题名 hTR基因反义表达质粒构建及序列分析
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作者
安利佳 金礼吉
机构
大连理工大学化工学院
出处
《大连理工大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2000年第A01期29-33,共5页
文摘
从人的脐带血管内皮细胞中提取基因组 DNA,通过 PCR方法扩增得到了人端粒酶RNA成分 ( human telomere RNA,h TR)的基因片段 ,扩增产物经酶切克隆到逆转录病毒载体p LNCX上 ,构建了 h TR基因的反义表达质粒 .序列分析结果表明 ,PCR扩增得到的 h TR基因的 DNA序列与所发表的序列完全一致 .构建的反义表达载体中的目的基因正确地反向插入到逆转录病毒载体 p LNCX的克隆位点上 ,构成了 h
关键词
脐带 端粒酶 HTR基因 pLNCX载体 反义表达质粒 序列分析 肿瘤基因治疗
Keywords
umbilical cord/telomerase hTR gene pLNCX vector,
分类号
Q782
[生物学—分子生物学]
R730.54
[医药卫生—肿瘤]
题名 MMP-9反义RNA真核表达载体的构建及鉴定
被引量：1
2
作者
唐琳 陈奎生 张岚 张云汉 高冬玲
机构
河南省肿瘤病理重点实验室 郑州大学第一附属医院
出处
《山东医药》
CAS
北大核心
2005年第16期13-14,共2页
基金
国家"十五""211"工程重点学科建设项目[教重办(2002)第2号] 河南省医学科技创新人才工程资助项目(No.2003112007)
文摘
目的构建MMP-9反义RNA真核表达载体。方法提取胃癌组织总RNA,按照GenBank中检索的MMP-9基因cDNA序列,设计并合成反义MMP-9基因片段引物,进行逆转录聚合酶链反应(RT-PCR),先将扩增产物克隆至pGEM-T载体,再将其反向亚克隆到真核表达质粒pcDNA3.1中,然后对阳性克隆进行酶切鉴定和测序分析。结果PCR扩增出的反义片段与预期长度相符。构建的MMP-9反义RNA表达质粒pcDNA3.1-MMP-9分别作PCR及双酶切(BamH和Hind)鉴定,证实其中有目的片段完整插入,插入片段测序结果与反义MMP-9序列设计完全一致。结论成功构建了MMP-9反义RNA真核表达载体pcDNA3.1-MMP-9,为进一步研究MMP-9蛋白分子的生物学功能和以MMP-9为靶点的恶性肿瘤的基因治疗研究奠定了基础。
关键词
真核表达 载体 逆转录聚合酶链反应 反义 RNA表达 质粒 PCDNA3.1 MMP-9基因 CDNA序列 真核表达 质粒 PCR扩增 BamHⅠ 生物学功能 总RNA 胃癌组织 扩增产物 基因片段 测序分析 酶切鉴定 阳性克隆 序列设计 插入片段 基因治疗
Keywords
MMP-9 Expression vector Antisense Gene clone
分类号
R512.62
[医药卫生—内科学]
R735.7
[医药卫生—肿瘤]
