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反义IGF-Ⅰ寡核苷酸转染对人肝癌细胞增生及凋亡的影响 被引量:2
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作者 乔世峰 孙家邦 +1 位作者 朱斌 王季堃 《首都医科大学学报》 CAS 2004年第1期67-70,共4页
为研究胰岛素样生长因子 I(IGF I)反义寡核苷酸转染对人肝癌细胞增生、分化及凋亡的影响 ,探讨寡核苷酸转染治疗肝癌的可行性 ,利用反义核酸技术 ,合成针对IGF I的寡核苷酸片段 ,利用脂质体包裹反义IGF I寡核苷酸片段瞬时转染人肝癌细... 为研究胰岛素样生长因子 I(IGF I)反义寡核苷酸转染对人肝癌细胞增生、分化及凋亡的影响 ,探讨寡核苷酸转染治疗肝癌的可行性 ,利用反义核酸技术 ,合成针对IGF I的寡核苷酸片段 ,利用脂质体包裹反义IGF I寡核苷酸片段瞬时转染人肝癌细胞系BEL 74 0 2细胞 ,MTT法检测细胞增生 ;放免法检测培养细胞上清中AFP、CEA的分泌量 ;采用末端标记 (Tunel)法检测细胞凋亡的变化。结果发现转染反义IGF I寡核苷酸可使人肝癌细胞系BEL 74 0 2细胞增生下降 ,AFP、CEA表达降低 ,凋亡细胞数量增多。反义IGF I寡核苷酸转染人肝癌细胞系BEL 74 0 2细胞可以降低细胞增生。 展开更多
关键词 反义igf-ⅰ寡核苷酸 转染 肝癌细胞增生 凋亡
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人工反义寡核苷酸对人Ⅰ型胶原基因体外转录体系的抑制作用
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作者 单越新 罗超权 +1 位作者 徐钤 利天增 《第一军医大学学报》 CSCD 1999年第5期426-428,共3页
目的和方法过量Ⅰ、Ⅲ型胶原的沉积是增生性瘢痕组织和瘢痕疙瘩形成的重要原因。采用两个自行构建的SP6体外转录系统,通过掺入同位素(a32PGTP)进行放射自显影,探讨不同反义寡核苷酸对Ⅰ型胶原基因体外转录的抑制作用。结... 目的和方法过量Ⅰ、Ⅲ型胶原的沉积是增生性瘢痕组织和瘢痕疙瘩形成的重要原因。采用两个自行构建的SP6体外转录系统,通过掺入同位素(a32PGTP)进行放射自显影,探讨不同反义寡核苷酸对Ⅰ型胶原基因体外转录的抑制作用。结果和结论位于SP6转录起始位点区域的寡核苷酸能够有效抑制体外转录反应;而位于SP6转录起始位点下游约200bp的寡核苷酸和作为对照的随机寡核苷酸对转录的抑制作用不明显。 展开更多
关键词 型胶原基因 反义寡核苷酸 体外转录 瘢痕
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反义寡核苷酸联用对肺腺癌A549细胞增殖的抑制作用 被引量:1
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作者 杨英 李伍举 +1 位作者 丁雨 王升启 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第8期694-696,共3页
目的 研究多基因靶向的反义寡核苷酸联用对肺腺癌细胞A5 4 9增殖的抑制作用 ,建立初步筛选、分析组合靶点的实验方法及统计学方法。方法 选择以端粒酶、PKC α、Bcl 2和IGF 1R为靶点的 4种反义寡核苷酸 ,进行两药组合。以脂质体介导... 目的 研究多基因靶向的反义寡核苷酸联用对肺腺癌细胞A5 4 9增殖的抑制作用 ,建立初步筛选、分析组合靶点的实验方法及统计学方法。方法 选择以端粒酶、PKC α、Bcl 2和IGF 1R为靶点的 4种反义寡核苷酸 ,进行两药组合。以脂质体介导进行反义寡核苷酸转染 ,用MTT法染色并计算细胞生长抑制率 ,用SAS统计软件及金正均Q值法进行数据分析。结果 联合用药对A5 4 9细胞增殖的抑制作用显著高于单药 (P <0 0 5 ) ,并筛选出有协同作用的药物组合 (Q≥ 1 15 )。结论 反义寡核苷酸联合用药可以靶向多个与肿瘤发生发展密切相关的基因 ,提高对肿瘤细胞增殖的抑制效果。 展开更多
关键词 反义寡核苷酸 端粒酶 PKG-α Bcl-2 igf-1R 联合用药 A549
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反义IGF-Ⅰ R基因片段诱导胶质瘤细胞凋亡的流式细胞仪分析和电镜观察 被引量:1
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作者 牛朝诗 傅先明 汪业汉 《现代神经疾病杂志》 2003年第1期26-29,共4页
目的探讨反义胰岛素样生长因子-Ⅰ受体(IGF-ⅠR)基因片段诱导胶质瘤细胞凋亡的作用及其形态学的变化。方法根据IGF-ⅠRcDNA序列设计其正义、反义基因片段,并对部分碱基进行硫代磷酸修饰。实验分为空白对照组、正义寡核苷酸组和反义寡核... 目的探讨反义胰岛素样生长因子-Ⅰ受体(IGF-ⅠR)基因片段诱导胶质瘤细胞凋亡的作用及其形态学的变化。方法根据IGF-ⅠRcDNA序列设计其正义、反义基因片段,并对部分碱基进行硫代磷酸修饰。实验分为空白对照组、正义寡核苷酸组和反义寡核苷酸组,应用流式细胞仪检测DNA含量,根据DNA直方图分析凋亡细胞发生率。应用透射电镜观察凋亡细胞的形态学变化。结果经反义寡核苷酸5μmol/L、10μmol/L、15μmol/L、20μmol/L等4种浓度处理的胶质瘤细胞的凋亡率分别为(16.06±3.86)%、(24.52±4.84)%、(36.69±5.53)%和(43.85±5.72)%;而经同样浓度正义寡核苷酸处理的胶质瘤细胞的凋亡率分别为(3.76±1.22)%、(3.14±1.15)%、(2.51±0.93)%和(3.26±1.15)%;空白对照组(野生型)的自然凋亡率为(1.01±0.89)%。反义寡核苷酸组与空白对照组相比差异有显著性意义(P<0.05),而正义寡核苷酸组与空白对照组之间差异则无显著性意义(P>0.05)。透射电镜观察显示,凋亡细胞表现为细胞体积缩小,染色质凝聚,并聚集于核膜下呈新月状或块状,胞膜内陷形成膜包裹的核碎片或细胞器,最后出泡形成凋亡小体。结论反义IGF-ⅠR基因片段可诱导胶质瘤细胞发生凋亡。 展开更多
关键词 癌基因 反义寡核苷酸 神经胶质瘤 脱噬作用 胰岛素样生长因子-受体 流式细胞术
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IGF-ⅠR、IGF-ⅡR反义基因对SMMC-7721肝癌细胞生物学行为的影响
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作者 刘志鹏 杨建民 +1 位作者 陈文生 罗元辉 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第9期1061-1064,共4页
目的 研究胰岛素样生长因子Ⅰ型及Ⅱ型受体 (IGF ⅠR、IGF ⅡR)反义基因对SMMC 772 1肝癌细胞生物学行为的影响。方法 应用反义技术 ,在已转染了IGF ⅠR反义基因的肝癌SMMC 772 1 (772 1 IGF ⅠR AS)细胞基础上 ,继续利用IGF ⅡR反... 目的 研究胰岛素样生长因子Ⅰ型及Ⅱ型受体 (IGF ⅠR、IGF ⅡR)反义基因对SMMC 772 1肝癌细胞生物学行为的影响。方法 应用反义技术 ,在已转染了IGF ⅠR反义基因的肝癌SMMC 772 1 (772 1 IGF ⅠR AS)细胞基础上 ,继续利用IGF ⅡR反义基因真核表达系统 ,通过DOTAP脂质体介导的转染技术 ,将IGF ⅡR反义基因导入该细胞 ,经G41 8及潮霉素双重筛选获得稳定表达IGF ⅠR、IGF ⅡR反义基因的 772 1 IGF R AS细胞。采用光镜、电镜观察形态学变化 ,双层软琼脂克隆形成实验、MTT细胞生长曲线实验及裸鼠皮下接种实验观察转染后细胞体外生长情况。结果  772 1 IGF R AS细胞在光镜、电镜下的肿瘤细胞形态恶性程度减低 ;在软琼脂培养基中的生长能力降低 (P <0 .0 1 ) ;在裸鼠体内的致瘤能力也降低 (P <0 .0 5) ;但细胞生长曲线与对照组比较则无明显差异。结论 IGF ⅠR、IGF ⅡR反义基因对SMMC 772 1肝癌细胞株的恶性行为有明显抑制作用。利用反义技术干预肝癌细胞生长因子受体基因表达可能给肝癌的基因治疗提供新的途径。 展开更多
关键词 igf-R igf-ⅡR 反义基因 肝癌 基因治疗
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STAT1 ASON对肺纤维化大鼠BALF细胞因子和肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达的影响 被引量:5
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作者 王文军 曾鸣 +3 位作者 刘丹 范贤明 朱晨 湛晓勤 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期389-392,共4页
目的:观察信号转导子与转录活化子1(STAT1)反义寡核苷酸(ASON)雾化吸入对博莱霉素(BLM)致肺纤维化大鼠肺泡灌洗液(BALF)PDGF-BB(血小板衍生生长因子-BB)、TNF-α(肿瘤坏死因子-α)、TGF-β1(转化生长因子-β1)、IFN-γ(干扰素-γ)表达... 目的:观察信号转导子与转录活化子1(STAT1)反义寡核苷酸(ASON)雾化吸入对博莱霉素(BLM)致肺纤维化大鼠肺泡灌洗液(BALF)PDGF-BB(血小板衍生生长因子-BB)、TNF-α(肿瘤坏死因子-α)、TGF-β1(转化生长因子-β1)、IFN-γ(干扰素-γ)表达及肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达的影响。方法:取45只健康雌性Wistar大鼠随机分成ASON组、BLM组和生理盐水(NS)组各15只,气管内分别灌注BLM(ASON组、BLM组)和NS(NS组)复制肺纤维化模型和空白对照,ASON组于第0、2、4、6天雾化吸入STAT1ASON,BLM组和NS组雾化吸入NS,各组分别于第7、14、28天均处死动物5只。观察肺泡炎和肺纤维化改变;收集BALF测定PDGF-BB、TNF-α、IFN-γ、TGF-β1的水平;测定肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达。结果:ASON组第7、14、28天肺泡炎和肺纤维化程度明显低于同时间点BLM组(P<0.05)。BLM组各时间点BALF中PDGF-BB、TNF-α、TGF-β1表达水平较NS组升高(P<0.05),ASON组较BLM组各时间点均降低(P<0.05);BLM组BALF中IFN-γ表达水平各时间点均低于NS组(P<0.05),但ASON组各时间点均较BLM组高(P<0.05)。ASON组和BLM组第7、14、28天Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达高于NS组(P<0.05);ASON组第7、14、28天Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA的表达均较同时间点BLM组降低(P<0.05)。结论:STAT1ASON雾化吸入能够减轻BLM诱导的肺泡炎和肺纤维化程度,其机制可能与抑制BALF中TGF-β1、PDGF-BB、TNF-α的表达,抑制IFN-γ下降而减少肺组织胶原的沉积有关。 展开更多
关键词 TAT1 反义寡核苷酸 肺纤维化 细胞因子 、Ⅲ型胶原mRNA
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