反义线粒体非编码RNA-2在高糖环境下的肾小球系膜细胞中的表达及作用机制 被引量：1

1

作者 马红霞 殷万元 王玭 《海南医学院学报》 CAS 2018年第14期1307-1310,共4页

目的:观察长链非编码RNA反义线粒体非编码RNA-2(ASncmtRNA-2)在高糖环境下肾小球系膜细胞中的表达,探讨ASncmtRNA-2在氧化应激介导的糖尿病肾病纤维化中的作用。方法:采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测各组细胞ASncmtRNA-2、... 目的:观察长链非编码RNA反义线粒体非编码RNA-2(ASncmtRNA-2)在高糖环境下肾小球系膜细胞中的表达,探讨ASncmtRNA-2在氧化应激介导的糖尿病肾病纤维化中的作用。方法:采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测各组细胞ASncmtRNA-2、TGF-β1和FN mRNA表达。DCFH-DA法测定细胞内活性氧(ROS)相对水平。结果:与0h组比较,8h组ASncmtRNA-2mRNA的相对表达量无明显变化,但是从16h起,高糖组与高糖+L-NAME组ASncmtRNA-2 mRNA相对表达量显著高于低糖组(P均<0.05),高糖+L-NAME组ASncmtRNA-2mRNA相对表达量显著低于高糖组(P均<0.05)。高糖组细胞内ROS相对水平显著高于低糖组(P<0.05),高糖+LNAME组细胞内ROS相对水平显著低于高糖组(P<0.05)。高糖组细胞ASncmtRNA-2、TGF-β1和FN mRNA相对表达量显著高于低糖组(P均<0.05),高糖+L-NAME组ASncmtRNA-2、TGF-β1和FN mRNA相对表达量显著低于高糖组(P均<0.05)。高糖+ASncmtRNA-2siRNA组细胞ASncmtRNA-2、TGF-β1和FN mRNA相对表达量显著低于高糖组(P<0.05)。结论:ASncmtRNA-2在高糖环境下的肾小球系膜细胞中高表达,并且可能通过正调节促纤维化因子的表达来促进糖尿病肾病中的肾小球纤维化,这就为糖尿病肾病治疗提供新的靶点。 展开更多

关键词 长链非编码RNA 反义线粒体非编码rna-2 肾小球系膜细胞 糖尿病肾病

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干扰长链非编码RNA CCAT2对膀胱癌细胞J82线粒体功能和肿瘤干细胞样特性的影响 被引量：7

2

作者 白晓静 蒋玉梅 +1 位作者 张静 范晋海 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2021年第2期221-226,共6页

目的探讨干扰长链非编码RNA CCAT2(lncRNA CCAT2)对膀胱癌细胞J82线粒体功能、肿瘤干细胞样特性的影响。方法通过构建lncRNA CCAT2短发卡RNA(shRNA)干扰CCAT2表达,RT-PCR验证并选择其中CCAT2表达量最低的J82细胞系用于后续实验。克隆形... 目的探讨干扰长链非编码RNA CCAT2(lncRNA CCAT2)对膀胱癌细胞J82线粒体功能、肿瘤干细胞样特性的影响。方法通过构建lncRNA CCAT2短发卡RNA(shRNA)干扰CCAT2表达,RT-PCR验证并选择其中CCAT2表达量最低的J82细胞系用于后续实验。克隆形成检测细胞增殖、流式细胞仪检测线粒体膜电位变化情况,Western blot检测细胞凋亡相关蛋白水平,显微下观察肿瘤细胞成球情况,流式细胞仪检测各组细胞CD133的表达,Western blot检测OCT4、SOX2、CD44水平。结果三种CCAT2-shRNA J82细胞系中的CCAT2表达量均低于shRNA-NC(P<0.05);CCAT2-shRNA组克隆形成率、c-Myc水平、肿瘤成球直径及成球率、CD133阳性细胞数、OCT4、SOX2、CD44水平低于shRNA-NC组(P<0.05),绿色荧光强度、Bax/Bcl-2、Caspase-3、Caspase-9水平均高于shRNA-NC组(P<0.05)。结论下调lncRNA CCAT2表达量可以抑制J82细胞生长,可能与影响细胞线粒体功能以及肿瘤干细胞样特性有关。 展开更多

关键词 膀胱瘤 长链非编码RNA CCAT2 线粒体功能 肿瘤干细胞

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长链非编码RNA ITGB2-AS1过表达预测急性髓系白血病的不良预后 被引量：2

3

作者 周颖莉 徐子俊 +5 位作者 周静东 张婷娟 姚冬明 马吉春 林江 钱军 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期1436-1449,共14页

目的:确定ITGB2-AS1在AML患者中的表达水平,并进一步探讨其临床意义。方法:本研究在公共数据集(包括TCGA和GSE63270)中分析ITGB2-AS1表达水平,并使用实时定量PCR(RT-q PCR)在10^(9)名AML患者队列中进一步验证。结果:ITGB2-AS1表达水平... 目的:确定ITGB2-AS1在AML患者中的表达水平,并进一步探讨其临床意义。方法:本研究在公共数据集(包括TCGA和GSE63270)中分析ITGB2-AS1表达水平,并使用实时定量PCR(RT-q PCR)在10^(9)名AML患者队列中进一步验证。结果:ITGB2-AS1表达水平在两个独立队列中上调(TCGA,P<0.05;GSE63270,P<0.05),并经本研究纳入的AML患者队列证实(P<0.05)。临床上,ITGB2-AS1高表达与较大的年龄(P=0.023)和较低的完全缓解(CR)率(P=0.005)相关。多变量分析发现,高ITGB2-AS1表达是CR率(P=0.027)和总体生存时间(OS)(P=0.011)的独立预后因素,ITGB2-AS1在TCGA数据集(r=0.74,P <0.001)和本研究患者数据中(r=0.881,P <0.001)均与ITGB2表达正相关。高ITGB2表达也与较大年龄(P=0.02)和较低CR率(P=0.020)相关。高ITGB2表达预测更短的OS(P=0.028)。结论:ITGB2-AS1在AML中过表达并预测AML的不良预后。 展开更多

关键词 长链非编码RNA 整合素β2反义基因 整合素β2基因 急性髓性白血病 预后

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干扰长链非编码RNA AFAP1-AS1抑制人鼻咽癌HNE2细胞增殖、侵袭及体内移植瘤形成的研究 被引量：3

4

作者 谢天飞 王凌云 +1 位作者 刘丽 桑建中 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第22期2742-2746,2752,共6页

目的:探讨短发卡RNA(shRNA)干扰长链非编码RNA肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA1(lncRNA AFAP1-AS1)对人鼻咽癌(NPC)细胞增殖、侵袭及体内移植瘤形成的影响。方法:将HNE2细胞培养制成细胞悬液后分为空白对照组(Control)、阴性对照组(shRNA... 目的:探讨短发卡RNA(shRNA)干扰长链非编码RNA肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA1(lncRNA AFAP1-AS1)对人鼻咽癌(NPC)细胞增殖、侵袭及体内移植瘤形成的影响。方法:将HNE2细胞培养制成细胞悬液后分为空白对照组(Control)、阴性对照组(shRNA-NC)与lncRNA AFAP1-AS1干扰组(sh-AFAP1-AS1),通过试剂盒转入对应目的片段,进行RT-PCR验证;结晶紫染色法检测细胞增殖,FCM检测细胞凋亡,Transwell检测细胞侵袭能力,Western blot检测细胞中血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白表达水平,免疫组织化学法检测VEGF表达TUNEL检测肿瘤组凋亡,将转染sh-AFAP1-AS1成功的HNE2细胞及其阴性对照细胞悬浮液分别于右腋下静脉注入裸鼠体内,以成瘤直径超过5 mm为抑制成功。2周后比较2组裸鼠肿瘤重量、AFAP1-AS1表达量、肿瘤组织细胞凋亡、VEGF表达变化。结果:sh-AFAP1-AS1细胞AFAP1-AS1表达水平和细胞增殖率低于Control组(P<0.05);sh-AFAP1-AS1细胞凋亡率高于Control组(P<0.05);sh-AFAP1-AS1细胞的侵袭率低于Control组(P<0.05),sh-AFAP1-AS1细胞中VEGF和MMP-9蛋白表达水平较Control组显著降低(P<0.05);sh-AFAP1-AS1组裸鼠肿瘤质量、AFAP1-AS1表达量均较Control组降低(P<0.05);sh-AFAP1-AS1组裸鼠肿瘤组织的细胞凋亡率高于Control组(P<0.05),肿瘤组织中VEGF表达量低于Control组(P<0.05)。结论:AFAP1-AS1可能通过调控癌细胞增殖、转移及侵袭相关蛋白表达参与NPC HNE2细胞的增殖、侵袭及转移过程。 展开更多

关键词 鼻咽癌 HNE2细胞 长链非编码RNA 肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA1

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CASC2/miR-18a/BTG3信号抑制非小细胞肺癌迁移和侵袭 被引量：3

5

作者 陈兴峰 王应琼 +4 位作者 陈亚红 王茂泽 陈山 许铁峰 石慧芳 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期1537-1544,共8页

目的:研究长链非编码RNA CASC2在非小细胞肺癌(NSCLC)细胞迁移和侵袭中的作用及调控机制。方法: RT-qPCR和Western blot法检测正常人支气管上皮细胞系16-HBE及NSCLC细胞系A549和H1299中CASC2、微小RNA-18a (miR-18a)和BTG3的表达;生物... 目的:研究长链非编码RNA CASC2在非小细胞肺癌(NSCLC)细胞迁移和侵袭中的作用及调控机制。方法: RT-qPCR和Western blot法检测正常人支气管上皮细胞系16-HBE及NSCLC细胞系A549和H1299中CASC2、微小RNA-18a (miR-18a)和BTG3的表达;生物信息学预测CASC2和miR-18a及miR-18a和BTG3的靶向关系,并利用双萤光素酶报告基因实验加以验证;Transwell小室法检测NSCLC细胞的迁移和侵袭能力;RT-qPCR和Western blot测定CASC2对miR-18a和BTG3表达的调控。结果:与16-HBE细胞相比,CASC2和BTG3在NSCLC细胞系中表达量明显下调,而miR-18a出现明显的高表达( P<0.05 );CASC2能够靶向吸附miR-18a,且 BTG3 被证实是miR-18a的一个靶基因;CASC2过表达抑制NSCLC细胞的迁移和侵袭能力,但外源回补miR-18a可促进细胞的迁移和侵袭;外源回补miR-181a可逆转CASC2对BTG3蛋白表达的促进作用。结论: CASC2通过负调控miR-18a促进BTG3表达,进而抑制NSCLC细胞的迁移和侵袭。 展开更多

关键词 非小细胞肺癌 长链非编码RNA CASC2 微小rna-18a BTG3蛋白 细胞迁移 细胞侵袭

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KMT2A通过lncRNA-HOTAIR激活Akt/mTOR信号通路影响AML细胞的生物学行为 被引量：2

6

作者 黄耘 张爱丽 +3 位作者 苏蕊 张莉娟 邹榕 王思力 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期732-736,共5页

目的:探讨急性髓系白血病细胞中赖氨酸甲基转移酶2A(KMT2A)的表达及其影响急性髓系白血病细胞增殖的分子机制。方法:免疫共沉淀实验检测KMT2A和长链非编码RNA-HOX转录反义RNA(lncRNA-HOTAIR)之间的结合,5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷(EdU... 目的:探讨急性髓系白血病细胞中赖氨酸甲基转移酶2A(KMT2A)的表达及其影响急性髓系白血病细胞增殖的分子机制。方法:免疫共沉淀实验检测KMT2A和长链非编码RNA-HOX转录反义RNA(lncRNA-HOTAIR)之间的结合,5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷(EdU)实验检测急性髓系白血病细胞增殖。结果:KMT2A组PCR扩增信号明显强于阴性对照组和IgG组(P<0.01)。与阴性对照组和KMT2A过表达并敲低lncRNA-HOTAIR表达组相比,KMT2A过表达组以及lncRNA-HOTAIR过表达组EdU+细胞比例均明显升高(P<0.01)。与阴性对照组相比,KMT2A沉默组以及lncRNA-HOTAIR沉默组EdU+细胞比例均明显下降(P<0.01),KMT2A过表达组以及lncRNA-HOTAIR过表达组p-Akt和p-mTOR表达水平明显升高(P<0.01)。结论:KMT2A能够与lncRNA-HOTAIR相互结合,促进Akt/mTOR信号通路的活化,进而促进急性髓系白血病细胞增殖。 展开更多

关键词 急性髓系白血病 赖氨酸甲基转移酶2A 长链非编码rna-HOX转录反义RNA 增殖 Akt/mTOR信号通路

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肝癌相关基因MEF2D反义RNA的鉴定及分析

7

作者 李华玲 吕贝 +4 位作者 袁君婷 韩笑 朱敏 郑丹阳 崔恒宓 《安徽大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2017年第6期102-108,共7页

鉴定和分析肝癌细胞中新的天然反义RNA MEF2D-AS根据已建立的双链RNA文库筛选与肝癌相关的反义RNA.通过RT-qPCR验证其反义RNA的存在,采用cDNA末端快速扩增技术获得其全长序列,并检测HepG2细胞经5-Aza-dC处理前后MEF2D基因正反义链表达... 鉴定和分析肝癌细胞中新的天然反义RNA MEF2D-AS根据已建立的双链RNA文库筛选与肝癌相关的反义RNA.通过RT-qPCR验证其反义RNA的存在,采用cDNA末端快速扩增技术获得其全长序列,并检测HepG2细胞经5-Aza-dC处理前后MEF2D基因正反义链表达量的变化.结果显示,成功鉴定出1条全长为1 265bp的新的天然反义RNA,并预测其属于长链非编码RNA(long non-coding RNA,简称为lncRNA),命名为MEF2D-AS.经5-Aza-dC处理后,MEF2D-AS的表达量升高,而MEF2DmRNA的表达量降低.证实了MEF2D-AS的存在并预测其属于长链非编码RNA,且与MEF2D正反义RNA是反相关关系.此研究结果可为进一步探讨肝癌发生机制提供参考. 展开更多

关键词 长链非编码RNA 天然反义RNA 肝癌 MEF2D MEF2D-AS

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lncRNA TTN-AS1通过miR-519d-3p/MMP2调控肺腺癌A549细胞的活力和侵袭 被引量：3

8

作者 刘华 张素兰 +5 位作者 梁天嵩 王娟 赵静宜 郑颖娟 张相娴 杨道科 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期1789-1795,共7页

目的:观察肺腺癌组织中长链非编码RNA(lncRNA)TTN反义RNA 1(TTN-AS1)的表达情况,以及沉默TTN-AS1表达对肺腺癌A549细胞活力和侵袭的影响。方法:RT-qPCR法检测32例肺腺癌和癌旁正常组织中TTN-AS1、微小RNA-519d-3p(miR-519d-3p)和基质金... 目的:观察肺腺癌组织中长链非编码RNA(lncRNA)TTN反义RNA 1(TTN-AS1)的表达情况,以及沉默TTN-AS1表达对肺腺癌A549细胞活力和侵袭的影响。方法:RT-qPCR法检测32例肺腺癌和癌旁正常组织中TTN-AS1、微小RNA-519d-3p(miR-519d-3p)和基质金属蛋白酶2(MMP2)的mRNA表达水平。将未转染的A549细胞设为空白组,转染si-NC的为si-NC对照组,转染沉默TTN-AS1表达的siRNA为si-lncRNA组(n=5),采用CCK8和Transwell方法检测沉默TTN-AS1表达对A549细胞活力和侵袭的影响。使用双萤光素酶报告基因实验、RNA免疫沉淀实验、RT-qPCR和Western blot测定TTN-AS1对miR-519d-3p和miR-519d-3p对MMP2的靶向调控作用。结果:32例肺腺癌组织中TTN-AS1的表达水平显著高于对应癌旁正常组织(P<0.05)。沉默A549细胞中TTN-AS1的表达可抑制细胞的活力和侵袭。TTN-AS1可通过海绵吸附的方式负调控miR-519d-3p的表达;MMP2是miR-519d-3p的靶基因,受其负调控。过表达MMP2可部分逆转沉默TTN-AS1和过表达miR-519d-3p对A549细胞侵袭的抑制作用。结论:肺腺癌组织中lncRNA TTN-AS1呈现高表达情况,它可能通过miR-519d-3p/MMP2调控肺腺癌A549细胞的活力和侵袭能力。 展开更多

关键词 肺腺癌 长链非编码RNA TTN反义RNA 1 微小rna-519d-3p 细胞活力 细胞侵袭

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肺癌骨转移患者血清lncRNA MALAT1和lncRNA A2M-AS1表达水平及临床价值 被引量：3

9

作者 王金星 李鹏飞 +2 位作者 贾楠 巴义东 刘博 《医学研究与战创伤救治》 CAS 北大核心 2023年第7期750-754,共5页

目的探究肺癌骨转移患者血清非编码RNA转移相关肺腺癌转录本1(lncRNA MALAT1)和非编码RNAα-2-巨球蛋白反义RNA 1(lncRNA A2M-AS1)表达水平及临床价值。方法选取2021年9月至2022年9月在哈励逊国际和平医院经过病理学检查确诊为肺癌的16... 目的探究肺癌骨转移患者血清非编码RNA转移相关肺腺癌转录本1(lncRNA MALAT1)和非编码RNAα-2-巨球蛋白反义RNA 1(lncRNA A2M-AS1)表达水平及临床价值。方法选取2021年9月至2022年9月在哈励逊国际和平医院经过病理学检查确诊为肺癌的164例患者为肺癌组,其中经骨骼ECT检查发现84例者骨转移为骨转移组,80例无骨转移者为无骨转移组。同期选取80例肺部良性疾病患者为对照组。采用qRT-PCR法检测血清lncRNA MALAT1和lncRNA A2M-AS1表达水平;Pearson法分析lncRNA MALAT1和lncRNA A2M-AS1表达的相关性;ROC曲线分析lncRNA MALAT1和lncRNA A2M-AS1对肺癌骨转移的诊断价值。结果与对照组相比,肺癌组血清中lncRNA MALAT1表达水平显著升高(P<0.001),lncRNA A2M-AS1表达水平显著降低(P<0.001)。与无骨转移组相比,骨转移组血清中lncRNA MALAT1表达水平显著升高(P<0.001),lncRNA A2M-AS1表达水平显著降低(P<0.001)。相关性分析显示,肺癌骨转移患者血清中lncRNA MALAT1和lncRNA A2M-AS1表达水平呈负相关(r=-0.369,P<0.001)。lncRNA MALAT1和lncRNA A2M-AS1联合诊断肺癌骨转移的AUC高于两者单独诊断(P<0.05)。结论肺癌骨转移患者血清中lncRNA MALAT1表达水平显著升高,lncRNA A2M-AS1表达水平显著降低,两者联合对肺癌骨转移具有一定的诊断价值。 展开更多

关键词 肺癌 骨转移 非编码RNA转移相关肺腺癌转录本1 非编码RNAα-2-巨球蛋白反义RNA 1

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LncRNA MALAT1通过miR-34c/SATB2轴对脂肪间充质干细胞成骨分化的促进作用 被引量：3

10

作者 郭玮玮 秦悦 +1 位作者 杨海波 米占虎 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期963-971,I0002,I0003,共11页

目的:探讨长非编码RNA肺癌转移相关转录本1(LncRNA MALAT1)通过微小RNA(miR)-34c/特异AT序列结合蛋白2(SATB2)轴对脂肪来源的间充质干细胞(ADSCs)成骨分化的影响,并阐明其作用机制。方法:人ADSCs转染Lenti-NC、Lenti-MALAT1、sh-NC、sh-... 目的:探讨长非编码RNA肺癌转移相关转录本1(LncRNA MALAT1)通过微小RNA(miR)-34c/特异AT序列结合蛋白2(SATB2)轴对脂肪来源的间充质干细胞(ADSCs)成骨分化的影响,并阐明其作用机制。方法:人ADSCs转染Lenti-NC、Lenti-MALAT1、sh-NC、sh-MALAT1、miR-NC和miR-34c,RT-PCR法检测ADSCs中LncRNA MALAT1、miR-34c和SATB2 mRNA表达水平;miRcode和TargetScan 7.1网站预测并通过荧光素酶报告基因实验验证miR-34c与LncRNA MALAT1、miR-34c与SATB2之间的靶向结合作用;Western blotting法检测ADSCs中成骨标志物Runt相关转录因子2(Runx2)、骨桥蛋白(OPN)和骨钙蛋白(OCN)表达水平;碱性磷酸酶(ALP)染色和茜素红S(ARS)染色检测ADSCs中ALP和ARS水平及钙盐沉积。结果:与第0天比较,ADSCs成骨诱导第3、7、14和21天后,细胞中LncRNA MALAT1、SATB2、Runx2、OPN和OCN蛋白表达水平明显升高(P<0.05),miR-34c表达水平明显降低(P<0.05)。与Lenti-NC组和sh-NC组比较,Lenti-MALAT1组ADSCs中LncRNA MALAT1表达水平,Runx2、OPN和OCN蛋白表达水平,ALP和ARS水平明显升高(P<0.01),sh-MALAT1组上述指标明显降低(P<0.01)。与miR-NC+Lenti-NC组比较,miR-34c+Lenti-NC组ADSCs中Runx2、OPN和OCN蛋白表达水平明显降低(P<0.01),ALP和ARS水平明显降低(P<0.01),miR-34c+Lenti-MALAT1组ADSCs中上述各项指标比较差异无统计学意义(P>0.05)。与Lenti-NC+miR-NC组比较,Lenti-SATB2+miR-NC组ADSCs中Runx2、OPN和OCN蛋白表达水平及ALP和ARS水平明显升高(P<0.01),Lenti-SATB2+miR-34c组上述各项指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论:LncRNA MALAT1通过miRNA-34c/SATB2轴促进ADSCs的成骨分化。 展开更多

关键词 长链非编码RNA 肺癌转移相关转录本1 脂肪间充质干细胞 成骨分化 微小rna-34c 特异AT序列结合蛋白2

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敲低lncRNA HAS2-AS1增加氧化应激促进CAL-27人口腔鳞癌细胞自噬性死亡 被引量：2

11

作者 王熙 张淑悦 +5 位作者 王美艳 刘彩虹 谭铭博 路文博 袁博 张琪 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期825-830,共6页

目的探究长链非编码RNA透明质酸合成酶2反义转录本1(lncRNA HAS2-AS1)基因对口腔鳞癌细胞自噬性死亡和氧化应激的影响。方法采用RNA干扰技术沉默CAL-27人口腔鳞癌细胞HAS2-AS1基因,应用实时荧光定量PCR检测HAS2-AS1的表达,Western blot... 目的探究长链非编码RNA透明质酸合成酶2反义转录本1(lncRNA HAS2-AS1)基因对口腔鳞癌细胞自噬性死亡和氧化应激的影响。方法采用RNA干扰技术沉默CAL-27人口腔鳞癌细胞HAS2-AS1基因,应用实时荧光定量PCR检测HAS2-AS1的表达,Western blot法检测微管相关蛋白1轻链3BⅠ(LC3BⅠ)、LC3BⅡ、自噬相关基因7(ATG7)、P62、胱天蛋白酶3(caspase-3)、裂解型caspase-3(c-caspase-3)、caspase-9、c-caspase-9、B细胞淋巴瘤因子2(Bcl2)、Bcl2相关X蛋白(BAX)表达,免疫荧光细胞化学染色法检测细胞LC3B的表达,二氯二氢荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)负载检测细胞活性氧(ROS)的含量,流式细胞术检测细胞凋亡,试剂盒法检测超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量。结果敲低HAS2-AS1后,促进CAL-27细胞凋亡,提高细胞LC3BⅡ/LC3BⅠ、c-caspase-9/caspase-9、c-caspase-3/caspase-3、BAX/Bcl2比值以及ATG7、LC3B、MDA及ROS水平,降低P62和SOD水平。结论敲低HAS2-AS1增加细胞氧化应激促进口腔鳞癌细胞发生自噬性死亡。 展开更多

关键词 长链非编码RNA透明质酸合成酶2反义转录本1(lncRNA HAS2-AS1) 口腔癌 自噬 细胞凋亡 氧化应激

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LncRNA HAGLR激活RUNX2并抑制NLRP3炎症小体对胫骨骨折愈合的影响 被引量：3

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作者 王文 陈新宇 +2 位作者 黄兹艺 邓杨柳 崔红旺 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2023年第5期830-837,共8页

目的研究长链非编码RNA(LncRNA)HAGLR对胫骨骨折(TF)小鼠的NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体表达和骨折愈合的影响并探讨机制。方法体外对成骨细胞MC3T3-E1沉默HAGLR,CCK-8法检测细胞活力,TUNEL法检测细胞凋亡,qPCR法检测骨碱性磷酸酶(BA... 目的研究长链非编码RNA(LncRNA)HAGLR对胫骨骨折(TF)小鼠的NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体表达和骨折愈合的影响并探讨机制。方法体外对成骨细胞MC3T3-E1沉默HAGLR,CCK-8法检测细胞活力,TUNEL法检测细胞凋亡,qPCR法检测骨碱性磷酸酶(BALP)和骨钙素的表达。Western blot法检测RUNX2、磷酸化RUNX2(p-RUNX2)以及NLRP3、半胱天冬酶1(Caspase1)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、白细胞介素-1β(IL-1β)的表达。通过小鼠TF手术建立TF小鼠模型,在模型小鼠体内过表达HAGLR,并在过表达HAGLR的基础上沉默RUNX2或加入炎症小体抑制剂MCC950。qPCR法检测HAGLR和RUNX2的表达,Western blot法检测胰岛素样生长因子-1(IGF-1)的表达。microCT测量小鼠骨痂体积(MBV),称量小鼠的全长胫骨湿重。结果沉默HAGLR导致MC3T3-E1细胞活力降低且凋亡率增加(P<0.05),且RUNX2、p-RUNX2、BALP和骨钙素表达量均降低(P<0.05),NLRP3、Caspase1、ASC、IL-1β的表达量都增加(P<0.05)。与健康组织比较,TF小鼠体内HAGLR和RUNX2表达量降低(P<0.05)。过表达HAGLR促进TF小鼠体内的HAGLR和RUNX2表达,并增加MBV和全长胫骨湿重以及IGF-1的表达量(P<0.05)。在过表达HAGLR的基础上沉默RUNX2导致TF小鼠的MBV、全长胫骨湿重和IGF-1表达量都降低(P<0.05)。而在过表达HAGLR的基础上加入NLRP3炎症小体抑制剂MCC950导致MBV、全长胫骨湿重和IGF-1表达又增加(P<0.05)。结论LncRNA HAGLR通过激活RUNX2并抑制NLRP3炎症小体促进TF的愈合。 展开更多

关键词 胫骨骨折 同源框D基因簇反义生长相关的长非编码RNA Runt相关转录因子2 NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3 炎症小体

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敲低lncRNA CACNA1C-AS2促进上皮间质转化增强人食管癌细胞的增殖、侵袭和迁移 被引量：5

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作者 秦玉萍 曹通 +3 位作者 许颖 蒋旭 马佳 禹莉 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期249-257,共9页

目的 探讨钙电压门控通道亚基α1C反义RNA2(CACNA1C-AS2)通过调节上皮间质转化(EMT)对食管癌细胞恶性生物学行为的影响。方法 通过癌症基因组图谱(TCGA)数据库分析CACNA1C-AS2在癌旁组织和食管癌组织的表达;实时定量PCR检测食管癌细胞中... 目的 探讨钙电压门控通道亚基α1C反义RNA2(CACNA1C-AS2)通过调节上皮间质转化(EMT)对食管癌细胞恶性生物学行为的影响。方法 通过癌症基因组图谱(TCGA)数据库分析CACNA1C-AS2在癌旁组织和食管癌组织的表达;实时定量PCR检测食管癌细胞中CACNA1C-AS2 mRNA表达水平;在食管癌细胞中敲低和高表达CACNA1C-AS2后,采用噻唑蓝(MTT)法和细胞集落形成实验检测细胞的活力,TranswellTM小室法检测细胞的侵袭能力和纵向迁移能力,划痕愈合实验检测细胞的横向迁移能力,流式细胞术检测细胞的凋亡率;Western blot法检测神经钙黏素(N-cadherin)、波形蛋白(vimentin)和锌指转录因子snail 2(slug)蛋白表达。结果 CACNA1C-AS2在食管癌组织和细胞系中均低表达;敲低EC-9706细胞和Eca-109细胞中CACNA1C-AS2后,食管癌细胞的侵袭、迁移能力和细胞活力显著增强,细胞凋亡减少;N-cadherin、vimentin和slug表达上调。过表达CACNA1C-AS2则结果相反。结论 CACNA1C-AS2通过促进EMT增强食管癌细胞的增殖、侵袭和迁移。 展开更多

关键词 食管癌 长链非编码RNA(lncRNA) 钙电压门控通道亚基α1C反义RNA2(CACNA1C-AS2) 上皮间质转化(EMT)

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敲减FEZF1-AS1通过阻断JAK2/STAT3通路抑制食管鳞状细胞癌细胞的侵袭和迁移 被引量：3

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作者 曹一通 王小文 陈力 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期317-324,共8页

目的探讨长链非编码RNA Fez家族锌指蛋白1反义核糖核酸1(FEZF1-AS1)与食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞侵袭、迁移以及与Janus激酶2/信号转导子和转录激活子3(JAK2/STAT3)信号通路的关系。方法用实时定量PCR检测ESCC的癌组织和ESCC细胞系中FEZF... 目的探讨长链非编码RNA Fez家族锌指蛋白1反义核糖核酸1(FEZF1-AS1)与食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞侵袭、迁移以及与Janus激酶2/信号转导子和转录激活子3(JAK2/STAT3)信号通路的关系。方法用实时定量PCR检测ESCC的癌组织和ESCC细胞系中FEZF1-AS1的表达;构建敲减FEZF1-AS1的慢病毒表达载体,敲减KYSE150、KYSE510细胞的FEZF1-AS1后,流式细胞术检测细胞周期的变化,集落形成实验检测细胞增殖能力,TranswellTM侵袭实验检测细胞侵袭能力,TranswellTM迁移和划痕实验检测细胞迁移能力,Western blot法检测JAK2和磷酸化的STAT3(p-STAT3)蛋白水平。结果在ESCC的癌组织FEZF1-AS1高表达;与正常食管鳞状上皮细胞相比,KYSE150、KYSE510细胞FEZF1-AS1表达高;敲减FEZF1-AS1表达后,ESCC癌细胞的细胞周期和增殖无明显变化,但明显抑制细胞的侵袭和迁移,且JAK2蛋白水平降低,p-STAT3蛋白水平增加。结论敲减FEZF1-AS1阻断JAK2/STAT3通路抑制ESCC细胞的侵袭和迁移。 展开更多

关键词 食管鳞状细胞癌(ESCC) 长链非编码RNA(lncRNA) Fez家族锌指蛋白1反义核糖核酸1(FEZF1-AS1) Janus激酶2/信号转导子和转录激活子3(JAK2/STAT3) 侵袭 迁移

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lncRNA ZFAS1通过miR-588/HMGA2轴促进肝癌HepG2细胞的增殖、侵袭和迁移 被引量：4

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作者 韩建涛 谢兴旺 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期449-455,共7页

目的:探讨长链非编码RNA锌指结构反义转录本1(lncRNA ZFAS1)调控miR-588/高迁移率蛋白A2(HMGA2)轴对肝癌HepG2细胞增殖、侵袭、迁移的影响。方法:qPCR、WB法检测80例肝癌组织及对应癌旁组织(2018年1月至2019年12月在武汉第三医院首义院... 目的:探讨长链非编码RNA锌指结构反义转录本1(lncRNA ZFAS1)调控miR-588/高迁移率蛋白A2(HMGA2)轴对肝癌HepG2细胞增殖、侵袭、迁移的影响。方法:qPCR、WB法检测80例肝癌组织及对应癌旁组织(2018年1月至2019年12月在武汉第三医院首义院区手术切除标本)及人正常肝LO2细胞和肝癌HepG2、Huh7、HCCLM3细胞中ZFAS1、miR-588及HMGA2表达水平;采用Kaplan-Meier进行患者生存曲线分析。将HepG2细胞分为空白组、si-NC组、si-ZFAS1组、si-ZFAS1+inhibitor NC组、si-ZFAS1+miR-588 inhibitor组;qPCR检测各组HepG2细胞中ZFAS1、miR-588表达水平,WB法检测各组HepG2细胞中HMGA2蛋白表达;CCK-8法、Transwell和划痕实验分别检测各组HepG2细胞的增殖、侵袭和迁移能力;双荧光素酶报告基因实验分别验证ZFAS1和miR-588、miR-588和HMGA2的靶向关系。用HepG2细胞移植瘤裸鼠模型检测敲减ZFAS1或/和miR-588对移植瘤生长的影响。结果:在肝癌组织和肝癌细胞中,ZFAS1、HMGA2呈高表达,miR-588呈低表达(均P<0.05);ZFAS1低表达患者2年生存率高于高表达组(P<0.05);与空白组比较,si-ZFAS1组ZFAS1、HMGA2表达水平显著降低,miR-588表达水平显著升高(均P<0.05)。与si-ZFAS1组比较,si-ZFAS1+miR-588 inhibitor组中ZFAS1表达水平无显著变化(P>0.05),HMGA2表达水平显著升高、miR-588表达水平显著降低(P<0.05);敲减ZFAS1可抑制HepG2细胞的增殖、侵袭和迁移能力,并抑制裸鼠体内移植瘤的生长(均P<0.05);ZFAS1靶向miR-588并抑制后者的表达,miR-588靶向HMGA2并抑制后者的表达;同时抑制ZFAS1和miR-588表达可逆转敲减ZFAS1对HepG2细胞增殖、侵袭与迁移能力及体内移植瘤生长的抑制作用(均P<0.05)。结论:敲减ZFAS1可通过促进miR-588表达来下调HMGA2表达,进而抑制肝癌HepG2细胞的增殖、侵袭与迁移能力。 展开更多

关键词 长链非编码RNA锌指结构反义转录本1 miR-588 高迁移率蛋白A2 肝癌 增殖 迁移 侵袭

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LncRNA MYLK-AS1调节miR-141-3p/STMN1轴对胃癌细胞增殖、凋亡和侵袭的影响

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作者 刘洁 谢兴明 +1 位作者 钮洪霞 杨先智 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期276-282,共7页

目的:探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)肌球蛋白轻链激酶反义RNA1(myosin light chain kinase antisense RNA1,MYLK-AS1)调节miR-141-3p/微管不稳定蛋白1(stathmin 1,STMN1)轴对胃癌细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。方法:将H... 目的:探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)肌球蛋白轻链激酶反义RNA1(myosin light chain kinase antisense RNA1,MYLK-AS1)调节miR-141-3p/微管不稳定蛋白1(stathmin 1,STMN1)轴对胃癌细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。方法:将HGC27细胞分为NC组、si-NC组、si-MYLK-AS1组、si-MYLK-AS1+inhibitor NC组、si-MYLK-AS1+miR-141-3p inhibitor组。双萤光素酶报告基因实验检测LncRNA MYLK-AS1、miR-141-3p、STMN1的关系;qRT-PCR检测HGC27细胞中LncRNA MYLK-AS1、miR-141-3p表达;CCK-8法检测HGC27细胞增殖情况;流式细胞术检测HGC27细胞凋亡;使用Transwell实验评估了HGC27细胞的侵袭和迁移能力,并统计了穿透基质膜的细胞数量;同时采用Western blot技术检测了HGC27细胞中STMN1、E-cadherin、Vimentin及N-cadherin这几种蛋白表达量的变化。结果:HGC27细胞中LncRNA MYLK-AS1、STMN1水平高于GES-1细胞(P<0.05),miR-141-3p水平低于GES-1细胞(P<0.05)。si-MYLK-AS1组HGC27细胞A_(450 nm)值、迁移、侵袭细胞数量、LncRNA MYLK-AS1表达量、STMN1、N-cadherin、Vimentin蛋白水平低于NC组、si-NC组(P<0.05),HGC27细胞凋亡率、miR-141-3p表达量、E-cadherin蛋白水平高于NC组、si-NC组(P<0.05);而miR-141-3p低表达减弱了沉默LncRNA MYLK-AS1抑制HGC27细胞发展的作用;LncRNA MYLK-AS1靶向调节miR-141-3p/STMN1轴。结论:LncRNA MYLK-AS1可能通过上调microRNA-141-3p的表达水平,间接导致STMN1基因表达受到抑制,这一过程可能对胃癌细胞的增殖、凋亡及侵袭特性产生明显影响。 展开更多

关键词 长链非编码RNA肌球蛋白轻链激酶反义RNA1 微小rna-141-3p/微管不稳定蛋白1轴 胃癌 增殖 凋亡 侵袭

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lncRNA PAX8-AS1对结直肠癌细胞增殖、凋亡和侵袭的作用及其机制

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作者 闫圣玉 刘昌化 +4 位作者 许志杰 丁雅婷 谢亚锋 张侨 刘菀莹 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期656-664,共9页

目的:探讨长链非编码RNA配对盒8反义RNA 1(PAX8-AS1)在人结直肠癌(CRC)组织中的表达水平及其对CRC细胞增殖、凋亡及侵袭的作用,并阐明其作用机制。方法:采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测94例CRC患者癌组织和癌细胞中PAX8-AS1 mRNA和m... 目的:探讨长链非编码RNA配对盒8反义RNA 1(PAX8-AS1)在人结直肠癌(CRC)组织中的表达水平及其对CRC细胞增殖、凋亡及侵袭的作用,并阐明其作用机制。方法:采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测94例CRC患者癌组织和癌细胞中PAX8-AS1 mRNA和miR-22-3p表达水平。将PAX8-AS10 siRNA小分子序列与miR-22-3p inhibitors分别转染或共转染至CRC细胞中,转染后细胞分为si-NC组(转染阴性序列)、si-PAX8-AS1组(转染PAX8-AS1 siRNA)、si-PAX8-AS1+inhibitors NC组(共转染PAX8-AS1 siRNA和inhibitors NC)和si-PAX8-AS1+inhibitors组(共转染PAX8-AS1 siRNA和miR-22-3p inhibitors),另取未经任何转染的SW480细胞作为对照组。RTqPCR法检测转染后各组细胞中PAX8-AS1 mRNA和miR-22-3p表达水平,MTT法检测各组细胞增殖活性,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,Transwell小室实验检测各组细胞迁移和侵袭率,Western blotting法检测各组细胞中B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和cleaved Caspase-3蛋白表达水平,双荧光素酶报告基因实验验证PAX8-AS1与miR-22-3p的靶向关系。结果:RT-qPCR法检测,与癌旁组织比较,癌组织中PAX8-AS1 mRNA表达水平明显升高(P<0.01),miR-22-3p表达水平明显降低(P<0.01);与人正常结肠上皮细胞NCM460比较,SW480、SW620、HT-29和LoVo细胞中PAX8-AS1 mRNA表达水平均明显升高(P<0.05或P<0.01),miR-22-3p表达水平均明显降低(P<0.05或P<0.01)。与对照组和si-NC组比较,si-PAX8-AS1组细胞中PAX8-AS1 mRNA表达水平明显降低(P<0.01),miR-22-3p表达水平明显升高(P<0.01);与si-NC组比较,si-PAX8-AS1+inhibitors NC组细胞中miR-22-3p表达水平明显升高(P<0.01)。MTT法检测,与对照组比较,si-PAX8-AS1组、si-PAX8-AS1+inhibitors NC组和si-PAX8-AS1+inhibitors组细胞培养48和72 h时细胞增殖活性均明显降低(P<0.01);与si-NC组比较,si-PAX8-AS1+inhibitors NC组细胞培养48和72 h时细胞增殖活性均明显降低(P<0.01)。流式细胞术检测,与对照组比较,si-PAX8-AS1组细胞凋亡率明显升高(P<0.01);与si-NC组比较,si-PAX8-AS1组和si-PAX8-AS1+inhibitors NC组细胞凋亡率明显升高(P<0.01)。Transwell小室实验检测,与对照组比较,si-PAX8-AS1组细胞迁移和侵袭率明显降低(P<0.01);与si-NC组比较,si-PAX8-AS1组和si-PAX8-AS1+inhibitors NC组细胞迁移和侵袭率明显降低(P<0.01)。Western blotting法检测,与对照组和si-NC组比较,si-PAX8-AS1组细胞中Bax和cleaved Caspase-3蛋白表达水平明显升高(P<0.01),Bcl-2蛋白表达水平降低(P<0.05)。TargetScan预测PAX8-AS1与miR22-3p存在靶向结合位点。双荧光素酶报告基因实验,与共转染mimics NC的细胞比较,miR-22-3p mimics共转染后PAX8-AS1-WT细胞中荧光素酶活性明显降低(P<0.01)。结论:PAX8-AS1在人CRC组织中高表达,沉默PAX8-AS1可抑制CRC细胞增殖、迁移和侵袭,并诱导细胞凋亡,其机制可能与上调miR22-3p表达有关。 展开更多

关键词 长链非编码RNA 配对盒8反义RNA 1 微小rna-22-3p 结直肠肿瘤 细胞凋亡

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