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用反向亲和层析法纯化猪瘟病毒抗原
被引量：
2
1
作者
刘劲松
房德兴
+2 位作者
王元伦
顾志香
周宗安
《中国畜禽传染病》
CSCD
1992年第6期40-41,34,共3页
用兔抗牛睾丸细胞培养物的IgG琼脂糖4B偶联制备亲和层析柱,以反向亲和层析法纯化SFV—C抗原,即通过亲和层析免疫吸附除去PEG沉淀法部分纯化抗原中的残留牛睾丸细胞培养物成分。结果表明.通过3次反向亲和层析柱的纯化抗原.其总蛋白去除率...
用兔抗牛睾丸细胞培养物的IgG琼脂糖4B偶联制备亲和层析柱,以反向亲和层析法纯化SFV—C抗原,即通过亲和层析免疫吸附除去PEG沉淀法部分纯化抗原中的残留牛睾丸细胞培养物成分。结果表明.通过3次反向亲和层析柱的纯化抗原.其总蛋白去除率达76.9％;应用纯化前后抗原检测猪瘟免疫血清.纯化抗原可以除去猪瘟免疫血清中的非相关抗体反应,确保猪瘟免疫抗体检测的特异性.
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关键词
猪
猪瘟
病毒
抗原
反向亲和层析
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职称材料
妊娠相关蛋白A的纯化及鉴定研究
被引量：
2
2
作者
曾昭伟
杨静
+2 位作者
王学谦
李会强
李向东
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第8期835-838,共4页
目的:对比G200凝胶过滤、反向亲和层析、DEAE离子交换等不同的方法纯化孕妇血清中的妊娠相关蛋白A(PAPP-A),为下一步的临床应用研究奠定基础。方法:把正常男性血清过G200凝胶过滤纯化后免疫家兔得到兔抗人抗体,连接溴化氰活化G25凝胶制...
目的:对比G200凝胶过滤、反向亲和层析、DEAE离子交换等不同的方法纯化孕妇血清中的妊娠相关蛋白A(PAPP-A),为下一步的临床应用研究奠定基础。方法:把正常男性血清过G200凝胶过滤纯化后免疫家兔得到兔抗人抗体,连接溴化氰活化G25凝胶制备反向免疫层析柱。收集足月孕妇血清,离心后依次应用G200凝胶过滤、反向亲和层析及离子交换层析柱纯化。用ELISA检测试剂盒检测各个洗脱峰的PAPP-A活性,SDS-PAGE检测纯化蛋白的纯度。结果:稀释兔抗人血清抗体至浓度为1∶16,双向扩散有明显沉淀线,可以用于制备抗体,蛋白A亲和层析洗脱pH3.0洗脱峰,G200凝胶过滤第一个洗脱峰,反向亲和层析的0.1 mol/LPBS洗脱峰,离子交换层析的0.45 mol/L NaCl洗脱峰中PAPP-A活性均较高。SDS-PAGE结果显示,孕妇血清用G200凝胶过滤处理后杂蛋白条带较多,反向亲和层析或者DEAE分别处理后同样存在杂蛋白条带,三种纯化方法结合应用杂蛋白条带明显减少,Western blot鉴定显示三种方法结合应用后纯化蛋白样品条带单一。结论:本研究用三种层析方式相结合的方法得到纯度较高的PAPP-A抗原,鉴定显示可以到达制备单克隆抗体(mAb)的要求,为mAb的制备以及酶联免疫试剂盒的建立奠定了基础,使PAPP-A在临床应用方面前景广阔。
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关键词
妊娠相关蛋白A
分子筛
反向亲和层析
离子交换
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职称材料
题名
用反向亲和层析法纯化猪瘟病毒抗原
被引量：
2
1
作者
刘劲松
房德兴
王元伦
顾志香
周宗安
机构
南京军区军事医学研究所
出处
《中国畜禽传染病》
CSCD
1992年第6期40-41,34,共3页
文摘
用兔抗牛睾丸细胞培养物的IgG琼脂糖4B偶联制备亲和层析柱,以反向亲和层析法纯化SFV—C抗原,即通过亲和层析免疫吸附除去PEG沉淀法部分纯化抗原中的残留牛睾丸细胞培养物成分。结果表明.通过3次反向亲和层析柱的纯化抗原.其总蛋白去除率达76.9％;应用纯化前后抗原检测猪瘟免疫血清.纯化抗原可以除去猪瘟免疫血清中的非相关抗体反应,确保猪瘟免疫抗体检测的特异性.
关键词
猪
猪瘟
病毒
抗原
反向亲和层析
分类号
S858.285.3 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
妊娠相关蛋白A的纯化及鉴定研究
被引量：
2
2
作者
曾昭伟
杨静
王学谦
李会强
李向东
机构
天津医科大学
天津渤海职业技术学院生物工程系
天津市天津医院检验科
津医科大学检验学院免疫学教研室
天津市王顶堤医院检验科
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第8期835-838,共4页
基金
天津市科技计划项目(08ZCGYSF01800)
文摘
目的:对比G200凝胶过滤、反向亲和层析、DEAE离子交换等不同的方法纯化孕妇血清中的妊娠相关蛋白A(PAPP-A),为下一步的临床应用研究奠定基础。方法:把正常男性血清过G200凝胶过滤纯化后免疫家兔得到兔抗人抗体,连接溴化氰活化G25凝胶制备反向免疫层析柱。收集足月孕妇血清,离心后依次应用G200凝胶过滤、反向亲和层析及离子交换层析柱纯化。用ELISA检测试剂盒检测各个洗脱峰的PAPP-A活性,SDS-PAGE检测纯化蛋白的纯度。结果:稀释兔抗人血清抗体至浓度为1∶16,双向扩散有明显沉淀线,可以用于制备抗体,蛋白A亲和层析洗脱pH3.0洗脱峰,G200凝胶过滤第一个洗脱峰,反向亲和层析的0.1 mol/LPBS洗脱峰,离子交换层析的0.45 mol/L NaCl洗脱峰中PAPP-A活性均较高。SDS-PAGE结果显示,孕妇血清用G200凝胶过滤处理后杂蛋白条带较多,反向亲和层析或者DEAE分别处理后同样存在杂蛋白条带,三种纯化方法结合应用杂蛋白条带明显减少,Western blot鉴定显示三种方法结合应用后纯化蛋白样品条带单一。结论:本研究用三种层析方式相结合的方法得到纯度较高的PAPP-A抗原,鉴定显示可以到达制备单克隆抗体(mAb)的要求,为mAb的制备以及酶联免疫试剂盒的建立奠定了基础,使PAPP-A在临床应用方面前景广阔。
关键词
妊娠相关蛋白A
分子筛
反向亲和层析
离子交换
Keywords
pregnancy associated plasma protein A
molecular sieve
reverse affinity chromatography
ion exchange
分类号
R392.33 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
用反向亲和层析法纯化猪瘟病毒抗原
刘劲松
房德兴
王元伦
顾志香
周宗安
《中国畜禽传染病》
CSCD
1992
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
妊娠相关蛋白A的纯化及鉴定研究
曾昭伟
杨静
王学谦
李会强
李向东
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2011
2
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