。在动物造型中,PCR技术的敏感性为86.7%,特异性为100%;真菌培养的敏感性为56.7%,特异性为72.7%。在对临床标本的研究中,PCR技术的敏感性为66.6%,真菌培养的敏感性为33.3%,角膜刮片的敏感性为40%。结论采用通用性特异引物并配合热启动PCR技术来检测实验室和临床标本中是否有真菌存在有重要的应用价值。 展开更多
关键词 聚合反应 真菌性角膜炎 诊断 pcr
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二甲亚砜在聚合酶链反应扩增载脂蛋白E基因中的作用 被引量:5
10
作者 何震宇 李月琴 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 2001年第1期104-107,共4页
目的 :探讨二甲亚砜 (DMSO)在聚合酶链反应 (PCR)中扩增人类载脂蛋白E基因中的作用 方法 :在不同质量分数DMSO的存在下 ,以PCR技术扩增人类载脂蛋白E基因片段 限制性内切酶酶切检测扩增产物 结果 :在质量分数 5%~ 10 %的DMSO下 ,可... 目的 :探讨二甲亚砜 (DMSO)在聚合酶链反应 (PCR)中扩增人类载脂蛋白E基因中的作用 方法 :在不同质量分数DMSO的存在下 ,以PCR技术扩增人类载脂蛋白E基因片段 限制性内切酶酶切检测扩增产物 结果 :在质量分数 5%~ 10 %的DMSO下 ,可以成功地扩增到人类载脂蛋白E基因的第 4外显子片段 结论 :在DMSO作用下 ,PCR扩增增强了特异性 展开更多
关键词 APOE基因 聚合反应 二甲亚砜 载脂蛋白E 基因多肽性 pcr扩增 检测
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聚合酶链反应在牙周可疑病原微生物检测中的应用 被引量:3
11
作者 钟晓波 黄定明 丁一 《国外医学(口腔医学分册)》 CAS 2003年第2期110-112,共3页
聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)已广泛应用于致病微生物的检测。本文对应用 PCR检测牙周可疑致病菌的种类以及PCR的特异性、敏感性、多重PCR、定量PCR在牙周病原微生物检测中的应用进行了综述。
关键词 聚合反应 病原微生物 牙周病 牙周致病菌 多重pcr 定量pcr
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聚合酶链反应法测定7种抗生素耐药基因 被引量:2
12
作者 熊咏民 代晓霞 +1 位作者 Johne Moore Cherie Millar 《西安医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期75-77,91,共4页
目的 建立快速检测非培养感染物中抗生素耐药基因表达的分子生物学方法 ,为临床的早期诊断和治疗及研究微生物学耐药机制提供一种理想的分子生物学技术。方法 应用聚合酶链反应测定 7种抗生素耐药基因 ,并通过优化测定体系中镁离子浓... 目的 建立快速检测非培养感染物中抗生素耐药基因表达的分子生物学方法 ,为临床的早期诊断和治疗及研究微生物学耐药机制提供一种理想的分子生物学技术。方法 应用聚合酶链反应测定 7种抗生素耐药基因 ,并通过优化测定体系中镁离子浓度、引物浓度及引物退火温度等 ,对PCR反应方法进行了质控。结果  7种抗生素耐药基因扩增条带清晰 ,无非特异性扩增条带 ,与所设计的扩增片段大小相符。结论 应用PCR检测微生物的耐药基因 ,灵敏度高 ,特异性强。可简便、快速地检测细菌、真菌、衣原体和支原体的耐药基因 ,尤其联合检验对临床早期诊断、治疗及鉴定耐药菌株及亚型具有一定价值。 展开更多
关键词 聚合反应 pcr 抗生素 微生物 耐药性 耐药基因
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聚合酶链反应及其在动物检疫中应用 被引量:3
13
作者 贺淹才 张敬标 《中国动物检疫》 CAS 1996年第2期35-36,46,共3页
聚合链反应(PCR)是1985年后才问世的一项新技术,由于其具有快速、灵敏、简便、特异等特点,现已发展成为广泛应用于分子生物学、基因工程、传染病学、遗传学、肿瘤学等很多领域的重要的研究手段和检测方法。本文对PCR技术操作原理与... 聚合链反应(PCR)是1985年后才问世的一项新技术,由于其具有快速、灵敏、简便、特异等特点,现已发展成为广泛应用于分子生物学、基因工程、传染病学、遗传学、肿瘤学等很多领域的重要的研究手段和检测方法。本文对PCR技术操作原理与PCR发展现状及其在动物检疫中的应用情况,作一简要介绍。 展开更多
关键词 聚合反应 动物检疫 应用 pcr
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间日疟原虫荧光定量聚合酶链反应检测方法的建立 被引量:1
14
作者 江晓玲 李明 +2 位作者 徐伟文 毕惠祥 程钢 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2002年第3期80-82,共3页
目的 建立间日疟原虫荧光定量聚合酶链式反应 (FQ -PCR)检测方法 ,为快速、准确定量检测间日疟原虫奠定基础。方法 根据间日疟原虫SSURNA基因序列 ,设计并合成引物和荧光标记探针 ,将PCR扩增的间日疟原虫SSURNA基因片段克隆入载体 ,... 目的 建立间日疟原虫荧光定量聚合酶链式反应 (FQ -PCR)检测方法 ,为快速、准确定量检测间日疟原虫奠定基础。方法 根据间日疟原虫SSURNA基因序列 ,设计并合成引物和荧光标记探针 ,将PCR扩增的间日疟原虫SSURNA基因片段克隆入载体 ,对重组质粒进行筛选、鉴定后 ,作为阳性模板 ,用于标准曲线的判定和样品检测。结果 应用重组质粒制作的定量曲线 ,循环阈值与模板浓度具有良好的线形关系 ,12 7份疟区血样和 30份正常血样的检测 ,显示此法有较高的灵敏度和特异度 ,定量检测结果与镜检感染率呈直线相关 ,相关系数为 0 95 9。 展开更多
关键词 荧光定量 pcr 间日疟原虫 小亚单位核糖体核糖核酸 聚合反应 疟疾
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实时荧光定量聚合酶链反应原理和在预防兽医学中的应用及研究进展 被引量:2
15
作者 曹军平 刘秀梵 《中国动物检疫》 CAS 北大核心 2008年第7期56-57,共2页
聚合酶链反应(PCR)是检测核酸的强力方法。由于PCR技术简便易行、灵敏度高等优点,该技术被广泛应用于基础研究.成为分子生物学必不可少的研究工具。由于传统的PCR技术存在不能准确定量.且操作过程中易污染而使得假阳性率高等缺点... 聚合酶链反应(PCR)是检测核酸的强力方法。由于PCR技术简便易行、灵敏度高等优点,该技术被广泛应用于基础研究.成为分子生物学必不可少的研究工具。由于传统的PCR技术存在不能准确定量.且操作过程中易污染而使得假阳性率高等缺点.使其应用受到局限。对PCR产物进行准确定量成为PCR技术发展的重要方向。 展开更多
关键词 聚合反应 预防兽医学 应用 反应原理 荧光定量 pcr技术 分子生物学
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聚合酶链反应检测乳酸菌酪氨酸脱羧酶基因 被引量:1
16
作者 李超 董明盛 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2004年第9期7-10,共4页
酪氨酸脱羧酶与乳酸菌发酵食品中酪胺的产生密切相关。根据从GenBank中检索到的酪氨酸脱羧酶基因序列设计一对特异性引物,采用PCR技术对乳酸菌的基因组DNA片段进行扩增,以此建立以酪氨酸脱羧酶基因为靶的产酪胺乳酸菌的分子生物学检测... 酪氨酸脱羧酶与乳酸菌发酵食品中酪胺的产生密切相关。根据从GenBank中检索到的酪氨酸脱羧酶基因序列设计一对特异性引物,采用PCR技术对乳酸菌的基因组DNA片段进行扩增,以此建立以酪氨酸脱羧酶基因为靶的产酪胺乳酸菌的分子生物学检测方法。结果表明,供试12株乳酸菌中有9株菌扩增出1133bpDNA片段。对其中3株菌的扩增产物进行DNA序列测定,测序结果采用国际互联网上NCBI的BLAST工具进行同源性检索分析,发现它与已知的Enterococcusfaecalis,Enterococcusfaecium,Carnobacteriumdivergens的酪氨酸脱羧酶基因序列均高度同源,其中PLP(5'-磷酸吡哆醛)的结合位点高度保守,证明该扩增产物是酪氨酸脱羧酶的基因片段。应用该法与常规平板检测法比较显示,二者检测结果基本一致,表明本研究建立的PCR方法可作为一种快速、高度特异的检测产酪胺乳酸菌菌株的新方法。 展开更多
关键词 聚合反应 乳酸菌酪 氨酸脱羧基因 分子生物学 检测方法 食品 pcr方法
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应用聚合酶链反应检测真菌性角膜炎 被引量:3
17
作者 吴建国 《实用医学杂志》 CAS 2005年第6期553-554,共2页
目的:探讨应用聚合酶链反应(PCR)快速检测临床疑似真菌性角膜炎(FK)的方法。方法:以源于医学机会性致病性真菌18srDNA保守区的一对寡核苷酸序列B2F(5'-ACTTTCGTAGGATAG-3')和B4R(5'-TGATCGTCTTCGATAAATA-3')为通用引物... 目的:探讨应用聚合酶链反应(PCR)快速检测临床疑似真菌性角膜炎(FK)的方法。方法:以源于医学机会性致病性真菌18srDNA保守区的一对寡核苷酸序列B2F(5'-ACTTTCGTAGGATAG-3')和B4R(5'-TGATCGTCTTCGATAAATA-3')为通用引物,对临床疑似FK的标本进行PCR,并与培养进行对比。结果:在687bp处出现DNA扩增带者为阳性。30份临床标本的真菌培养率为23.3%,而经扩增阳性率为50%。结论:真菌通用引物PCR反应检测真菌性角膜溃疡有较好的敏感性和特异性。 展开更多
关键词 真菌性角膜炎 临床标本 真菌培养 聚合反应检测 通用引物 致病性真菌 真菌性角膜溃疡 18srDNA pcr反应 DNA扩增
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聚合酶链反应(PCR)技术简介
18
作者 赵跃 《云南畜牧兽医》 1995年第2期41-41,共1页
聚合酶链反应(PCR)技术简介云南省畜牧兽医学校赵跃聚合酶链反应(PolymeraseChainreac-tion,PCR),又称“基因扩增”、DNA体外扩增技术。由美国学者卡里、马利斯(K.B.Mullis)首创(... 聚合酶链反应(PCR)技术简介云南省畜牧兽医学校赵跃聚合酶链反应(PolymeraseChainreac-tion,PCR),又称“基因扩增”、DNA体外扩增技术。由美国学者卡里、马利斯(K.B.Mullis)首创(1985),马利斯因此获1993年... 展开更多
关键词 聚合反应 pcr 兽医学 诊断
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聚合酶链反应产物的HPLC定量分析
19
作者 廖杰 赵玉兰 +3 位作者 董芳霆 杨军 郝秀华 吕朝晖 《分析测试学报》 CAS CSCD 1999年第2期47-49,共3页
建立了HPLC分析聚合酶链反应(PCR)产物的方法,探讨了梯度、流速、柱温等条件对相对分子质量参照物λ-DNA-HindⅢ分离的影响,NaCl以40~50mmol/min的梯度变化,流速为1mL/min时分离效果最佳... 建立了HPLC分析聚合酶链反应(PCR)产物的方法,探讨了梯度、流速、柱温等条件对相对分子质量参照物λ-DNA-HindⅢ分离的影响,NaCl以40~50mmol/min的梯度变化,流速为1mL/min时分离效果最佳。该法精密度和回收率高、线性良好,可用于PCR扩增条件优化时的相对定量分析。 展开更多
关键词 聚合反应 HPLC pcr DNA 扩增 产物
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聚合酶链反应(Ⅰ) 被引量:1
20
作者 楚雍烈 葛克亮 《西安医科大学学报》 CSCD 1993年第3期283-286,共4页
聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)是近年来发展起来的一项革命性技术,由于它能把痕迹量的遗传物质迅速而简便地扩增百万倍,使原来无法进行分析和检测的各种项目得以完成,所以PCR的问世为传统基因分析、基因诊断技术带来了... 聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)是近年来发展起来的一项革命性技术,由于它能把痕迹量的遗传物质迅速而简便地扩增百万倍,使原来无法进行分析和检测的各种项目得以完成,所以PCR的问世为传统基因分析、基因诊断技术带来了变革。现已公认,PCR是90年代最具发展前景的新技术之一。该技术已广泛应用于生物医学的各个领域,并取得了令人瞩目的成绩。 展开更多
关键词 聚合反应 pcr
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